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文档简介
实验用羊管理规范范围本文件规定了实验用羊的生产和开展动物实验的总体要求、设施与环境、实验用羊质量管理、动物实验管理、动物运输、废弃物处理等要求。本文件适用于实验用羊,包括绵羊和山羊的生产和使用管理。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T14924.2实验动物配合饲料卫生标准GB14925实验动物环境及设施GB18871电离辐射防护与辐射源安全基本标准GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27416实验动物机构质量和能力的通用要求GB/T34791实验动物质量控制要求GB/Z34792实验动物引种技术规程GB/T35823实验动物动物实验通用要求GB/T35892实验动物福利伦理审查指南GB/T39760实验动物安乐死指南GB/T39915动物饲养场防疫准则GB50346生物安全实验室建筑技术规范NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T682畜禽场场区设计技术规范NY/T816肉羊营养需要量NY/T1167畜禽场环境质量及卫生控制规范NY/T3052舍饲肉羊饲养管理技术规范NY/T3236活动物跨省调运风险分析指南NY/T3467牛羊饲养场兽医卫生规范NY/T5339无公害农产品畜禽防疫准则RB/T061实验动物安乐死技术规范术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
实验用羊experimentalsheepandgoat用于科学研究、教学、检验检测以及其他科学实验的羊。
实验用羊生产设施breedingfacilityforexperimentalsheepandgoat用于实验用羊生产的建筑物和设备的总和。
实验用羊实验设施experimentalfacilityforexperimentalsheepandgoat以研究、试验、教学、生物制品和药品及相关产品生产、检验检测等为目的而进行实验用羊试验的建筑物和设备的总和。
普通环境conventionalenvironment通过人工控制,满足普通级实验动物生产或使用要求的各种因素总和。[来源:GB14925—2023,3.4]
屏障环境barrierenvironment满足无特定病原体(specificpathogenfree,SPF)级实验动物生产或使用要求的各种因素总和。[来源:GB14925—2023,3.5]
普通级实验用羊conventional(CV)sheepandgoat普通实验用羊不携带所规定的对动物和(或)人健康造成严重危害的人兽共患病原体和动物烈性传染病病原体的实验用羊。
无特定病原体级实验用羊specificpathogenfree(SPF)sheepandgoat无特定病原体实验用羊SPF实验用羊除普通级实验用羊应排除的病原体外,不携带对动物健康危害大和(或)对科学研究干扰大的病原体的实验用羊。总体要求基本要求实验用羊的防疫和卫生应符合GB/T39915、NY/T5339和NY/T3467要求。实验用羊引种按照GB/Z34792的规定执行,符合核心育种场管理规范要求。选择行业认可的种子中心或种源基地进行引种。实验用羊生产按照引进羊的品种要求设立羊群结构、饲养密度,开展种公羊、母羊(后备母羊、妊娠母羊、泌乳母羊等)、羔羊、育成羊的饲养管理。实验用羊生产区与畜牧养殖区应相互独立或隔离,并做好实验用羊生产繁殖记录,保障遗传背景明确。用于开展动物实验的羊应来源于培育和饲养的动物群体,保障动物质量,防止人兽共患病。实验用羊饲养管理按照NY/T3052执行。饲料应满足实验用羊的正常生理需求,营养指标和卫生指标应分别符合NY/T816和GB/T14924.2的要求。进入屏障环境的饲料应经消毒灭菌处理。动物饮水应符合GB14925饮水的要求。开展动物实验应符合GB/T35823的要求。遵循福利伦理原则。开展动物实验的环境设施应符合GB14925要求。负压屏障设施应符合病原微生物实验室安全管理办法及相关标准要求。人员人员应符合GB/T27416和GB/T34791规定。管理体系文件机构宜按照GB/T27416规定建立管理体系文件。设施与环境分类按照设施的使用功能,分为实验用羊生产设施和实验用羊实验设施。按照空气净化的控制程度,实验用羊环境分为普通环境和屏障环境,见表1。实验用羊的环境分类环境分类使用功能适用动物等级普通环境—生产、实验、检疫普通级屏障环境正压生产、实验、检疫SPF级负压实验、检疫普通级、SPF级表中“—”表示不作要求。生产设施基本要求应获得《动物防疫条件合格证》。生产场区设计应符合NY/T682的规定,环境质量与卫生控制应符合NY/T1167的规定。屏障环境生产设施应满足实验用羊生产繁殖特性,工艺布局宜包括隔离检疫室、缓冲间、风淋室、育种室、扩大群饲养室、生产群饲养室、待发室、清洁物品贮存室、消毒后室、走廊。实验设施基本要求选址宜远离有严重空气污染、振动或有噪声干扰的铁路、码头、飞机场、交通要道、工厂、贮仓、屠宰场、堆场等区域。实验室外环境整洁,便于清扫和消毒。排水畅通,无废物堆积和污水积存。应有防止野生动物进入的装置。实验设施排水口还应采取防止害虫进入的措施。实验设施走廊净宽宜不小于1.5m。门大小应满足设备进出和日常工作需要,净宽宜不小于1.0m。排水沟、槽、管坡度应保证排水通畅,无污物积存。排水管道管径不宜小于DN150。宜设置环境监控系统。总体布局应根据实验用羊的生理需要和行为特征,设计建造适合其居住的设施,并能控制人员和动物进出。一般分为前区、实验区和辅助区。前区:宜包括办公室、接待室、档案资料室、维修室、库房、饲料室、配电室、一般走廊和动物装卸平台等。实验区:宜包括缓冲间、风淋室、检疫间、隔离室、操作室、手术室、饲育间、清洁物品贮存室、消毒后室、走廊。辅助区:宜包括仓库、洗刷消毒室、废弃物处理室(设备)、解剖室、机械设备室、淋浴间、工作人员休息室、更衣室等。实验用羊实验设施应与生产设施分开设置。实验用羊的隔离检疫间应与实验用羊实验区分开设置。开展放射性实验,设施还应符合GB18871要求。开展实验用羊生物安全实验,设施还应符合GB19489和GB50346的要求。饲料和垫料储藏室应实行环境控制,防止寄生虫污染和野生动物进入,并进行必要的温湿度控制。饲养间宜设实验用羊活动空间。环境技术指标实验用羊的环境技术指标应符合表2的要求。实验用羊的环境技术指标项目普通环境(生产设施)普通环境(使用设施)屏障环境温度/℃—16~2820~26日温差/℃,≤—4相对湿度/%—30~70相通区域静压差/Pa,≥——10气流速度/(m/s),≤—0.2换气次数/(次/h),≥—815空气洁净度级别/级——7沉降菌平均浓度/(CFU/0.5h·Φ90mm平皿),≤——3氨气浓度/(mg/m3),≤14噪声/dB(A),≤60照度/lx工作照度,≥—150动物照度—100~200光照明暗交替时间/h—12/12或14/10表2实验用羊的环境技术指标(续)生产设施的待发室、检疫间和隔离室主要技术指标应符合表2的规定。实验设施的检疫间和隔离室主要技术指标应符合表2的规定。正压屏障环境的单走廊设施应保证动物生产区、动物实验区压力最高;双走廊或多走廊设施应保证洁净走廊的压力高于动物生产区、动物实验区,且动物生产区、动物实验区的压力高于污物走廊。所有负压屏障环境应保证动物实验区压力最低。表中“—”表示不作要求。氨浓度指标为有实验用羊时的指标。空气洁净度、沉降菌平均浓度为静态时的指标。检测项目按照GB14925执行。屏障环境设施的洁净辅助区环境指标应符合GB14925的要求。设备环境技术指标应按GB14925所列方法检测。检测指标包括设备内部技术指标和设备所处房间的温度、相对湿度和噪声。笼具围栏笼具围栏应符合实验用羊的生理、健康及福利要求,满足GB14925笼具的要求。实验用羊笼具围栏应符合表3的要求。实验用羊笼具围栏最小尺寸饲养数量/头体重/kg底板面积/(m2/头)笼内高度/m1<250.90.825~501.351.0>50≥1.81.22~5<250.760.825~501.121.0>50≥1.531.2>5<250.670.825~501.021.0>50≥1.351.2料盘选用无毒、易冲洗、耐高温、耐酸碱、易消毒灭菌的材料制作料盘。料盘的大小应满足同栏所有动物同时进食的要求。自动落料料盘应保证实验用羊能自主无障碍采食到饲料。福利用品应符合GB14925福利用品的要求。实验用羊质量管理微生物与寄生虫学等级实验用羊按微生物、寄生虫学等级分类分为普通级和无特定病原体级。检测指标和项目临床检查可根据需求选择外观、血常规、血生化、影像等检查方法,实验用羊临床检查应无异常。检测项目实验用羊病原微生物及寄生虫检测项目按表4的要求。实验用羊病原微生物及寄生虫检测项目动物等级检测项目检测要求无特定病原体级普通级布X氏菌Brucella●炭疽芽孢杆菌Bacillusanthracis○溶血性曼氏杆菌Mannheimiahaemolytica○溶血性链球菌Hemolyticstreptococcus○钩端螺旋体Leptospira○皮肤病原真菌Pathogenicdermalfungi○贝氏柯克斯体Coxiellaburnetii○口蹄疫病毒Footandmouthdiseasevirus▲小反刍兽疫病毒Pestedespetitsruminantsvirus▲绵羊/山羊痘病毒Sheep/Goatpoxvirus○体外寄生虫Ectoparasites○弓形虫Toxoplasmagondii●棘球蚴Echinococcus▲山羊支原体Mycoplasmacapricolum●副结核分枝杆菌Mycobacteriumparatuberculosis●胎儿弯曲杆菌Campylobacterfetus●衣原体Chlamydia●蓝舌病病毒Bluetonguevirus○口疮病毒Orfvirus●伪狂犬病毒Pseudorabiesvirus●绵羊梅迪-维纳斯病毒和山羊关节炎-脑炎病毒Maedi-visnavirusandCaprinearthritisencephalitisvirus○绵羊肺腺瘤病毒Ovinepulmonaryadenomatosisvirus○球虫Coccidia○隐孢子虫Cryptosporidium○新孢子虫Neospora●梨形虫Piroplasma●锥虫Trypanosome○贾第虫Giardia●表4实验用羊病原微生物及寄生虫检测项目(续)动物等级检测项目检测要求无特定病原体级蠕虫Helminths●羊泰勒虫OvineTheileria●羊附红细胞体Eperythrozoonovis(Mycoplasmaoviscomb.nov.)●巴贝斯虫Babesiaovis●●必须检测,要求阴性;▲必须检测,普通级可以免疫,无特定病原体级不能免疫;○必要时检测。必须检测项目:指在实验动物用羊质量评价、等级确定时必须检测的项目。必要时检测项目:指相关行政部门要求时,本病流行时、进出口时,或特殊实验要求时需要检测的项目。因动物疫病防控需要对布X氏菌、炭疽芽孢杆菌进行免疫的,普通级可以免疫,无特定病原体级不能免疫。检测程序检测程序见图1。检测程序检测方法实验用羊病原微生物和寄生虫的检测方法见附录A。检测规则检测频率普通级实验用羊每6个月应至少检测1次;无特定病原体级实验用羊每3个月应至少检测1次。取样要求应选择2月龄以上的实验用羊。根据实验用羊群体大小,取样数量见表5。取样数量群体大小/头取样数量/头<100≥5100~500≥10>500≥15动物送检容器应按动物级别要求编号和标识,包装好,安全送达实验室,并附送检单,写明动物品种品系、等级、数量和检测项目。采样方法应按照NY/T541进行。结果判定存在多种检测方法,任何一种方法检测阳性将判定为阳性。免疫项目,免疫动物应群体免疫合格率不低于70%,其中口蹄疫群体免疫合格率应达到80%以上,开展动物实验时宜加强核酸检测。非免疫项目,抗体阴性判定为合格。结果评价:在检测的各等级实验用羊中,如有某项指标不符合该等级指标,则判定为不符合该等级。动物实验管理通用要求动物实验管理按照GB/T35823执行。遵循福利伦理原则使用实验用羊应符合“替代、减少、优化”原则。使用合格的实验用羊,保障人和动物的健康。在生产、使用和运输过程中应当维护实验用羊福利,关爱实验用羊不得虐待实验用羊。采取有效措施,保障实验用羊处于舒适、健康、快乐等自然生活状态的五项自由,包括免于饥渴的自由,免于不适的自由,免于痛苦、伤害和疾病的自由,表达主要天性的自由,免于恐惧和焦虑的自由。在不影响实验结果判定的情况下,尽可能减少实验用羊的痛苦或缩短动物承受痛苦的时间。在对实验用羊进行手术或其他活体操作时,应进行有效的麻醉、镇静或止痛;实验用羊处于手术后、患病等疼痛、痛苦状态时应实施有效的治疗、止痛;处死实验用羊时应实施安死术。福利伦理审查按照GB/T35892有关规定,对使用实验用羊的必要性、合理性和规范性进行检查和审定。麻醉、止痛和镇静麻醉、止痛和镇静应选用药用级化合物,选用非药用级化合物的,应获得福利伦理审查通过。麻醉剂种类分为注射麻醉剂和气体麻醉剂。注射麻醉剂适用于短期手术,气体麻醉剂适用于较长时间手术。使用气体麻醉剂前通常使用注射麻醉剂诱导麻醉,再使用气体麻醉剂维持麻醉。气体麻醉不宜作为首选麻醉方式单独使用。怀孕羊长时间使用气体麻醉(>1h)会增加胎儿血液二氧化碳水平,应减少25%~40%的使用量。止痛药一般用于减轻动物疾病或手术后疼痛的严重程度和持续时间。根据动物疼痛级别、药物作用等因素综合确定给药频次和时间。镇静剂主要用于动物化学XX、手术前期麻醉等过程,可以减少动物焦虑、恐惧和过度活动。常用麻醉、止痛和镇静药物见附录B。安乐死按照GB/T39760、RB/T061规范执行。动物运输实验用羊的运输条件应充分考虑动物安全性和舒适度,保证动物健康和福利。按照GB14925动物运输规定执行。当跨省运输动物时,宜按照NY/T3236开展风险分析。废弃物处理按照GB14925废弃物处理规定执行。
(资料性)
实验用羊病原微生物和寄生虫的检测方法实验用羊病原微生物和寄生虫的检测方法见表A.1。实验用羊病原微生物和寄生虫的检测方法病原体推荐检测标准检测方法布X氏菌GB/T18646抗体检测、核酸检测、病原检测炭疽芽孢杆菌NY/T561核酸检测、抗体检测溶血性曼氏杆菌DB15/T2907—2023病原分离、核酸检测、抗体检测(参考标准中的病原检测方法)溶血性链球菌GB/T14926.16病原分离(参考标准中的病原分离方法)钩端螺旋体GB/T14926.46抗体检测皮肤病原真菌GB/T14926.4培养鉴定贝氏柯克斯体SN/T1087、SN/T3395抗体检测、核酸检测口蹄疫病毒GB/T18935抗体检测、核酸检测、病原检测小反刍兽疫病毒GB/T27982抗体检测、核酸检测绵羊/山羊痘病毒NY/T576抗体检测、核酸检测体外寄生虫GB/T18448.1镜检弓形虫NY/T573抗体检测、核酸检测棘球蚴NY/T1466抗体检测、核酸检测山羊支原体NY/T1468抗体检测、核酸检测副结核分枝杆菌GB/T27637核酸检测、抗体检测胎儿弯曲杆菌GB/T18653病原分离衣原体NY/T562抗体检测、核酸检测蓝舌病病毒GB/T18636抗体检测、核酸检测口疮病毒NY/T1244、SN/T5194抗体检测、核酸检测伪狂犬病病毒GB/T18641抗体检测、核酸检测绵羊梅迪-维纳斯病毒和山羊关节炎-脑炎病毒SN/T1171抗体检测、核酸检测绵羊肺腺瘤病毒SN/T3484核酸检测球虫GB/T18647镜检隐孢子虫NY/T1949、GB/T35942镜检、核酸检测新孢子虫SN/T3499抗体检测、核酸检测梨形虫SN/T3485抗体检测、核酸检测锥虫GB/T23239镜检、抗体检测贾第虫GB/T19526、GB/T18448.10镜检表A.1实验用羊病原微生物和寄生虫的检测方法(续)病原体推荐检测标准检测方法蠕虫GB/T19526、GB/T18448.6镜检羊泰勒虫GB/T42117镜检、核酸检测羊附红细胞体NY/T1953镜检、核酸检测巴贝斯虫SN/T2974镜检、抗体检测羊边虫SN/T2021镜检、核酸检测
(资料性)
实验用羊常用麻醉、止痛和镇静药物实验用羊常用麻醉、止痛和镇静药物见表B.1。实验用羊常用麻醉、止痛和镇静药物类别使用方式药品名麻醉剂呼吸异氟烷(isoflurane)、七氟烷(sevoflurane)注射单用:氯胺酮(ketamine)、硫喷妥钠(thiopentalsodium)、丙泊酚(propofol)联合使用:氯胺酮(ketamine)/赛拉嗪(xylazine)、地西泮(diazepam)/氯胺酮(ketamine)、替来他明(tiletamine)/唑拉西泮(zolazepam)等止痛药注射丁丙诺啡(buprenorphine)、布托菲诺(butorphanol)镇静剂注射α-2肾上腺素能药物:赛拉嗪(xylazine)、美托咪啶(medetomidine)、地托咪定(detomidine)等酚噻嗪类药物:乙酰丙嗪(acepromazine)等苯二氮卓类药物:地西泮(diazepam)等参考文献[1]GB14922实验动物微生物、寄生虫学等级及监测[2]GB/T14926.4实验动物皮肤病原真菌检测方法[3]GB/T14926.16实验动物乙型溶血性链球菌检测方法[4]GB/T14926.46实验动物钩端螺旋体检测方法[5]GB/T18448.1实验动物体外寄生虫检测方法[6]GB/T18448.6实验动物蠕虫检测方法[7]GB/T18448.10实验动物肠道鞭毛虫和纤毛虫检测方法[8]GB/T18636蓝舌病诊断技术[9]GB/T18641伪狂犬病诊断方法[10]GB/T18646动物布X氏菌病诊断技术[11]GB/T18647动物球虫病诊断技术[12]GB/T18653
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