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DB51/T1097—2010牛奶中沙丁胺醇残留检测方法一四川省质量技术监督局发布IDB51/T1097—2010 1 13制样 1 1 3本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。本标准起草单位：四川省兽药监察所、四川省兽药残留监控中心。本标准主要起草人：吴晓岚、程江、彭莉、岳秀英、熊浩山、官艳丽、王海波。11范围凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。3制样3.2样品的保存4测定方法4.2试剂和材料4.2.2沙丁胺醇检测试剂盒：2℃~8℃保存。(采用官方备案的试剂盒)。4.2.2.196孔板酶标板8条×12孔，包被有沙丁胺醇偶联抗原。4.2.2.2沙丁胺醇系列标准溶液0μg/L、0.2μg/L、0.6μg/L、1.8μg/L、5.4μg/L、16.2μg/L。4.2.2.4抗体工作液。4.2.2.5底物溶液A。4.2.2.6底物溶液B。4.2.2.7浓缩洗涤液临用前用水稀释二十倍作为洗涤液。24.2.2.8浓缩复溶液临用前用水1:1稀释。4.3仪器和设备4.3.1酶标仪(配备450nm滤光片)。4.3.2天平感量0.01g。4.3.3g4.3.4漩涡混合器4.3.5振荡器4.3.6氮吹仪4.3.7冷冻离心机4.3.9微量移液器单道50μL,100μL,1000μL多道50μL-250μL4.4测定步骤4.4.1试料的制备4.4.2提取和净化4.4.3量取2.0mL制备后的试料于离心管中，加入6mL乙腈，振摇10min,于3000r/min15℃离心4.4.4样品测定程序(20℃~25℃条件下操作)4.4.4.1使用前将试剂盒置于室温(20℃~25℃)平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的酶标板微孔条插入框架中，将不用的微孔条放入自封袋，保存于2℃~8℃。将样后倒出孔中液体，用吸水纸拍干，如此重复操作共洗板5次。如前述洗板5次。4.5结果计算和表述所获得的标准或样品吸光度值的平均值除以第一个标准(0标准)吸光度值的平均值再乘以100%,得到以百分比给出的吸光度值，以式(1.1)表示：3DB51/T1097—2010B₀—为零浓度标准溶液的平均吸光度值。以X轴为标准溶液中沙丁胺醇浓度(μg/L)的自然对数，Y轴为百分吸光度值，在半对数坐标纸上绘制标准曲线图。相对应的供试样品的浓度(μg/L)可以从标准曲线上查出。也可以求出回归曲线的方程，计算未知样品中沙丁胺醇的浓度。如果有专业计算机软件可直接求出供试样中沙丁胺醇的浓度。注：检测结果小于5.0μg/L时，可判为未检出，大于5.0μg/L时，判为可疑，需用确证法确认。本方法在牛奶中的最低检测限为1.0μg/L。本方法在牛奶中

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