DB45T 2577-2022 草地牧草种质资源收集与保存技术规范

ICS65020.20CCSB0545TechnicalspecificationsforforagegermplasmresourcescollectionandpresIDB45/T2577—2022 2规范性引用文件 3术语和定义 2前期准备 2收集对象 2种质资源样本收集 3采样植株营养成分测定 3样本图片资料采集与管理 3样本标本的采集、制作与管理 35保存 4有性繁殖种质资源的入库保存 4无性繁殖资源的入圃保存 56建立信息数据库 5附录A（资料性）牧草种质资源收集与暂存 6附录B（规范性）营养成分分析测定 B.1采样 B.2营养成分分析样品的制备 B.3检测项目和测定方法 B.4记录 附录C（规范性）图片信息采集与管理 C.1图片采集 C.2图片管理 附录D（规范性）标本的采集与制作 D.1标本的采集 D.2标本制作 DB45/T2577—2022本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出并宣贯。本文件由广西畜牧业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：广西壮族自治区畜牧研究所。本文件主要起草人：易显凤、陈冬冬、曹树威、易显菊、杨启晟、庞天德、文裕、姚娜、史静、胡湘云、李创举。1DB45/T2577—2022草地牧草种质资源收集与保存技术规范本文件规定了草地牧草种质资源收集与保存的过程，包括收集、保存和信息数据库建立三大流程。本文件适用于广西壮族自治区行政区域内的草地牧草种质资源收集与保存。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T2260中华人民共和国行政区划代码GB/T2930.2牧草种子检验规程净度GB/T2930.4牧草种子检验规程发芽率GB/T2930.6草种子检验规程健康测定健康检验GB/T2930.8牧草种子检验规程水分测定水分测定GB/T6432饲料中粗蛋白测定方法凯氏定氮法GB/T6433饲料中粗脂肪的测定GB/T6434饲料中粗纤维的含量测定过滤法GB/T6435饲料中水分的测定GB/T6438饲料中粗灰分的测定3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。牧草forage供饲养的牲畜食用的草或其他草本植物。牧草种质资源foragegermplasmresources具有特定种质或基因，可供牧草育种及相关研究利用的各种生物类型及品种。草地grassland由草本植物和饲用灌木为主的生物群落及其着生的土地构成的生物土地资源，包括天然草原和人工草地。收集collection通过现场采集或引进等方法获取所需的资源。234.3.1采样原则4.3.2采样方法野外采集牧草种质资源应以居群为单位，随机采样，每个4.3.3采样量应尽量达到中期库和长期库的保存要求，详情见表1,如无法达到，可先采集，后期扩繁再进行保存；无性繁殖牧草资源材料一个居群应采集30份~50份。4.3.4采样编号——同一时间、同一地点、同一草种的多份样本应编同——编号格式宜采用“采集日期(8位，年月日)+行政区划代码后两位(按照GB/T2260的规定4.3.5填写原始记录表——样本是根茎、根蘖、幼苗的，采样时要连根带土，根部放在4DB45/T2577—20225保存有性繁殖种质资源的入库保存5.1.1入库前处理入库前应对种子进行清选、干燥。5.1.2入库前检测入库前应对种子进行检测，规则如下：——净度检验按GB/T2930.2的规定执行；——发芽率检验按GB/T2930.4的规定执行,规程中没有提及的草种，按照该属的发芽方法进行检验；——健康检验按GB/T2930.6的规定执行；——水分测定按照GB/T2930.8的规定执行。5.1.3入库保存流程5.1.3.1入库对象名称入库的种质资源学名以《中国植物志》为准，并标注其拉丁名。5.1.3.2入库登记入库前检查种子基本信息资料、种子袋上的编号、对种质信息进行核对，并按照入库的数量和质量标准，登记种质的基本信息资料，并填写入库登记信息表（见附录A表A.3）。5.1.3.3查重及去重检查新获得种质资源与已保存种质资源之间是否有重复。5.1.3.4保存种子数量要求不同草种类型的保存数量要求详见表1。表1种子保存数量最低要求101～10005DB45/T2577—20225.1.3.5入库定位对符合入库条件的种子按照牧草类别进行编号，每份材料一个固定的库位号，包装后定位保存，填写种质资源库存信息表（见附录A的表A.4）。5.1.4库存种子生活力监测5.1.4.1原则定期取出少量种子进行测定发芽率，同时对贮藏种子数量进行检查，确定是否需要进行繁殖更新。5.1.4.2监测周期每份种子，中期库5年取出适量种子进行发芽率测定，长期库10年取出适量种子进行发芽率测定。5.1.5繁殖更新当自花授粉草种和自交系的每份活种子数量低于600粒，异花授粉草种每份活种子数量低于800粒时，应进行繁殖更新。无性繁殖资源的入圃保存5.2.1隔离处理采集的根茎、根蘖、幼苗等无性繁殖资源，应消毒、隔离，合格后方可进入资源圃种植。5.2.2入圃管理对于无性繁殖材料入圃应按如下规则进行：——对种植的牧草种质进行观察，包括其适应性和生长情况等，并填写入圃登记信息表（见附录A的表A.5）。——在资源圃平面信息图上标注种质的种植位置，标明每份种质的圃位号、种植时间、保存株数，并建立采集编号和圃位号对应表。——种质资源圃每次增减资源都要在圃位图上进行标注，同时注明制图人和审核人的姓名和制图日期。——每份种质在资源圃保存数量不低于3株，珍稀种质资源可适当增加保存数量。——种植时对每份种质挂牌，牌上标注种质名称，编号。5.2.3监测与更新保存过程中定期对种质存活株数、植株状态、病虫害及土壤状况进行观察监测，当植株数量减少到原保存量的50％、植株出现显著地衰老症状或遭受严重病虫危害时应进行更新复壮。6建立信息数据库将牧草种质资源收集、保存工作中获取的相关数据资料进行整理建档，包括搜集的资料、工作方案、工作记录、影像图片资料、收集信息、保存信息等，同时备份纸质档案和电子档案，保证档案资料的连续性和完整性，便于全过程追溯。6DB45/T2577—2022（资料性）牧草种质资源收集与暂存表A.1草地牧草种质资源收集物资表12111122227DB45/T2577—2022表A.1草地牧草种质资源收集物资表（续）11111表A.2草地牧草种质资源采集原始记录表采集号：采集生境：1.平地2.谷地3.山坡收获时期：1.播种期2.出苗期(返青期)3.6.结实期(绿果期)7.成熟期(果熟丰富程度：1.偶见种2.稀有种3.伴生种4.常见种5.优8DB45/T2577—2022表A.3种质资源入库登记信息表表A.4种质资源库存信息表间量9DB45/T2577—2022表A.5入圃登记信息表DB45/T2577—2022（规范性）营养成分分析测定B.1采样B.1.1取样时期根据取样时的牧草生长时期进行取样，并在标签上标明所处营养生长期、开花期、成熟期或枯黄期等信息。B.1.2取样部位选取外形、长势、生育期基本一致的植株，全株取样时植株处于营养生长期的宜采集主茎或主枝顶部的部分，开花期和成熟期、枯黄期则采取茎秆、籽粒、果实、块茎、块根等样品；现场称重，记为样品鲜重。B.1.3取样量同一样点，不少于3个位点的植株，鲜样重不少于500g。B.1.4样品编号与种质资源样品编号一致（见4.3.4）。B.2营养成分分析样品的制备营养成分测定时，应预先对分析样品进行处理，处理规则如下：——用湿布擦净表面的玷污物，去除泥土、施肥喷药等污染；——鲜样应105℃杀青15min～30min，然后降至60～70℃烘干12～24h，除尽水分直至恒重时称重，计算干物质含量；——干燥的样品用磨样机粉碎，过φ1mm筛，如样品量少过φ0.1～0.5mm筛，混匀，置广口瓶中，密封，内外均贴签，保存。B.3检测项目和测定方法检测项目和测定方法见表B.1。表B.1营养成分测定方法GB/T6432饲料中粗蛋白测定方法干物质粗蛋白粗脂肪粗纤维粗灰分%)DB45/T2577—2022B.4记录填写广西草地牧草种质资源营养成分测定表，见表B.2。表B.2草地牧草种质资源营养成分测定表干物质含量%粗蛋白%粗脂肪%粗纤维%粗灰分%无氮浸出物%DB45/T2577—2022（规范性）图片信息采集与管理C.1图片采集C.1.1生境拍摄使用大景深拍摄方法，使整体环境清晰覆盖整个图片，具体操作应遵守以下规则：——同等焦距下，可通过缩小光圈，增大景深；——使用广角镜头，相同光圈下，焦距越广，景深越大；——选择合适的对焦点，达到最大景深。C.1.2植物主体拍摄拍摄应突出植物主体,按以下规则执行：——确定所要拍摄的植物，选择合适角度进行拍摄，使周围环境和被摄主体分处不同平面，保持一定的位置差，以达到突显主体的目的；——优化拍摄的植物环境，拍摄低矮植物时应去除周围杂物，降低杂物入镜率；——环境光控制，对周围环境较暗的区域，通过内置曝光补光、提高感光度、增大光圈等手段完成拍摄。C.1.3植物局部拍摄取下所需拍摄的部位，再从周围环境中选择色彩较一致的作为背景，通过点测光、大光圈、长焦端拍摄。C.1.4拍摄要求图片应保证数量和质量，按以下规则执行：——图片大小应大于2M，数据格式为jpg；——要客观反映被摄主体的植物学特征，从不同的角度对植株分类特性进行描述，比如居群、植株、花、果实、种子、叶片、茎干、根系等；——重点拍摄植物分类鉴定的关键部位，比如禾本科的叶舌、叶鞘等，豆科的托叶等；——每个编号下的被摄物种应包含体现植株及局部形态特征的图片5张以上；珍稀濒危或特有种要尽可能收集细部特征照片，增加微距照片或解剖镜拍摄照片；——每个被调查草地应有3张以上广角照，每个被调查草地应有3张以上调查队集体工作照。C.2图片管理C.2.1命名与种质资源样品编号一致（见4.3.4）。C.2.2整理保存图片保存以“当次调查时间+地区名称+草地名称”为名称建立一级文件夹，如2019年5月4日至7日在广西龙胜县南山草地牧草资源的一级文件夹记为“20190504-07广西龙胜南山草地”，体现DB45/T2577—2022被调查草地样貌的广角照或航拍照和调查队集体工作照合并存于一级文件夹中；被调查草种的图片以“编号+种名”形式建立二级文件夹保存于一级文件夹之下。DB45/T2577—2022（规范性）标本的采集与制作D.1标本的采集D.1.1采集原则每个调查点，采集草种的标本至少采集2～3份，标本采集后，如条件允许，应立即在野外进行干燥，或将标本放在吸水纸中。D.1.2标本材料选取标本材料选取的部分应遵循以下原则：——标本须具有根、茎、叶、花、果等营养器官和生殖器官，雌雄异株的植物，要分别采取雄花枝和雌花枝；——小型一年生草种或具有走茎、球茎、根茎、鳞茎等多年生草种应连根部或地下部一起采集；——大型禾草可分段采集，由花序、完整的茎节、完整的叶片等分段组成，各段统一编相同的号；——受光叶或庇阴叶、老叶、幼叶、二型叶或萌枝等各种发育阶段形态不同者，均须采集；——木本或灌木类植物标本采集大小应控制于35～40cm内，要求所采标本应含花序、果实（果荚）及具完整顶端的枝条。D.1.3采集编号与种质资源样品编号一致（见4.3.4）。D.2标本制作D.2.1标本整理标本整理应遵循以下原则：——压制之前先将标本的尘土、病斑叶等作洁净处理；——将茎、叶、花、果展平放置，尽可能避免叶片重叠，如果干燥需很长时间，为避免叶片重叠粘连，可在中间夹一条干燥纸；——至少应有一片叶反转过来以便观察其背面，最好幼叶和老叶各有一片；花的正、反面也都应朝上显示；——若有额外的果实，可把一些纵向切开，另一些横向切开；若个体过大，则可切成片分开干燥；——大型标本可折成“N”字型或“V”字型，使其合于台纸长度即可；——标本叶子太多，可剪除一部分，但应保留叶柄，以示其着生的方式；若叶子太大，可对称的剪除一半，但不可将先端剪除；——标本有厚而凹凸不平的地方，可加干燥纸或报纸予以支撑，避免柔嫩的叶子、花瓣可能因受不到挤压而在干燥过程中起皱褶。DB45/T2577—2022D.2.2标本干燥标本压制前3天，宜每天更换干燥的吸水纸1～2次，含水量过高或者大而厚的标本增加换纸频率；标本换纸到8～10次，标本已基本干燥，可改为隔天换纸，直至标本完全干燥为止；换纸时，注意对标本继续修整，铺枝展叶，收藏脱落的花果和及时清除霉烂部位等。D.2.3标本装订标本装订应遵循以下原则：——标本在台纸上的摆放要最大限度地展示尽可能多的特征，并考虑其的艺术性，最重要的是将台纸的左上角和右下角留下空白区，便于采集签和鉴定签的贴放；——大标本应对角线放置，过长标本可进行折叠；——修剪过大标本时，尽量仅剪去茎干，在不损坏标本的前提下，尽可能将丛生植株分开以完整展示个体植株形态；——展示叶的两面，只有一片叶的标本，切下部分反过来贴在台纸上或放在纸袋中；——摘除遮蔽花或果的叶片，摘下的叶片放入纸袋中保存；——有