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文档简介
埃希菌
大肠杆菌(E.coli)为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。埃希菌是人类和动物肠道中的正常菌群出生后数小时就进入肠道,并终生伴随以大肠埃希氏菌(E.coli)最为重要大肠杆菌(E.coli)埃希菌正常菌群,一般不致病1、条件致病某些带有致病基因的血清型,引起肠道感染两大原因可以致病细菌居住部位改变引起的肠外感染:尿路感染最常见2、致病菌株埃希菌一、生物学特性G-无芽胞杆菌多数有周鞭毛有菌毛有的有多糖类包膜(微荚膜)E.coli(0157:H7)⒈形态与染色:埃希菌大肠杆菌(图)埃希菌大肠杆菌(图)埃希菌
大肠杆菌(E.coli)埃希菌培养特性与生化反应
在普通培养基中生长良好,形成灰白色、直径2~3mm的光滑型菌落。在鉴别性或选择性培养基(SS、EMB)上因分解乳糖产酸,形成有色菌落。大部分菌株发酵乳糖等多种糖类,产酸产气。典型IMViC试验为“++--”。埃希菌IMViC试验I-吲哚(indol)试验M-甲基红(methylred)试验V-VP(Voges-Proskauer)试验C-枸橼酸盐利用(citrateutilization)试验埃希菌I-吲哚(indol)试验色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚↑
吲哚试剂
-+大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等埃希菌M-甲基红(methylred)实验葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇
甲基红-葡萄糖→丙酮酸
甲基红+
-+产气肠杆菌—pH>5.4-大肠埃希菌—pH<5.4+埃希菌V-VP(Voges-Proskauer)试验葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙酰→红色化合物+
胍基化合物葡萄糖→丙酮酸××乙酰甲基甲醇
--+大肠埃希菌—乙酰甲基甲醇产气肠杆菌—埃希菌C-枸橼酸盐利用(citrateutilization)试验利用枸橼酸盐生长+不能利用-
-+大肠埃希菌—产气肠杆菌—埃希菌E.coli在中国蓝平板24h菌落埃希菌大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上粘稠菌落的特征(18-24h)埃希菌大肠杆菌O157菌落(SS平板)埃希菌KIA双糖管
(发酵葡萄糖和乳糖产酸产气,H2S–,动力+)埃希菌肠杆菌科细菌在克氏双糖铁琼脂(KIA)埃希菌抵抗力对热的抵抗力较强,55℃经60min或60℃加热15min仍有部分细菌存活。在自然界的水中可存活数周至数月,在粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。埃希菌二、致病性(一)致病物质
Ⅰ.侵袭力:
III型分泌系统:是指能向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统,约由20余种蛋白质组成。1、荚膜2、黏附素:使细菌黏着在泌尿道和肠道细胞上,有高特异性定植因子抗原Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ(CFA/Ⅰ,CFA/Ⅱ,CFA/Ⅲ)3、菌毛:P、Dr、Bfp等埃希菌致病物质Ⅱ.毒素:内毒素外毒素:志贺毒素Ⅰ和Ⅱ(Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ)耐热肠毒素a,b(STa,STb)不耐热肠毒素Ⅰ和Ⅱ(LT-Ⅰ,LT-Ⅱ)溶血素A(HlyA)埃希菌(二)所致疾病1.肠道外感染(机会感染,内源性)多数大肠埃希菌在肠道内不致病,但如移位至肠道外引起肠外感染。(1)泌尿道感染(2)化脓性感染(3)败血症(4)新生儿脑膜炎埃希菌2.胃肠炎(外源性感染,某些血清型)①肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxingenicE.coli,ETEC)致病物质定植因子:使细菌黏附到小肠上皮细胞上肠毒素:LT、ST埃希菌
耐热肠毒素
(Heatstableenterotoxin,ST)对热稳定,100℃经20分钟仍不被破坏分子量小,免疫原性弱。ST可激活小肠上皮细胞的鸟苷酸环化酶,使胞内cGMP增加,在空肠部分改变液体的运转,使肠腔积液而引起腹泻。ST与霍乱毒素无共同的抗原关系。埃希菌②肠侵袭性大肠埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)不产肠毒素,侵袭结肠粘膜上皮细胞,与志贺菌相似。细菌侵入结肠上皮细胞生长繁殖,破坏空泡进入细胞质增殖杀死感染细胞导致组织破坏和炎症发生所致疾病:侵犯较大儿童,成人,症状类似菌痢埃希菌③肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenicE.coli,EPEC)病菌在十二指肠,空肠和回肠上段黏膜表面大量繁殖,破坏微绒毛,造成一系列损伤所致疾病:婴幼儿腹泻,严重可致死
致病原因:无肠毒素及其他外毒素,无侵袭力靠Bfp、III型分泌系统埃希菌④肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagicE.coli,EHEC)致病原因:产志贺毒素Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ,破坏肠绒毛结构(干扰蛋白质合成)所致疾病:出血性结肠炎,溶血性尿毒综合症HUS(5岁以下儿童易感)主要血清型O157:H7埃希菌重要血清型:O157:H7埃希菌O157让“卫生大国”蒙羞日本历来自称“卫生大国”,一种自豪感溢于言表。然而,有一种名不见经传的“尤物”——O157,却屡屡肆虐日本列岛,让这个“卫生大国”蒙羞。
1990年,日本浦和市白鹭幼儿园就曾因园内的井水被污染,造成了O157感染,导致319人患病,2名幼儿死亡。
199l~1994年,日本每年约发现100例O157感染者。其中,13岁以下的儿童占83%:除幼儿园、学校出现集体发病外,还发现有家庭的零星发病。埃希菌O157让“卫生大国”蒙羞1996年5月下旬,日本又被O157搅得“天翻地覆”。土界市的一些学校中,因食用受O157污染的萝卜幼苗而相继发生6起集体食物中毒事件,中毒人数多达1600人,导致3名儿童死亡,80多人入院治疗。同时,日本仙台市和鹿儿岛县也发现了集体食物中毒事件,中毒儿童增加到3791人,住院儿童达202人。到7月底,中毒人数超过1万人,死亡11人,波及44个都府县。这就是曾引起全世界极大关注的“O157中毒事件”,并被世界卫生组织(WHO)称之为“创纪录的发病数”。调查研究人员发现,萝卜幼苗食用部分受到O157的严重污染,是这次0157中毒事件的根本原因。埃希菌O157让“卫生大国”蒙羞2001年4月初,日本再度发生O157,集体感染事件,东京、千叶、琦玉、神奈川、茨木、群马等地已有125人受到感染。其实,这次集体感染于3月12日首先在千叶县柏市被发现。经调查表明,患者是由于食用了一些工厂生产的不洁净食品而被感染的。
2002年8月,在距离日本首都东京约100千米的宇都宫市,报德会宇都宫医院及其老人保健中心相继发生了集体食物中毒事件。据当地官员说,7月29日,该医院及其老人保健中心有876人在午餐中食用了鸡和菠菜沙拉,致使138人受到O157感染,7人死亡。其中,绝大多数是老人。这次食物中毒事件还是由O157引起的。埃希菌⑤肠集聚型大肠杆菌
(enteroaggregativeE.coli,EAggEC)可产生毒素和粘附素(Bfp
、AAF/I、AAF/II)引起婴儿持续性腹泻,脱水,偶有血便。毒素:肠集聚耐热毒素粘附素:凝聚性粘附菌毛
使菌体砖状排列埃希菌
引起腹泻的大肠埃希菌
菌株作用部位疾病与症状致病机制ETEC小肠旅行者腹泻;婴幼儿腹泻;水样便,恶心,呕吐,腹痛,低热质粒介导LT和(或)ST肠毒素,大量分泌液体和电解质EIEC大肠水样便,继以少量血便,腹痛,发热质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞28ac、29、112ac、1244、152、164、167EPEC小肠婴儿腹泻;水样便,恶心,呕吐,发热质粒介导粘附和破坏上皮细胞2、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、158EHEC大肠水样便,继以大量出血,剧烈腹痛,低热或无,可并发HUS、血小板减少性紫癜溶原性噬菌体编码SLT-I或SLT-II,中断蛋白质合成157、26、111EAEC小肠婴儿腹泻;持续性水样便,呕吐,脱水,低热质粒介导集聚性粘附上皮细胞,阻止液体吸收并产生毒素42、44、3、86等常见O血清型6、8、15、25、27、78、148、159埃希菌三、微生物学检查(一)临床标本的检查标本采集:中段尿,血,脓,脑脊液,粪便等分离培养与鉴定肠道外感染:涂片染色,分离培养,鉴定:IMVic(++--),生化反应尿路感染尚需计数菌落数,每ml≥10万才有诊断价值。肠道内感染:粪便接种鉴别培养基(SS)ELISA,核酸杂交,PCR埃希菌大肠埃希菌在饮水和食品卫生学中,常用作被粪便污染的检测指标。
≤3个大肠菌群/1L饮水≤100个细菌总数/1ml饮水(二)卫生细菌学意义大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国饮用水卫生标准:
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