2025年沉淀反应实验操作与结果分析报告_第1页
2025年沉淀反应实验操作与结果分析报告_第2页
2025年沉淀反应实验操作与结果分析报告_第3页
2025年沉淀反应实验操作与结果分析报告_第4页
2025年沉淀反应实验操作与结果分析报告_第5页
已阅读5页,还剩9页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

试验蛋白质的沉淀反应与颜色反应掌握鉴定蛋白质的原理和措施。熟悉蛋白质的沉淀反应,深入熟悉蛋白质的有关反应。二、试验原理蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用,产生颜色。不一样的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相似,颜色反应亦不完全相似。颜色反应不是蛋白质的专一反应,某些非蛋白物质也可产生同样的颜色反应,因此不能根据颜色反应的成果来决定被测物与否为蛋白质。此外,颜色反应也可作为某些常用蛋白质定量测定的根据。蛋白质是亲水性胶体,在溶液中的稳定性与质点大小、电荷、水化作用有关,但其稳定性是有条件的,相对的。假如条件发生了变化,破坏了蛋白质的稳定性,蛋白质就会从溶液中沉淀出来。试纸6、水浴锅7、移液管1、卵清蛋白液:鸡蛋清用蒸馏水稀释10-20倍,3-4层纱布过滤,滤液放在冰箱里冷藏备用。2、0.58苯酚:1g苯酚加蒸馏水稀释至200ml。3、millon's试剂:40g汞溶于60ml浓硝酸(水浴加温助溶)溶解后,冷却,加二倍体积的蒸馏水,混匀,取上清夜备用。此试剂可长期保留。4、尿素晶体5、18cuso:1gcuso晶体溶于蒸馏水,稀释至100ml446、108naoh:10gnaoh溶于蒸馏水,稀释至100ml7、浓硝酸8、0.1茚三酮溶液:0.1g茚三酮溶于958的乙醇并稀释至100ml.10、浓硫酸11、饱和硫酸铵溶液:100ml蒸馏水中加硫酸铵至饱和。12、硫酸铵晶体:用研钵研成碎末。13、95%乙醇。14、醋酸铅溶液:1g醋酸铅溶于蒸馏水并稀释至100ml15、氯化钠晶体16、10%三氯乙酸溶液:10g三氯乙酸溶于蒸馏水中并稀释至100ml17、饱和苦味酸溶液:100ml蒸馏水中加苦味酸至饱和。18、18醋酸溶液。五、试验环节蛋白质的颜色反应1、苯酚试验:取0.5号苯酚溶液1ml于试管中,加millon's试剂0.5ml,电炉小心加热观测2、蛋白质试验:取2ml蛋白液,加millon's试剂0.5ml,出现白色的蛋白质沉淀,小心加热,观测现象。(二)双缩脲反应1、取少许尿素晶体放在干燥的试管中,微火加热熔化,至重新结晶时冷却。然后加108naoh溶液1ml,摇匀,再加2-4滴1号cuso4溶液,混匀,观测现象。2、取蛋白液1ml,加108naoh溶液1ml,摇匀,再加2-4滴18cuso4溶液,混匀,观测现取一支试管,加入1ml蛋白液及浓硝酸5滴。加热,冷却后注意颜色变化。然后再加入10%naoh溶液1ml,观测颜色有取蛋白液1ml于试管中,加4-8滴茚三酮溶液,加热至沸,即有蓝紫色出现。蛋白质的沉淀(一)蛋白质的盐析作用1、试管中加蒸馏水3ml,加固体硫酸铵至饱和。另一支试管加蛋白液2ml,再加入饱和硫酸铵溶液2ml,摇匀静置观测现象。2、将上述混合液过滤。向滤液中逐渐加入少许固体硫酸铵,直至饱和为止,此时析出为清蛋白。再加入少许蒸馏水,观测沉淀与否溶解。(二)有机溶剂沉淀蛋白质试管中加蛋白液1ml,加晶体氯化钠少许,溶解后加95%乙醇3ml,摇匀,观测现象。(三)重金属盐与某些有机酸沉淀蛋白质1、取试管2支,各加蛋白液2ml,一支管中滴加1号醋酸铅溶液,另一支管中滴加1硫酸铜溶液,至有沉淀产生。2、取一支试管加蛋白液2ml,再加入10%三氯乙酸1ml,充足混匀,观测成果。(四)生物碱试剂沉淀蛋白质取一支试管,加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴,再加饱和苦味酸数滴,观测现象。蛋白质的颜色反应1、苯酚试验:溶液即出现玫瑰红色。2、蛋白质试验:出现白色的蛋白质沉淀,小心加热后凝固的蛋白质出现红色。1、有紫色出现。2、溶液有蓝紫色出现先有黄色沉淀生成,加入10号naoh溶液1ml后颜色变为橘黄色。有蓝紫色出现。蛋白质的沉淀(一)蛋白质的盐析作用1、有蛋白析出。2、有蛋白质析出,加水后可复溶。(六)有机溶剂沉淀蛋白质取一试管加蛋白液1ml,,加入晶体氯化钠少许,待溶解后再加95%乙醇3ml,摇匀,观测现象(七)重金属盐与某些有机酸沉淀蛋白质取试管2支,各加蛋白液2ml,一支管中滴加1号醋酸铅溶液,另一支管中滴加1号硫酸铜溶液,至有沉淀产生。(八)生物碱试剂沉淀蛋白质取一支试管,加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴,再加饱和苦味酸和鞣酸数滴,观测现象。七、试验分析蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用,产生颜色。不一样的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相似,颜色反应亦不完全相似。篇二:自由沉淀试验汇报六、试验数据记录与整顿1、试验数据记录柱高沉降柱直径水样来源柱高表面皿表面皿编号质量/g表面皿和悬浮物总质量/g水样中悬浮物质量/g水样体积/ml悬浮物沉降柱浓度/工作水(g/ml)深/mm颗粒沉沉淀效速/率/%(mm/s)残存颗粒比例/%79.043880.74121.697481.760383.20751.447264.189065.466.116267.32861.212473.789574.93851.149083.478284.31.030.030.030.030.0.05480.04820.04360.04040.03830.03846.0808.0780.0724.066(2)绘制沉淀曲线:e-t、e-u、ui~pi曲线如下:2-1、绘制清除率与沉淀时间的曲线如图2.2:沉淀时间t与沉淀效率e的关系曲线图2.2:颗粒沉速u与沉淀效率e的关系曲线(1)选择t=60min时刻:(大家注意哦!这部分手写的,不要直接打印!)水样中悬浮物质量水样中悬浮物质量1.6974水样体积31.0水样中悬浮物质量1.1508水样体积31.0h?10(500-250)??0.069?100%??100%?32.30c0?100%??100号?67.70c00.05481.混凝作用原理包括三部分:1)压缩双电层作用;2)吸附架桥作用;3)网捕作用。这胶体表面的电荷值常用电动电位ξ表达,又称为zeta电位。一般天然水中的胶体颗粒的zeta氯化铝(简称pac)、聚丙烯酰胺等。本试验使用pac,它是介于alcl3和al(oh)3之3.投药量单位体积水中投加的混凝剂量称为"投药量",单位为mg/1。混凝剂的投加量除溶液。与入射光成90(1)浊度仪一台(sgz-2数显浊度仪,上海悦丰仪器仪表有限企业)(3)电子天平(赛多利斯科学仪器,北京有限企业)(4)沉淀桶(600ml烧杯)6个;(5)100ml取样瓶6个;(6)乳胶管或塑料软管(直径5~8mm)15~20cm;(7)100ml烧杯1个;(8)100ml量筒1个;2.试验试剂混凝剂:聚合氯化铝pac;原水(制备工作已由试验员完毕);自来水1)制备原水:事先用高岭土配制浊度为50ntu左右的浑水,静沉1天以上,取上清液备用。(已由2)用电子天平称取混凝剂(pac)3g溶于11自来水中,浓度为3g/1。4)根据原水体积,按照投加量80、120、160、200、300、400mg/1计算加药量,并换算成液的体积量。换算后,混凝剂溶液的体积分别为:16、24、32、40、60、805)设置搅拌仪程序:(1)转速400转/分,搅拌1.5min;(2)转速150转/分,继续搅拌5min;(3)转速60转/分,继续搅拌5min;(4)转速0转/分钟,沉淀15min6)用量筒量取环节(3)计算的混凝剂量,迅速加入沉淀桶中。贴好标签,将六个沉淀桶放置在搅7)启动搅拌仪,按照设定程序运行。(注意观测各个沉淀桶的絮凝沉淀状况)8)程序结束后,打开沉淀桶的小阀门,取每个沉淀桶中上清液50~100ml于清洗好的试管中。9)用浊度仪测定上清液浊度并进行记录(速度要快;使用前要调零;待浊度仪示数较稳定期读浊度/ntu8.233.302.202.434.70110.0016243240608080120160200对应的投药量约为255mg/1,即该原水的最佳投药量为255mg/1。22)混凝包括混合与凝聚,混合过程(即混凝剂刚加入水中的混合过程)规定迅速防止因时间间隔子互相凝聚。混合过程大概要在1~2分钟内完毕,而凝聚过程则大概需要20~30分钟,沉淀过程则大试验二蛋白质的呈色反应,沉淀反应同组:汤殷飞学号:班级:室温:教师:09针外成绩:1.理解蛋白质的性质。2.掌握蛋白质的鉴定措施。1.蛋白质的呈色反应。2.蛋白质的沉淀反应。(一)蛋白质的呈色反应比较和鉴别不一样的蛋白质。1.双缩脲反应【试验原理】(1)取小试管一支,加1:10鸡蛋白液2滴,10%naoh溶液5滴及1%硫酸铜溶液1滴,混匀,可见溶液呈紫色。(2)另取一小试管,加一小匙尿素(绿豆大小),小火加热至熔,嗅其气味为(臭味)。继续加热使之凝固,这固体是(双缩脲),加水10滴,108naoh溶液5滴,1号硫酸铜溶液1滴,可见溶液变成紫红色。2.茚三酮反应【试验原理】凡具有自由氨基的化合物例如蛋白质,多肽,多种氨基酸(脯氨酸化合物(包括氨)与茚三酮共热时,能生成紫蓝色化合物,这种反应即茚三酮反应。【操作】当维持蛋白质胶体溶液的稳定原因(水化膜和电能再溶解,此即不可逆的沉淀反应。1.蛋白质的盐析【试验原理】用。盐析作用包括两种过程:1)大量电解质破坏了蛋白质的水化膜从而出现沉淀的硫酸铵溶液中析出。【操作】观测现象是溶液中有白色沉淀析出。(2)过滤,搜集透明滤液,滤液中会有清蛋白,若溶液混浊,须反复过滤至透明为再向混浊液加1.5-2.0ml水,观测现象是溶液中沉淀逐渐溶解2.重金属盐类沉淀蛋白质【试验原理】质。【操作】【试验原理】热而凝固。(1)取4支试管,编号,按下表加入试剂(2)取出试管,冷却后于第3管中慢慢滴入10%naoh溶液,观测现象是溶液先变浑浊,然后(3)向第4管中慢慢滴入10号醋酸,观测现象为溶液先变浑浊,然后浑浊慢慢溶解,其原因是电点,沉淀溶解。四.试验材料(一)试剂1.1:10鸡蛋白溶液2.10%naoh3.1%硫酸铜4.尿素5.0.1%茚三酮乙醇液6.0.25%丙氨酸溶液7.饱和硫酸铵溶液8.固体硫酸铵9.0.5%naoh10.0.5号硫酸锌11.10%磺基水杨酸12.10%hcl13.18hac14.108hac(二)仪器水浴锅(100摄氏度)(三)其他一巨噬细胞吞

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论