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文档简介
发酵工程保分点专攻
1建网络
抓主干是否含凝固剂类型步骤培养基平板划线法从传统发酵技术到发酵工程微生物的基本培养技术固体培养基液体培养基基本配方水、碳源、氮源、无机盐无菌技术类型消毒和灭菌微生物的纯培养接种方法制备培养基(配制培养基→灭菌→倒平板)→接种→分离→培养①___________稀释涂布平板法微生物的选择培养和计数土壤中分解尿素的细菌的分离和计数培养基的特点以尿素为唯一氮源计数方法稀释涂布平板法显微镜直接计数法活菌计数法不能区分死菌与活菌选择培养基不能计数建网络
抓主干条件菌种从传统发酵技术到发酵工程传统发酵技术的应用泡菜的制作乳酸菌果酒制作基本环节无氧条件菌种②________无氧果醋制作条件菌种醋酸菌③_____发酵工程及其应用获得产品↑分离、提纯产物↑发酵罐内发酵↑
扩大培养接种灭菌配制培养基选育菌种发酵工程的应用食品工业、医药工业、农牧业酵母菌有氧一
核心提炼1.传统发酵技术及发酵工程(1)理清“3”种传统食品的制作技术(2)制作果酒、果醋的装置图解读①各部位的作用Ⅰ.充气口:在醋酸发酵时连接充气泵进行充气。Ⅱ.排气口:排出酒精发酵时产生的CO2。Ⅲ.与排气口相连的长而弯曲的胶管:防止空气中微生物的污染。Ⅳ.出料口:用于取样。②该装置的使用方法使用该装置制酒时,应该关闭充气口;制醋时,应将充气口连接充气泵,输入氧气。(3)泡菜腌制过程中,乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化(4)发酵工程的基本环节[点拨]传统发酵食品制作过程中利用的是天然存在的菌种,不仅菌种存在差异,杂菌也是多样;而现代工业发酵工程通常通过微生物培养技术获得单一菌种进行发酵。2.微生物培养、分离与计数(1)无菌技术常用方法(2)微生物的纯化技术①制备马铃薯琼脂培养基②两种纯化微生物方法的比较a.为了确定培养基的灭菌是否合格,微生物实验一般会设置空白对照:随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。b.观察菌落需要用固体培养基,因此培养基要添加凝固剂,如琼脂。c.平板倒置既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快的挥发。(3)微生物分离与计数的两个实例关注两种对照组与一种重复组①将一未接种的选择培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认培养基灭菌是否彻底(制备是否合格)。②将一接种的普通培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认选择培养基是否起“筛选”作用。③进行微生物计数时,每一稀释度下至少涂布三个平板,即设置重复组,是为了求平均值,提高计数准确度。1.判断下列有关传统发酵食品的制作技术的叙述(1)果酒的家庭制作与啤酒的工业化生产相比,发酵前都需要对原料进行灭菌,发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期(
)提示:家庭制作果酒时需要用到水果表面的酵母菌,所以不能对原料灭菌;家庭制作果酒发酵结束后不需要消毒处理。×(2)制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3,制作泡菜的盐水要淹没全部菜料(
)√(3)葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌,制作好葡萄酒后,可直接通入无菌空气制作葡萄醋(
)提示:醋酸菌为好氧细菌,且果醋发酵温度高于果酒发酵,因此制作好葡萄酒后,除通入无菌空气外,还需要适当提高发酵装置的温度。×(4)果醋发酵时,发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时(
)√(5)向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境(
)提示:向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无氧环境,不能形成无菌环境。×(6)青霉素具有杀菌作用,因此青霉素的工业化生产过程中发酵罐不需严格灭菌(
)提示:由于某些杂菌能分泌青霉素酶,从而分解青霉素,为防止杂菌生长,发酵罐需要严格灭菌。×2.判断下列有关微生物的基本培养技术的叙述(1)将培养基分装于培养皿中后灭菌,可降低培养基污染的概率(
)提示:培养基应先灭菌再分装于培养皿中。×(2)平板接种常用在微生物培养中,不含氮源的平板不能用于微生物培养,平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒(
)提示:不含有氮源的平板可用来培养利用空气中氮气的微生物;平板涂布时涂布器使用前必须进行灭菌处理,以防止外来杂菌的污染。×(3)对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测时需采用平板划线法等分离培养微生物,观察菌落特征(
)提示:航天器及洁净的组装车间环境微生物很少,分离培养微生物,观察菌落特征,不采用平板划线法,应采用稀释涂布平板法等分离培养微生物。×(4)涂布用的菌液的菌浓度应控制在30~300个/mL(
)提示:为了保证结果准确,一般选择菌落数为30~300的平板进行计数,而非涂布用的菌浓度控制在30~300个/mL。×(5)在分离产脲酶菌的实验中可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌株(
)提示:在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶催化尿素分解产生氨,氨会使培养基的pH升高,酚红指示剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,能对分离的菌种做进一步鉴定。×二
真题演练1.(2024·湖北,1)制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物,常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是A.食用醋的酸味主要来源于乙酸B.醋酸菌不适宜在无氧条件下生存C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内√食用醋的酸味主要来自醋酸,醋酸学名为乙酸,A正确;醋酸菌是好氧型细菌,不适宜在无氧的条件下生存,B正确;在制醋时,缺失原料的情况下,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为乙酸,因此醋酸菌体内含有催化乙醇氧化成乙酸的酶,C正确;醋酸菌属于细菌,没有核膜包被的细胞核和众多细胞器,因此没有线粒体,D错误。2.(2023·山东,12)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理:①沸盐水冷却后再倒入坛中;②盐水需要浸没全部菜料;③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水;④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低√沸盐水冷却后再倒入坛中,盐水煮沸是为了杀灭杂菌,冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响,A错误;盐水需要浸没全部菜料,制造无氧环境,有利于乳酸菌的无氧呼吸,B错误;盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水,是为了隔绝空气、防止杂菌污染等,C正确;腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少,D错误。3.(2024·山东,14)在发酵过程中,多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体,菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时,可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是A.相同菌体密度下,菌球体越大柠檬酸产生速率越慢B.发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量C.发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长D.发酵结束后,将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品√黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧,相同菌体密度下,菌球体越大越不利于菌体与氧气接触,则柠檬酸产生速率越慢,A正确;菌体内铵离子浓度升高时,可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制,发酵中期添加一定量的硫酸铵,提高了铵离子浓度,菌体内可提高柠檬酸产量,B正确;发酵过程中pH下降导致细菌生命活动所必需的酶失活,可抑制大部分细菌的生长,C正确,发酵结束后,将过滤所得的固体物质进行分离纯化、浓缩、干燥等一系列操作后才能获得柠檬酸产品,D错误。4.(2024·江西,11)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素,它由吸水链霉菌井冈变种(JGs,一种放线菌,菌体呈丝状生长)发酵而来,在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,正确的是A.JGs可发酵生产井冈霉素,因为它含有能够编码井冈霉素的基因B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程不影响井冈霉素的产量C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,会提高井冈霉素的产量D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化√基因表达的产物是蛋白质,而井冈霉素是JGs发酵生产的一种氨基寡糖类抗生素,因此推测JGs含有能够编码合成井冈霉素相关酶的基因,A错误;JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程会增加JGs的数量,进而影响井冈霉素的产量,使井冈霉素的产量得到提高,B错误;在一定范围内提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,会提高井冈霉素的产量,但若浓度过大,反而会降低井冈霉素的产量,C错误;根据题意可知,JGs菌体呈丝状生长,所以形成的菌落难以区分,因此稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化,D正确。5.(不定项)(2024·黑吉辽,19)某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉
种植园内,从感病植株上采集
样品B.将采集的样品充分消毒后,用蒸馏水冲洗,收集冲洗液进行无菌检测C.将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单
菌落D.判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑
大小√√某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,故在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内,从未感病植株上采集样品,A错误;获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染;将采集的样品充分消毒后,用无菌水冲洗,收集冲洗液进行无菌检测,B错误;题图可知,样品研磨后进行了稀释涂布,可见将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落,C正确;由题图抗性检测可知,判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组,对照组不接种内生菌得到病原菌菌斑,实验组接种内生菌得到病原菌菌斑,然后比较对照组和实验组的菌斑大小,实验组病原菌菌斑越小表明内生菌抗性效果越好,D正确。6.(2024·湖南,6)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示,下列操作正确的是A.①②⑤⑥
B.③④⑥⑦C.①②⑦⑧
D.①③④⑤√分析题图可知,拔出棉塞后完全握住棉塞会造成杂菌污染,应握住棉塞上部,②错误;划线时不能将培养皿完全打开,应在酒精灯火焰附近将培养皿打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线,盖上皿盖,⑥错误;划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连,⑦错误;平板应倒置培养,⑧错误。综上,正确的操作有①③④⑤。三
模拟预测1.黄酒是世界上最古老的酒类之一,黄酒的制作流程主要为制曲→浸米→蒸煮(浸好的小米加入开水中煮熟)→拌曲→入缸发酵→压榨→装瓶。下列叙述正确的是A.浸米有利于淀粉水解产生酒精从而提高酒的产量B.入缸发酵时不能将搅拌好的煮熟小米装满发酵缸C.浸好的小米煮熟后为避免杂菌污染需要立刻拌曲D.为利于黄酒发酵,发酵温度应控制在30~35℃之间√浸米有利于淀粉水解产生葡萄糖,酵母菌经无氧呼吸将葡萄糖氧化分解才能生成酒精,A错误;入缸发酵时不能将搅拌好的煮熟小米装满发酵缸,以防止酵母菌进行酒精发酵过程中产生二氧化碳造成发酵液溢出,B正确;浸好的小米煮熟后温度较高,立刻拌曲会杀死酒曲中的酵母菌,不利于后续发酵,C错误;黄酒发酵的菌种为酵母菌,为利于黄酒发酵,发酵温度应控制在18~30℃之间,D错误。2.(2024·青岛高三一模)黄桃精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒有所不同,生产工艺流程为:麦芽→粉碎→糖化→过滤→煮沸→主发酵→后发酵(添加黄桃汁)→低温冷藏→成品→罐装。下列说法正确的是A.利用大麦作原料时,淀粉是酵母菌的直接碳源B.啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在后发酵阶段完成C.糖化是让麦芽糖分解形成糖浆,煮沸能够使酶失活及对糖浆灭菌D.“精酿”啤酒发酵完成后,通常不需要进行过滤和消毒处理√利用大麦作原料时,葡萄糖是酵母菌的直接碳源,A错误。啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵;大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成,B错误。糖化是让淀粉分解形成糖浆,C错误。3.(2024·长沙高三适应性考试)研究者从某种海洋微生物中分离了一种新的抗真菌药物,为治疗真菌感染提供新思路。下列有关药物的研制或生产,叙述错误的是A.按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配制的培养基具有选择作用B.用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释,纯化海洋微生物C.用固体培养基培养微生物获得次生代谢物,用于抗真菌活性检测D.获得目的微生物后,可进一步利用基因工程方法调节代谢途径提高生
产量√按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配制的培养基具有选择作用,目的是选择海洋微生物,A正确;分离和纯化常用固体培养基,在固体培养基上接种的方法通常是平板划线法和稀释涂布平板法,即用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释,可得到海洋微生物的单菌落,B正确;获得代谢产物需要借助液体培养基,C错误;利用基因工程的手段可以定向改造生物,获得符合人类需要的产品,因此,获得目的微生物后,可进一步利用基因工程方法调节代谢途径提高生产量,D正确。4.(2024·菏泽高三二模)稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶,能抑制稻瘟菌的生长,可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株,通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是A.筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基B.纯化培养时,可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种C.在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶D.可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株√筛选土壤中目的微生物即降解几丁质的微生物时,应用几丁质为唯一碳源的培养基进行筛选,A正确;纯化培养时,可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种,两种方法均可得到单菌落,B正确;在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落不一定都能分泌几丁质酶,可能部分是以几丁质的分解产物为碳源的微生物,C错误;水解圈是微生物产生几丁质酶水解几丁质产生的,“水解圈直径/菌落直径”的值越大,说明该菌降解能力越强,故可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株,D正确。5.(2024·岳阳高三二模)双层平板法是利用底层和上层均为牛肉膏蛋白胨培养基对噬菌体进行检测的方法。先在无菌培养皿中倒入琼脂含量是2%的培养基凝固成底层平板,再将琼脂含量是1%的培养基融化并冷却至45~48℃,加入宿主细菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液,充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。一段时间后,在上层平板同一平面可见噬菌体侵染周围细菌导致宿主细胞裂解死亡形成的空斑(噬菌斑)。通常一个噬菌斑来自原液中的一个噬菌体。可根据噬菌斑的数目计算原液中噬菌体的数量,如图所示。下列叙述正确的是A.上层培养基中琼脂浓度较低,因此形成的噬菌斑
较大,更有利于计数B.加入混合液后,使用灭菌后的涂布器将混合液均
匀地涂布在培养基表面C.牛肉膏蛋白胨培养基可作为选择培养基选择出噬菌体的宿主细胞D.双层平板法获得的噬菌斑容易发生上下重叠现象√双层平板法因上层培养基中琼脂含量较少,故形成的噬菌斑较大,更有利于计数,A正确;将琼脂含量是1%的培养基融化并冷却至45~48℃,然后加入宿主细菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液,充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板,是培养基和混合液一起倒平板,不是混合液涂布在培养基表面,B错误;牛肉膏蛋白胨培养基不是选择培养基,选择培养基是允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,C错误;双层平板法所形成的全部噬菌斑都基本处于同一平面上,因此不仅每一个噬菌斑的大小接近、边缘清晰,而且不易发生上下噬菌斑的重叠现象,D错误。6.(2024·潍坊高三一模)某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”,将每道菜分为3盘,一盘取样冷藏,一盘使用公筷,一盘不用公筷,实验过程如图。下列相关操作或叙述正确的是A.将细菌接种在固体培养基X
上可采用平板划线法B.根据菌落的特征可以准确判
断细菌的种类C.配制的培养基需经湿热灭菌后调整pH,冷却后倒平板D.固体培养基X对菜品中的细菌没有选择性√据题意可知,在固体培养基X上接种后还需进行计数,故只能用稀释涂布平板法接种而不能用平板划线法,A错误;在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征,根据菌落的形状、大小、颜色等特征,可以初步区分出不同种微生物,但不能准确判断,B错误;配制的培养基需调整pH后经湿热灭菌,冷却后倒平板,C错误;固体培养基X没有做任何处理,所以对菜品中的细菌没有选择性,D正确。四
专题强化练12345678910111213答案对一对题号12345678910答案ACDBDAABCDABDBD题号11答案(1)通过选择培养增加降解莠去津的细菌数量(2)涂布器偏低当两个或两个以上的细胞聚集在一起长成的是一个菌落(3)有透明带氮气(4)将配制的培养基灭菌后不接种,与实验组放在相同且适宜的条件下培养12345678910111213对一对题号
12答案(1)稀释涂布平板法使细菌分散成单个细胞,在平板上获得单菌落(2)菌种①和③可降解分散蓝2BLN,分散蓝2BLN被降解后蓝色消失形成透明圈菌种③
(3)随着接种量的增大,GN-1菌株对分散蓝2BLN的脱色率逐渐提高不确定是没有设置接种量大于20%的组别,不能确定接种量大于20%后的脱色效果题号13答案(1)显微镜直接计数法将活菌和死菌一起计数,活菌计数法中存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数活菌(2)5000
(3)杀死涂布器上可能存在的微生物,防止微生物污染防止温度过高杀死菌种(4)A
A消毒液活细胞减少量最多,且杀菌时间较短,效率最高(5)深紫答案1.(2024·烟台高三一模)用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香,又酸甜适口。它是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为醋酸和乳酸,再结合酒精发酵制作而成。下列说法错误的是A.前期利用醋酸菌和乳酸菌在同一容器中同时进行醋酸和乳酸发酵B.达到一定酸度的麦汁需经熬煮、冷却后才可接种抗酸性高的酵母菌C.后期发酵产生酒精时,应将发酵温度控制在18~30℃范围内D.酒精发酵时发酵罐内液面不再有气泡产生,说明发酵基本完毕√12345678910111213答案醋酸菌是好氧细菌,在无氧条件下不能存活,而乳酸菌是厌氧细菌,在有氧条件下不能存活,所以醋酸菌与乳酸菌在同一容器中发酵时,不能同时产生醋酸和乳酸,A错误。12345678910111213答案2.(2024·青岛高三一模)明代冯时化《酒史》记载:“每至桑落时,取其寒暄所得,以井水酿酒甚佳。”意思是每到桑叶飘落的季节,井水的温度最适宜酿酒,所酿造的酒品质最好。有关桑叶酒的酿制,下列说法错误的是A.用密闭容器进行桑叶酒发酵时,需定期放气B.采用井水酿制,主要是因为井水温度有利于微生物发酵C.酿制中期起泡现象是微生物有氧呼吸产生的CO2释放形成的D.桑叶酒发酵时,可用酸性重铬酸钾测定酒精含量的变化√12345678910111213答案酿酒时酵母菌无氧呼吸产生CO2,需定期放气,A正确;酿制中期起泡现象是微生物无氧呼吸产生的CO2释放形成的,C错误;桑叶酒发酵时产生酒精,橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应变成灰绿色,可根据颜色深浅测定酒精含量的变化,D正确。
12345678910111213答案3.(2024·长沙高三二模)研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中(“+”代表含抗生素,“+”的多少代表抗生素浓度,“-”代表不含抗生素),对两种抗生素的药性进行分析。在37℃环境下培养24小时后,细菌生长情况如图。下列叙述正确的是A.科学家利用厌氧发酵技术使抗
生素中青霉素的生产实现了产
业化B.与单独使用抗生素A相比,联合使用抗生素B的抑菌作用更强C.为排除杂菌的影响,倒平板前可对培养基采用煮沸灭菌或者高压蒸汽灭菌D.该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌,待菌液被吸收后方可倒置培养√12345678910111213答案青霉菌(产生青霉素)是异养需氧型真菌,因此青霉素的发酵过程需要氧气参与,以便微生物能够进行正常的代谢活动,A错误;根据图中平板上菌落的分布可知,与单独使用抗生素A相比,联合使用抗生素B不能增强对结核杆菌的抑制作用,B错误;为排除杂菌的影响,应该用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,然后冷却到50℃左右倒平板,C错误;12345678910111213答案由图可看出培养基表面菌落分布均匀,是利用了稀释涂布平板法接种结核杆菌,待菌液被培养基吸收后方可倒置培养,D正确。12345678910111213答案4.(2024·济南高三一模)高压蒸汽条件下持续20分钟会杀死芽孢,因此无菌操作中可利用非致病性的嗜热脂肪芽孢杆菌的芽孢作为指示菌来测定灭菌的效果。灭菌时在高压蒸汽灭菌锅的适当位置放置含有生物指示剂的培养液和含芽孢的菌片。灭菌结束后在塑料瓶外挤破含有培养液的玻璃瓶,使嗜热脂肪芽孢杆菌菌片浸没在紫色培养液内并进行培养,如图所示。若芽孢可以生长,培养液会变为黄色。下列叙述错误的是A.嗜热脂肪芽孢杆菌的芽孢耐热性较强,常用作指示菌
来测定灭菌的效果B.灭菌后含有嗜热脂肪芽孢杆菌菌片的紫色培养液属于
选择培养基C.湿热灭菌可利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌D.若培养液颜色没有变化而阳性对照组颜色为黄色,说明达到灭菌目的√12345678910111213答案灭菌后含有嗜热脂肪芽孢杆菌菌片的紫色培养液用于鉴别嗜热脂肪芽孢杆菌是否存活,因此属于鉴别培养基,B错误;湿热灭菌是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法,其中高压蒸汽灭菌的效果最好,C正确;阳性对照组颜色为黄色,说明灭菌前存在有活性的芽孢,培养液颜色没有变化,说明芽孢不能生长,则已达到灭菌目的,D正确。12345678910111213答案12345678910111213答案5.聚苯乙烯是制造碗装泡面盒、发泡快餐盒的材料。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解聚苯乙烯的细菌,相关流程如图所示。下列叙述正确的是A.若稀释倍数都为10,则x应为8B.接种时应在酒精灯火焰旁进行,
可将培养皿皿盖完全打开C.将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布D.应至少涂布三个平板,求菌落数的平均值√若稀释倍数都为10,则x应为18,A错误;接种时应在酒精灯火焰旁进行,但不能将培养皿皿盖完全打开,B错误;将涂布器放在火焰上燃烧,等冷却后再进行涂布,C错误。12345678910111213答案6.(2024·山东,15)酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z,trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞,而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上,生长情况如图。据图分析,3种酶在该合成途径中的作用顺序为A.X→Y→Z B.Z→Y→XC.Y→X→Z D.Z→X→Y√12345678910111213答案trpZ两端均不能繁殖,就说明Z是最终作用物质;而trpX两端均能繁殖,它旁边的trpY和trpZ却不能繁殖,就说明X先作用。综上,顺序为X→Y→Z。12345678910111213答案7.(2024·泰安高三二模)我国科技工作者发明“二步发酵法”生产维生素C的工艺是世界首创。第一步发酵用醋酸杆菌合成分泌维生素C前体,第二步发酵用氧化葡萄糖酸杆菌(“小菌”)和假单胞杆菌(“大菌”)混合菌种作为伴生菌,能促进产酸菌生长和产酸。如图为二步发酵法的生产流程。下列说法正确的是A.可以利用平板划线法纯化混
菌发酵法所需的目的菌B.单独筛选高效的产酸菌和伴
生菌即可用于混菌发酵C.伴生菌与产酸菌二者互利共生,不存在种间竞争D.生产过程采用混菌发酵法不需要严格的无菌操作√12345678910111213答案产酸菌和伴生菌应共同进行筛选,才能获得最佳的生产维生素C的菌种,单独筛选出的高效的产酸菌和伴生菌不一定适配,B错误;伴生菌与产酸菌会共同竞争空间等资源,二者存在种间竞争,C错误;采用混菌发酵法时,需要进行严格的无菌操作,D错误。12345678910111213答案8.(不定项)(2024·济宁高三二模)大肠杆菌、沙门氏菌能引起家禽和家畜的肠道疾病。暹罗芽孢杆菌代谢物具有广谱抗菌性,为检测其对沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌能力进行图示实验。下列说法错误的是A.制备图示培养基需要在灭菌前调节pHB.该抑菌实验还需要设计等量生理盐水
作为对照C.图示X为离心后得到的下层沉淀,含
有暹罗芽孢杆菌代谢物D.从抑菌圈边缘挑取菌落涂布平板重复
实验,抑菌圈直径变大√12345678910111213答案√√该抑菌实验为检测暹罗芽孢杆菌代谢物对沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌能力,互为对照,因此进行图示实验不需设计等量生理盐水作为对照,B错误;图示X为离心后得到的上清液,含有代谢物,C错误;在抑菌圈边缘生长的细菌可能是耐药菌,从抑菌圈边缘挑取菌落涂布平板重复实验,抑菌圈平均直径变小,D错误。12345678910111213答案9.(不定项)(2024·济南高三一模)《齐民要术》记载了《食经》中麦芽糖的制作方法:“取黍米一石,炊作黍,着盆中,蘖末一斗搅和。一宿,则得一斛五斗,煎成饴。”意思是将一石糯米煮成饭放在盆里,放上一斗麦芽碎末搅匀,把过一夜得到的五斗溶液小火烧煮浓缩就得到饴糖。下列说法正确的是A.用适宜浓度的赤霉素处理麦种可使其不发芽就能产生淀粉酶B.黍中加蘖末和白酒酿制中加入曲种的主要目的都是完成糖化过程C.将过夜得到的溶液蒸煮、冷却后接种酵母菌进行后发酵可制作啤酒D.以制糖的废液为原料加入酵母菌进行发酵可获得单细胞蛋白√12345678910111213答案√√12345678910111213答案赤霉素可以促进α-淀粉酶的合成,用适宜浓度的赤霉素处理麦种可使其不发芽就能产生淀粉酶,进而促进淀粉的水解,A正确;由题意可知,蘖末指的是麦芽碎末,麦芽碎末中有淀粉酶,从而使糯米中的淀粉水解,白酒酿制中加曲种主要是使淀粉水解,同样可以促进糖化的发生,B正确;将过夜得到的溶液蒸煮、冷却后接种酵母菌进行主发酵可制作啤酒,C错误。10.(不定项)(2024·青岛高三一模)柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是A.黑曲霉与生产果醋和腐乳
时所用主要微生物的代谢
类型相同B.将菌种接种至a培养基时,浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧C.将菌种转接至b培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量D.若发酵罐c中的原料为大豆粉,可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油12345678910111213答案√√由培养时需要通气振荡可知,黑曲霉生长需要氧气,因此其代谢类型为异养需氧型,制作果醋利用的是醋酸菌,制作腐乳利用的是毛霉,它们的代谢类型均为异养需氧型,A正确;将菌种接种至a培养基时,平板划线法的接种工具接种环在使用前需在火焰上灼烧灭菌,B错误;12345678910111213答案将菌种转接至b培养基是将菌种转接至新的培养基,目的是进行扩大培养,从而增加菌种的数量,C正确;以大豆为主要原料,利用产生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉),将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸,然后经淋洗、调制可以制成酱油产品,D错误。12345678910111213答案11.莠去津,又名阿特拉津,是一种含氮的有机化合物,它是世界上使用最广泛的除草剂之一,由于其在环境中残留期长(4~57周),是近年备受关注的疑似持久性有机污染物(POPs),为修复被其污染的土壤,按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。已知莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养基不透明。据图回答下列问题:12345678910111213答案(1)由图推断,从A瓶到C瓶液体培养的目的是_______________________________________。12345678910111213答案通过选择培养增加降解莠去津的细菌数量A瓶到C瓶中的培养液是以莠去津为唯一氮源的培养基,属于选择培养基,A瓶到C瓶液体培养的目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)同时增加该菌的数量。(2)从图中看将C瓶菌种接种到固体培养基的过程使用的接种工具是_______,该方法计算得到的菌数往往比实际值_____(填“偏低”或“偏高”),原因是__________________________________________________。12345678910111213答案涂布器偏低当两个或两个以上的细胞聚集在一起长成的是一个菌落从图中看将C瓶菌种接种到固体培养基的方法为稀释涂布平板法,因此该过程使用的接种工具是涂布器,该方法计算得到的菌数往往比实际值偏低,主要是因为当两个或两个以上的细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,进而导致统计的结果偏低。12345678910111213答案(3)一段时间后,培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落,我们筛选的目的菌是___________菌落中的细菌,另外一种菌落利用的氮源很可能是______。12345678910111213答案有透明带氮气一段时间后,培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落,需要筛选的目的菌是有透明带菌落中的细菌,即因为培养基中的莠去津被细菌利用而被分解因而出现透明带,另外一种菌落利用的氮源很可能是空气中的氮气。12345678910111213答案(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基,要如何设置对照组?________________________________________________________________。12345678910111213答案
将配制的培养基灭菌后不接种,与实验组放在相同且适宜的条件下培养为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基,需要设置对照组,对照组应该为空白对照,将配制的培养基灭菌后不接种,与实验组放在相同且适宜的条件下培养。12345678910111213答案12.研究发现,从活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株,它们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN-1的筛选流程,图2表示GN-1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。回答下列问题:12345678910111213答案(1)图中将菌液接种到含分散蓝2BLN的LB固体培养基上所用的接种方法是_______________,该接种方法要求对菌液做充分的稀释,目的是__________________________________________。12345678910111213答案稀释涂布平板法使细菌分散成单个细胞,在平板上获得单菌落根据培养基中菌落的分布可知,向含分散蓝2BLN的LB固体培养基上进行接种的方法是稀释涂布平板法。用稀释涂布平板法接种时,要对菌液进行充分的稀释,可以使细菌分散成单个细胞,在平板上获得单菌落。12345678910111213答案(2)图1中菌种①和③的周围出现透明圈,透明圈形成的原理是____________________________________________________________________。菌种①~④中,最符合要求的是________。12345678910111213答案
菌种①和③可降解分散蓝2BLN,分散蓝2BLN被降解后蓝色消失形成透明圈菌种③图1中的菌种①和③可以降解分散蓝2BLN,从而使菌落周围的蓝色消失,形成透明圈。菌种③周围透明圈直径与菌落直径的比值较大,所以菌种③降解分散蓝2BLN的能力较强。123456789
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