适用于新教材2025版高考生物一轮总复习课时规范练50基因工程的基本工具与操作程序新人教版

课时规范练50一、选择题1.(2024届普宁期中)下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是()A.用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有两个磷酸二酯键被断开B.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大C.序列-CATG↓-和-G↓GATCC-被限制酶切出的黏性末端碱基数不同D.T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接答案:B2.(2024济南一模)A基因中含两种限制酶BamHⅠ和MspⅠ(5'C↓CGG3')的酶切位点,HpaⅡ和MspⅠ酶切位点相同,酶切位点处的胞嘧啶可能被甲基化,HpaⅡ对胞嘧啶甲基化敏感(即不能切割甲基化的酶切位点),而MspⅠ则对胞嘧啶甲基化不敏感。某种小鼠(Aa)有两种表型,用每种表型的小鼠A基因分别做了三组的酶切试验:第一组单独运用BamHⅠ,其次组运用BamHⅠ+MspⅠ,第三组运用BamHⅠ+HpaⅡ;每组完全酶切产物(每一个酶切位点均被切割)通过电泳分别并运用探针得到杂交带,如图所示。下列叙述错误的是()A.第一组处理后均可得到包含探针的8.9kb基因片段B.若表型1中的A基因经过其次组和第三组处理后的酶切结果分别是3.5kb和8.9kb,说明表型1中的A基因中四个MspⅠ酶切位点均被甲基化C.若表型2中A基因第三组酶切结果介于3.5kb和8.9kb之间,说明A基因中至少有2个HpaⅡ酶切位点被甲基化D.该种小鼠(Aa)有两种表型可能是A基因甲基化程度不同影响了基因的表达答案:C3.(2024青岛一模)DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖,具有网络结构,使大分子物质在通过时受到较大阻力,借此分别不同大小的DNA片段。下列说法错误的是()A.琼脂糖凝胶电泳可用于分别、鉴定DNA分子的混合物B.双链DNA分子片段的长度越大,在琼脂糖中的移动速率越大C.凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合,用于分别后DNA的检测D.凝胶中的DNA分子通过染色,可在波长为300nm的紫外灯下被检测出来答案:B解析:凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小有关,双链DNA分子片段的长度越大,在琼脂糖中的移动速率越小,B项错误。4.(2024泰安三模)以菜花为材料提取DNA时,需将材料进行研磨,研磨液的成分常含有SDS(蛋白质变性剂)、EDTA(DNA酶抑制剂)、Tris(缓冲剂)。下列有关叙述错误的是()A.为了使研磨更加充分,可以先用纤维素酶处理菜花B.SDS可以使染色体中的DNA和蛋白质分别C.EDTA可以防止DNA被细胞中的酶水解D.Tris可以使DNA形成白色絮状物答案:D解析:可以先用纤维素酶处理菜花,水解细胞壁,使研磨更加充分,A项正确;SDS是蛋白质变性剂,可使蛋白质结构变得松散,使染色体中的DNA和蛋白质分别,B项正确;EDTA是DNA酶抑制剂,可以防止DNA被细胞中的DNA酶水解,C项正确;Tris是缓冲剂,可调整溶液的pH,肯定浓度的NaCl可以使DNA形成白色絮状物析出,D项错误。5.将含有基因修饰系统的T-DNA(一段双链DNA序列)插入到水稻细胞M的某条染色体上,在该修饰系统的作用下,一个DNA分子单链上的一个C脱去氨基变为U,该脱氨基过程在细胞M中只发生一次。利用培育技术将细胞M培育成植株N。下列说法错误的是()A.N的每一个细胞中都含有T-DNAB.N自交,子一代中含T-DNA的植株占3/4C.M经3次有丝分裂后,含T-DNA且脱氨基位点为A—T的细胞占1/2D.含有基因修饰系统的T-DNA可利用农杆菌转化法将修饰基因转入水稻细胞答案:C解析:假如M经3次有丝分裂后,形成子细胞有8个,由于M细胞DNA分子单链上的一个C脱去氨基变为U,两条链对应的碱基为G、U,所以复制三次后,有4个细胞脱氨基位点为G—C,3个细胞脱氨基位点为A—T,1个细胞脱氨基位点为A—U,因此含T-DNA且脱氨基位点为A—T的细胞占3/8,C项错误。6.(2024石家庄二模)探针是段带有放射性或荧光标记的DNA片段。囊性纤维化的诊断阵列是表面结合有单链DNA探针的特别滤纸,其中“0”处放置正常基因的探针,“1~10”处放置该基因不同突变的探针,这些突变基因均为该病致病基因。检测#1~#3个体的相关基因,结果如下图所示。下列有关叙述正确的是()A.放置多种探针的理论依据是基因突变具有随机性B.依据检测结果可判定#1和#2正常、#3患有该病C.由该检测结果可推知,囊性纤维化是一种多基因遗传病D.依据该原理也可以用来推断样本中病毒的类型答案:D解析:由题干信息可知:诊断阵列是DNA单链探针结合在一种特别的滤纸上,用于检测相关基因单链,在图中0号位置放置正常基因探针,1~10号放置囊性纤维化不同基因突变位点的探针,#1~#3为个体,放置多种探针的依据是基因突变具有不定向性,A项错误;据图仅知#2个体含有一个正常基因和一个突变基因,但显隐性未知,故无法推断#2是正常还是患病,B项错误;由题干信息和图像综合分析可知,囊性纤维化的突变位点许多,很可能是由复等位基因限制的,C项错误;若将诊断阵列上放置不同病毒的基因探针,依据碱基互补配对原则,也可诊断样本中病毒的类型,D项正确。7.人参是一种珍贵药材,具有良好的滋补作用。干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有肯定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①~④表示相关的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶,它们的识别序列及切割位点如下表所示。下列有关叙述错误的是()限制酶识别序列及切割位点EcoRⅠG↓AATTCBamHⅠG↓GATCCA.过程①所需的两种引物中分别加上GAATTC和GGATCC序列有利于后续操作B.构建基因表达载体时,目的基因必需位于启动子和终止子之间才能进行表达C.过程③利用的是T-DNA的特性将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA中D.过程④需限制培育基中植物激素的种类和比例,以防止愈伤组织细胞发生再分化答案:C解析:过程③是将目的基因导入农杆菌中,根瘤农杆菌是原核生物,无染色体,C项错误。二、非选择题8.(2024菏泽一模)一般棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。科研人员通过构建反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉花细胞,胜利获得转基因棉花品种,详细过程如下。(1)基因表达载体除图示组成外,还有复制原点、等(答两个)。①②过程中所用的限制酶分别是和。

(2)PCR技术扩增β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2)原理是,该过程须要依据GhMnaA2基因设计种引物,为保证GhMnaA2插入质粒2中,需在引物的端添加限制酶识别序列。

(3)③过程中用酶切法可鉴定正、反义基因表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切割正义基因表达载体获得0.1kb、3.75kb、5.25kb、8.6kb四种长度的DNA片段,则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是和。

(4)导入细胞内的反义GhMnaA2能阻挡β-苷露糖苷酶合成,使棉纤维更长的原理是。

(5)为什么不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞?答案:(1)终止子、标记基因(缺一不行)HindⅢ和BamHⅠ(缺一不行)SmaⅠ(2)DN