DB21T 3388-2021 规模化奶牛场乳房炎防治技术规范

21TechnicalSpecificationForPreventionAndTreatmentOfDairyCattleM辽宁省市场监督管理局发布I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定1规模化奶牛场乳房炎防治技术规范本文件适用于辽宁省行政区域内规模化奶牛场对奶牛乳房炎NY/T2962奶牛乳房炎乳汁中金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、无乳链球菌分离鉴定方法NY5047无公害食品奶牛饲养兽医防疫准则NY/T5049无公害食品奶牛饲养管理准则规模化奶牛场是指经当地农业、工商等行政主管部门批准，具有法人资格，同时奶牛存栏量头1003.3临床型乳房炎Clinicalma乳汁稀薄或变稠。或患部乳房组织出现不同程度的充血、肿胀、温热和疼痛，乳房上淋巴结3.4亚临床型乳房炎（隐性乳房炎）Subclinicalma2理变化等，但如果采用体细胞计数方法，其乳汁中的体细胞数量＞3×105次个/m按照GB13078、NY5032和NY/4.2卫生管理4.2.1人员每日及时清扫牛床内的粪便，并冲洗干净，每周消毒4.2.3牛舍通道4.2.4运动场4.2.5用具4.3榨乳4.3.1乳房清洗和消毒榨乳前先用40℃~50℃的温水将乳房擦拭干净，并选用有效消毒药4.3.2手工榨乳乳房清洗消毒后，用清洗消毒过的干毛巾抹干净乳头，采用拳握法进行榨乳，榨乳速度为84次34.3.3机械榨乳4.4榨乳机的消毒4.4.1榨乳前4.4.2榨乳后4.5乳房护理少，脉搏增速，脱水，全身衰弱、沉郁。当病情发展很快且症状严重时可危及生病牛一般没有全身症状，乳汁中有絮片、凝块，并呈水房萎缩，出现硬结。慢性乳房炎易成为牛群中的4酶类检测法和乳成分直接检测法。本文件主要介绍体细胞计数法。检测方法参选用抗感染药物治疗。治疗前应进行乳汁采样，进行病原培养，根据药敏实验结果选择用药采用乳房基部封闭、乳房按摩、增加挤乳次数、乳房冷敷、外敷药物等缓解乳房的肿胀。病牛奶用专用容器集中销毁，严格执行休药期和弃奶规56进行隐性乳房炎检测，阴性奶牛方可进行干奶。榨乳后，向每个乳区注入适量的干奶药。7A1.金黄色葡萄球菌的检验A1.1.1革兰氏染色：A1.1.1.1涂片、火焰固定。溶液A：结晶紫2g，95%酒精20mL，溶液B：草酸铵0.8g，蒸馏水80mL。将A、B溶液混合，用滤纸过A1.1.1.7沙黄液（稀）染2min后A1.1.2触酶试验细菌培养物中，立即观察结果。有大量气泡产生者为阳性，无则A1.1.3血浆凝固酶试验8A1.2乳样的采集最后用70%的酒精擦拭乳头。采样者同时进行手指擦拭消毒。每个乳室先挤去头2～3把奶，以排除污染A1.3病原菌的分离培养分离培养：将乳样摇匀，分别取适量接种于营养肉汤（10%血清）、鲜血琼脂、麦康凯琼脂培养基（平板）后，置于37℃温箱培养24～48h菌落涂片、染色、镜检（镜检呈葡萄状排列，无芽孢、荚膜，直径0.5～1μm，革兰氏染色阳性），并A1.4生化鉴定A1.5毒力试验接种，接种量为0.5mL/只（家兔皮下接种1.0mL或者静脉接种0.1～0.5m），A1.6病原菌的重分离试验9检查，观察所分离菌株是否为原接种菌。如果是则进一步确定病原菌为金黄色葡萄球菌。A2.链球菌的检验A2.1主要试剂和试验方法20mm。置37℃温箱内培养24h后观察结果A2.2乳样的采集最后用70%的酒精擦拭乳头。采样者同时进行手指擦拭消毒。每个乳室先挤去头2～3把奶，以排除污染A2.3病原菌的分离培养分离培养：将乳样摇匀，分别取适量接种于营养肉汤（10%血清）、鲜血琼脂、麦康凯琼脂培养基（平板）后，置于37℃温箱培养24～48h疑为无乳链球菌，如果为α溶血，疑为停乳链球菌或者乳血清肉汤中生长初呈均匀浑浊，管底出现絮状沉淀，上清A2.4生化鉴定鉴定为停乳链球菌；若细菌CAMP试验阴性，水解A2.5动物试验兔静脉接种1～2mL，可使动物在1周内死亡。对接种后发病、死亡小鼠（家兔）的肝脏进行病原菌重分病原菌为停乳链球菌。其他两种链球菌并不能使试验动物致），），100mL，将上列溶液混合摇匀，过滤后备用。二甲苯、95%乙醇。生物显微镜、载玻片、10μL微量加样纸板上用毛笔划数个面积为1cm2的方格透干燥、脱脂、固定：涂好乳膜的玻片于37℃温箱中干燥，然后用二甲苯脱脂5min，再置95%乙醇中染色：玻片干燥后，用美蓝染色液染色5min。水洗，镜检及计数：在生物显微镜油镜下观察（最好用10×目镜，其视野直径要求为0.016），计数100个视野内的细胞数，然后用下式计算：SCC＝100×视野面积πr2＝3.1416×(0.016/2)2＝0.0SCC＝系数×每个视野的细胞平均数（即细胞总数÷100细胞数/mL乳。（＋）；CMT是加州乳房炎试验的简称，即首先在美国加利福尼亚州使用的一种乳房炎检测试验。它是通过乳中体细胞被破坏，释放出DNA，进一步作用，使乳汁产生沉淀或形成凝胶。体细胞数越多，产生的沉是简便、快速。我国研制出了类似的方法如BMT（北京奶牛研究所）、