人教版高中生物选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（练）（教师版）

选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（练）1.在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（）A.加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基B.加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基C.加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基D.加入唯一碳源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基【答案】B【解析】在分解尿素菌的分离和鉴定中，应该先加入尿素作为分解尿素菌的唯一氮源，分解尿素菌合成的脲酶，能分解尿素，产生氨，氨呈碱性；然后加入酚红指示剂培养细菌，指示剂将变为红色。2.测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（）A.细菌个体小，真菌个体大B.细菌易稀释，真菌不易稀释C.细菌在土壤中的含量比真菌高D.随机的，没有原因【答案】C【解析】在土壤中的微生物，大约70%～90%是细菌，比真菌多，所以为了确保获得的菌落数在30～300之间，测土壤中细菌的数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，故选C。3.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．①③⑤⑧C．②④⑥⑧D．①④⑥⑦【答案】B【解析】要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，故1需要2错误，故C错误。需要用固体培养基必须加入琼脂，故3正确，4错误，D错误。需要加碳源即葡萄糖，故5正确，6错误。不需要氮源，故不需要甲硝酸眼，故7错误，8正确，因此A错误，B正确。4.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的（）A.将土壤用无菌水稀释，制备10﹣3～1O﹣5土壤稀释液B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株【答案】C【解析】A、将土壤用无菌水稀释，然后经过系列稀释，制备10﹣3～1O﹣5土壤稀释液；A正确．B、将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上；B正确．C、用加入酚红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌，刚果红指示剂是用于分离分解纤维素的菌；C错误．D、分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，氨气能使酚红指示剂显红色，从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株；D正确．5.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关内容的叙述中不正确的是（）A．实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基B．通过图中I、Ⅱ过程目的是增加目标微生物的数量C．统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数【答案】D【解析】从混合物中分离某种微生物要用选择培养基，需要在培养基中加入特定的物质，如羟基苯甲酸，在该培养基中所需要的微生物能大量繁殖，故AB正确；稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示，故C正确；有些微生物可以利用其它微生物的代谢产物来进行生长繁殖，所以在选择培养基上生长的微生物不一定是所选择的微生物，故D错误。6.下列叙述不正确的是()A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C．如果得到了多个菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功D．牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落【答案】D【解析】牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D错误。7.选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为()A.伊红美蓝培养基、含青霉素培养基B.含青霉素培养基、含氨的无机培养基C.含氨的无机培养基、含青霉素培养基D.含青霉素培养基、伊红美蓝培养基【答案】B【解析】酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量，把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可进行选择培养。8.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A.未接种的选择培养基B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C.接种了的选择培养基D.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基【答案】D【解析】选择的目的是为了分离、筛选，对照遵循的原则是单一变量，因此用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目。9.下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是()①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A.①→②→③→④ B.①→③→②→④C.①→②→④→③ D.①→④→②→③【答案】C【解析】在分离土壤中某细菌时，应先选取土样(10g)，然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数。10.关于统计微生物数目，说法错误的是()A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同C.只有得到了3个或3个以上菌落数目在30〜300的平板，才说明系列稀释操作成功D.每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果【答案】C【解析】土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%～90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，A正确；根据选项A可知，土壤中各类微生物的数量不同，因此测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，B正确；在同一稀释度下只要得到两个或两个以上的菌落数目在30～300的平板，就说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C错误；每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果，D正确。11.自生固氮菌能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途，研究人员欲从土壤中筛选出自身固氮菌菌株。请回答下列问题：（1）培养微生物的培养基中，一般都含有水、________________、氮源和无机盐。对培养基进行灭菌的常用方法是________________，要从土壤样品中分离出自身固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于缺________________的培养基上进行筛选。（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不易过多的原因是________________，涂布培养四天后，可通过观察________________的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。（3）纯化自身固氮菌培养的接种方法主要有稀释涂布平板法和________________法两种。（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行________________处理后，才能扔掉。【答案】（1）碳源高压蒸汽灭菌法氮（2）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果菌落（3）平板划线（4）灭菌【解析】（1）培养微生物的培养基中，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法，自生固氮菌可以从空气中的氮气获取氮源，要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于缺氮的培养基上进行筛选。（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不易过多的原因是避免培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，涂布培养四天后，可通过观察菌落的形态特征（大小、形状、颜色、光泽等）来统计土壤中自生固氮菌的种类。（3）纯化自身固氮菌培养的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法两种。12.生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10g1g15g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，调pH为7.2（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是_______________________。（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。（4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是________________。【答案】(1)脲氨（2）尿素葡萄糖振荡培养（3）稀释涂布升高（4）将A同学的培养基在不加土样的情况下