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文档简介
等电点延迟符号一、蛋白质的两性电离及等电点
蛋白质分子中具有可解离基团,分别可以使其带上正、负电荷,因此蛋白质也具有两性,在电场中也可以电泳。蛋白质的等电点(pI):在某一pH溶液中,蛋白质所带的正电荷和负电荷相等,成为兼性离子,净电荷为零,此溶液的pH值称为该蛋白质的等电点考点电泳:带电颗粒在电场力的作用下向着与其电荷相反的电极移动的现象。
蛋白质电泳的方向主要决定于它所带电荷的性质;而泳动速度则取决于所带电荷的量及分子颗粒大小。
实践中常利用电泳来分析、分离蛋白质混合物或作为蛋白质纯度鉴定的手段。蛋白质分子电泳A:染色后显示的蛋白质区带B:光密度扫描定量分析沉淀延迟符号(一)蛋白质的沉淀
蛋白质颗粒表面的水化膜和电荷使其胶体溶液保持稳定,当这两个因素遭到破坏后,蛋白质溶液就发生凝聚而沉淀析出,这种作用称为蛋白质的沉淀作用。+++++++带正电荷的蛋白质--------带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质++++++++带正电荷的蛋白质--------带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉能沉淀各类生物碱的化学试剂叫做生物碱试剂。如:单宁酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸能沉淀各类生物碱方法条件盐析pH=pI水溶性有机溶剂法pH=pI重金属盐法
pH>pI
生物碱试剂法
pH<pI1.分离制备有活性的天然蛋白制品2.从制品中除去杂蛋白,或者制备失去活性的蛋白质制品蛋白质沉淀的实践应用(二)蛋白质的凝固作用蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块,此凝块不易再溶于强酸和强碱中。变性、沉淀、凝固之间的关系变性后的蛋白质易于沉淀,沉淀的蛋白质不一定变性,但凝固的蛋白质一定变性。变性延迟符号蛋白质的变性、显色和紫外反应
天然蛋白质分子由于受各种物理、化学因素的影响,空间结构被破坏,理化性质和生物学性质改变,但一级结构不破坏,这种现象称为蛋白质的变性作用。物理因素:高温、高压、剧烈振荡、各种射线化学因素:强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂及生物碱试剂等一、
蛋白质的变性蛋白质变性的因素考点考点1.理化性质发生了变化,易发生凝集、沉淀2.生化性质发生了变化,更容易被蛋白酶水解3.生物活性丧失,这是蛋白质变性的最重要标志之一变性蛋白质的性质变性的本质
破坏非共价键和二硫键(次级键),不改变蛋白质的一级结构。考点考点
当蛋白质变性程度较轻时,如果去除变性因素,有的蛋白质仍能恢复或部分恢复其原来的构象及功能,这种变化称为复性变性的可逆性
许多蛋白质变性时被破坏严重,不能恢复,称为不可逆性变性
天然状态,有催化活性
尿素、β-巯基乙醇
去除尿素、β-巯基乙醇非折叠状态,无活性核糖核酸酶
应用举例临床医学上,变性因素常被应用来消毒及灭菌。此外,防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂(如疫苗等)的必要条件。
2019年口腔执业助理医师《生物化学》考试大纲单元细目要点一、蛋白质的化学1.蛋白质的分子组成(1)元素组成(2)基本单位2.蛋白质的分子结构(1)肽键与肽链(2)一级结构(3)二级结构——α螺旋(4)三级和四级结构的概念3.蛋白质的理化性质(1)等电点(2)沉淀(3)变性点滴积累
1.蛋白质两性解离、胶体性质、沉淀、变性、紫外吸收及颜色反应均与蛋白质的化学组成及结构密切相关。
2.蛋白质两性解离状态主要取决于蛋白质分子中酸性和碱性基团数量及酸、碱基团解离度的大小;同时亦受蛋白质溶液pH的影响。pI只是蛋白质解离的一种特例状态而以。
3.实践中常运用蛋白质的pI和其所处溶液的pH来判断蛋白质带电性质及荷电多少。可根据pI-pH的差来推论蛋白质电荷性质,其差值为正蛋白质带正电荷,反之亦然;差值越大,荷电数量则越多。4.蛋白质的变性仅导致蛋白质特
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