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DB21DB21/T2743—2017动物源细菌抗菌药物敏感性检测Bacterialantimicrobialsusceptibilitytestingofanimalorigin辽宁省质量技术监督局发布IDB21/T2743—2017本标准起草单位：辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心、中国兽请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些1DB21/T2743—2017本标准规定了动物源细菌常见药物的微量肉汤稀释法药物敏感性试验所需的试剂和材料、仪器设本标准适用于动物源非苛氧菌常见抗菌药物的微量肉汤稀释法件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用GB/T6682分析实验室用水规格和试验试剂和材料称取8.50g（精确到0.01g）分析纯氯化钠，加入1L蒸馏水溶解后121℃2DB21/T2743—2017使用标准品或对照品，参照中华人民共和国兽药典或CLSI的M07-A10、M37-A3和M45-A3进行溶解。4.7药敏检测板按产品说明进行操作使用。4.8质控菌株应选用来自国家级微生物菌种保藏中心的标准菌株或具有资质的菌种保藏机构提供的分类明确的菌株。质控菌株的使用代次为3~5代，质控菌株应至少30天更换一次，由冻干或超低温冷冻保存菌种移种或购买新菌种。5仪器设备5.1恒温培养箱：精度36±1℃。5.2分析天平：感量为0.01g和0.00001g。5.3无菌操作台：可满足无菌要求的生物安全柜、超净台或无菌室等。5.4多道移液器：量程20~200μL、100~15.5麦氏比浊仪：量程0~5MCF。5.6自动加样器。5.7药敏结果判定仪。6测定程序动物源细菌抗菌药物敏感性检测程序见图1。图1动物源细菌抗菌药物敏感性检测程序图3DB21/T2743—2017用接种环挑取琼脂平板上培养16～18小时的3～5个单菌落，用0.85%无菌生理盐水或M-H肉用于制备抗菌药物储备液的溶剂和稀释液，除蒸馏水可高压灭菌外，其余应采用0.22μm微孔滤膜将加有菌液和抗菌药物的板，置36±1℃培养箱中培养16～1在质控菌株的最低抑菌浓度符合规定范围的前提下，按判断标准判断被检菌株的敏感性－敏感（S）、中度敏感（I）或耐药（R）。对于只给出敏感判断标4DB21/T2743—2017考美国临床实验室标准化委员会CLSI的M07-A10、M37-A3和M45-A3的要求进行质量控制，按CLSI的M100-S26和M31-A3的临床折点判断标准进行耐药性判读和结果分5DB21/T2743—2017除非特殊注明，所用试剂均为分析纯；实验用水应符A.1琼脂培养基A.1.1成分A.1.2制法热煮沸，使琼脂溶化。分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。有特殊生长要求的细菌应添加辅助生长试A.2Mueller-Hinton肉汤（M-H肉A.2.1成分A.2.2制法121℃高压灭菌15mi

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