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DB21DB21/T2705—2016淡水养殖用微生物粉剂中硝化细菌总数测定方法Enumerationofnitrifyingbacteriainmicrobialpowderforfreshwateraquacultureusage辽宁省质量技术监督局发布IDB21/T2705-20161DB21/T2705-2016本标准适用于单一菌种成分或复合菌种成分的淡水养殖用微生物粉剂中硝化细菌GB/T26322工业循环冷却水中亚硝化菌的测定微生物粉剂Microbialpo硝化细菌Nitrifyingbacte硫酸试剂定性判断硝化菌的存在,溶液呈蓝色,为阳性反应,反之,为定期进行硝化细菌的测定,至前后两次测得的阳性试管数不变,采用MPN法对试样中的硝化细2DB21/T2705-20165.4磷酸氢二钾。5.5磷酸二氢钠。5.6碳酸钠。5.7硫酸铵。5.12对氨基苯磺酸。6.9刻度吸管:1mL、10mL,最小刻度分别为0.01m3DB21/T2705-2016称取硫酸铵2g、七水硫酸镁0.03g、四水硫酸锰0.01g于烧杯中,加入适量蒸馏水溶解,用氢氧化钠溶液调节pH至7.2,蒸馏水定容至500mL,装于2L锥形瓶中,塞上棉塞,用7.2.1将蒸馏水装入锥形瓶中,装液量不超过瓶容积三分之二,塞上棉塞,用牛皮纸封住瓶口,置于7.3.1将洗净并烘干后的吸管粗端塞上医用脱脂棉,长度约107.3.2每支刻度吸管用一条约40mm~50mm宽的牛皮纸条,螺旋形卷起,粗端打结固定,置于高压蒸汽灭菌器121ºC灭菌20min,取出后放于7.4.1将洗净并烘干的药匙用牛皮纸包好,扎紧,用高压蒸汽灭菌器121ºC灭菌20min,取出后置于4DB21/T2705-2016采样方式按照GB/T1605执行。采取样品具有代表性,样品采集后应立即溶液定容至100mL。利用容量瓶和锥形瓶反复倾倒,直至容量瓶上无粉剂粘附。锥形瓶振摇30min,即8.3试样接种及培养9检测及计数9.2硝化菌检测取5滴培养液于白色比色瓷板凹孔中,加入盐酸溶液4滴使其酸化,加入对氨基苯磺酸0.05g搅拌9.3空白对照出现阳性反应,说明测定过程中有污染,本次测定无效。9.4自14d起定期对所有重复接种试管进行亚硝化菌和硝化菌的检测,至前后两次测得的阳性试管数不变,计算出梯度稀释管中阳性试管数,以阳性组合指数记录下来。阳性组合的选择应先选出3管全部阳性反应的最大稀释度,再选b)若按照上述选出3个稀释度后,有更高的稀释仍然产生1个阳性试管,应将这一阳性试管并入5DB21/T2705-2016-2-3-5123
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