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文档简介

DB21MethodofELISAforPRRSVantibodyNEQ辽宁省市场监督管理局发布I 1 1 1 1 1 2 2 3 3 3 4本标准协助单位:洛阳现代生物技术研究院有限公司、辽宁佰瑞生物科技有限公标准起草单位通讯地址:辽宁省动物及产品检疫中心(沈阳市沈河区万柳塘路105号甲),1猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体酶联免疫检测方法本标准适用于在生物安全Ⅱ级(BSL-2)以上的实验室进行猪繁殖与呼吸综合征病毒病的诊断、监测及流行病学调查,适用于猪血清或血浆样品中的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检ELISA:酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentaPRRSV:猪繁殖与呼吸综合征病毒(PorcineReproductiveandRespiratPBS:磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersolutOD:光密度,表示被检测物吸收掉的光密度(opticaldens本方法原理是包被板上包被的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原,可与待测样品中的特异性抗体反应,形成抗原-抗体复合物,再加入酶标记的二抗,则形成免疫复合物,洗涤后,如待测样品中含有PRRSV抗体,显色深,为阳性,5.1微量可调移液器:50μL~2005.7洗板机2注:本技术规范中使用的试剂,除另有说明外,所有实验使用的试剂等级均为6.2阳性对照:猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性猪血6.4酶标复合物:过氧化物酶标记的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗5mL采血针管和4mL、2mL和1.5mL离心管经121±1℃高压灭菌20min。前处理后的样品密封装于灭菌离心管内,4℃或-20℃保7.2.2取出包被板,加入100μL没液体。在最后一次洗涤液弃去后,将孔中残留的洗涤液在吸水纸3), 阴性对照平均值(NCX) 阳性对照平均值(PCX)试验成立判断标准≥0.5;NCX≤0.3。9检测过程中防止交叉污染的措施按照GB/T19495.2-20按照《农业部关于印发〈病死及病害动物无害化处理技术规范〉的通知》(农医发〔2017〕254 磷酸二氢钾十二水磷酸氢二钠2.83gA.2洗涤液A.3样品稀释液A.4磷酸盐-柠檬酸缓冲液(pH5.0)

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