2024北京重点校高二（下）期中生物汇编：基因工程章节综合（单选题）

2024北京重点校高二（下）期中生物汇编

基因工程章节综合（单选题）

一、单选题

1.（2024北京东城高二下期中）B基因存在于水稻基因组中，仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中

不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验来获取能够在卵细胞中表达B基因的转基因

植株。

水稻B基因

抗性基因

注：启动子*指可在水稻卵细胞中启动转录的启动子；Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光

下列关于该实验的叙述，不正确的是（）

A.B基因在水稻卵细胞中不转录，可能是B基因的启动子在卵细胞中无法启动转录

B.可从水稻体细胞和精子中提取RNA合成cDNA来获得B基因中编码蛋白的序列

C.在鉴定和筛选转基因植株时，可以检测加入荧光素的该植株卵细胞中是否发出荧光

D.过程②在培养基中应加入卡那霉素以检测T-DNA是否整合到水稻细胞染色体DNA上

2.（2024北京人大附中高二下期中）C基因编码具有高度特异性杀虫活性的C蛋白，V基因编码的V蛋

白是结构和作用机理不同于C蛋白的杀虫蛋白。利用C-V融合基因和下图中的载体，获得具有高抗虫性的

转基因玉米。

潮霉素抗性基因

A.农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞过程中用到了该载体

B.可采用含卡那霉素的培养基筛选成功转化的植物细胞

C.可从分子水平、个体水平对转基因玉米进行检测与鉴定

D.与转一种抗虫基因相比，此玉米可减缓害虫抗性基因频率增加

3.（2024北京丰台高二下期中）利用新鲜菜花作为实验材料提取DNA时，错送的是（）

A.可将菜花置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来

B.离心后上清液中加入95%冷酒精，出现的白色丝状物就是粗提的DNA

C.将白色丝状物置于2moi/L的NaCl溶液中，会发生溶解现象

D.可利用DNA在沸水浴下遇到二苯胺试剂呈现蓝色反应的特性对其进行鉴定

4.（2024北京丰台高二下期中）PCR引物的5,端无严格限制，可用于添加限制酶切位点等序列，对该

PCR过程理解正确的是（）

A.图示环节所需的温度比上一个环节的高

B.设计引物时需已知DNA模板的全部碱基序列

C.TaqDNA聚合酶只能从引物的3,端延伸DNA链

D.延伸出的子链与DNA模板的碱基序列完全相同

5.（2024北京丰台高二下期中）获得抗除草剂转基因玉米的技术流程如下图。相关操作叙述正确的是

四报告基因幼胚

环

素

抗

性

基

因

转基因玉米

A.在培养基中添加T-DNA片段侵染农杆菌

B.用含四环素的培养基筛选转化成功的农杆菌

C.用氯化钙处理愈伤组织使其易于吸收DNA

D.用PCR技术检测除草剂抗性基因是否翻译

6.（2024北京人大附中高二下期中）为利用链霉菌生产药物A,研究者构建重组DNA并导入链霉菌。重

组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培养和筛选过程如下图所示。

重组

DNA

颜^除选得至j㊀）稀释后

重组整

链霉菌DNA含不同浓度卡那霉素

合到基因组接种至培养

的培养基上各接种等

中的链霉菌基因培养并

诱变处理量同一稀释度的培养液

下列叙述不正确的是（）

A.导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组

B.诱变处理可能获得产药物A能力更强的菌株

C.卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达强度

D.应选用b培养基上的菌株作为工程菌生产药物A

7.（2024北京人大附中高二下期中）研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方

向）插入图中载体P区，构建表达载体，转入大肠杆菌，获得能够检测水中毒物的大肠杆菌。

下列叙述不正确的是（）

A.引物I、II中应分别含有BamHI、Xhol的识别序列

B.质粒载体上除具有图中所示的元件外还应有复制原点

C.用含氨苇青霉素的培养基对转入操作后的菌株进行筛选

D.可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中毒物情况

8.（2024北京人大附中高二下期中）研究者通过下图所示的操作过程，获得导入S基因的基因编辑小鼠。

超数体外导入S基因

雌鼠a排卵:获得卵受精「获得的表达载体「收获胚

雌鼠ap"母细胞③胎并检测

①胚胎移植

学后PCR鉴定

雌鼠b子宫-子生-------1基因编

辑小鼠

下列相关叙述正确的是（）

A.过程①获得的卵母细胞需培养至MII期

B.过程②在雌鼠a的输卵管内完成受精

C.过程③需将表达载体注射到子宫中

D.过程④需抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥

9.（2024北京清华附中高二下期中）现代智人起源于非洲的观点，得到更多证据的支持。人们认为，约

100万年前，非洲的古人类（人属各成员）第一次走出非洲L在各地发展出自己的种群，例如1856年在德

国尼安德特河谷发现的尼安德特人。约10万年前，人类（现代智人种）第二次走出非洲，与第一次走出

非洲的人类发生有限的基因交流。之后由于目前尚在争议的原因，第一次走出非洲的人类包括尼安德特人

陆续灭绝，而我们的祖先生存下来并逐渐扩散占据了全世界。2009年瑞典科学家斯万特・帕博团队完成尼

安德特人细胞核DNA的全基因组测序工作，发现生活在非洲之外的现代人体内都有1%-4%的尼安德特人

基因，现代人的线粒体和Y染色体基因中则没有发现尼安德特人基因。帕博因在已灭绝古人类基因组和人

类进化研究方面所做出的贡献，获得2022年诺贝尔生理学医学奖。下列有关叙述错误的是（）

A.帕博的研究说明尼安德特人和智人发生了杂交

B.非洲人不具有上述1%-4%的尼安德特人基因

C.现代人线粒体和Y染色体无尼安德特人基因的原因可能是在人类进化过程中，与尼安德特人发生杂

交的祖先是现代人男性与尼安德特人女性

D.帕博的研究依赖于PCR、DNA测序以及防止除古人类化石DNA以外的外源DNA污染等技术

10.（2024北京清华附中高二下期中）从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均

较强的多肽P1。目前科研人员想在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是

（）

A.合成编码P1的DNA片段

B.改造编码多肽P1的基因

C.依据目标蛋白的功能设计目标蛋白的结构

D.构建含目的肽的基因表达载体

11.（2024北京中关村中学高二下期中）生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。

如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是（）

A.将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体

B.将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培育成新个体

D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

12.（2024北京中关村中学高二下期中）图为获得抗除草剂转基因玉米A的技术路线，相关叙述错误的是

（）

除草剂抗性基因G

A.采用PCR扩增目的基因时，设计的引物间要避免形成氢键

B.为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种不同的限制酶

C.检测是否转化成功，需要依次利用报告基因和抗生素抗性基因

D.利用T-DNA可以将目的基因插入到玉米的染色体DNA上

13.（2024北京丰台高二下期中）DNA粗提取后，经纯化、扩增，可通过琼脂糖凝胶电泳鉴定分子量大

小。相关实验叙述母送的是（）

A.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2moi/L的NaCl溶液

B.将二苯胺试剂滴加在提取出的丝状物上，若变蓝可鉴定为DNA

C.将扩增得到的DNA与含指示剂的缓冲液注入凝胶加样孔中

D.DNA分子量越小，在凝胶中的迁移速率越快，离加样孔越远

14.（2024北京丰台高二下期中）拟南芥的A基因与植物的抗病性直接相关。我国科研人员尝试将拟南芥

的A基因导入黄瓜，以提高黄瓜对枯萎病和白粉病的抗性。下列分析母氓的是（）

A.可采用农杆菌转化法将A基因导入黄瓜细胞

B.构建A基因的表达载体是这项技术的核心

C.黄瓜细胞中检测到A基因说明此项研究取得成功

D.利用植物组织培养技术将转基因黄瓜细胞培育成植株

15.（2024北京丰台高二下期中）对图中潮霉素抗性基因和psy基因转录的描述里误的是（）

表示转录方向

启动子1启动子2

H।Tfepo

psy

终止子1潮霉素终止子2

抗性基因

A.潮霉素抗性基因和psy基因转录方向不同

B.转录时，均以基因的一条链为模板

C.转录时，RNA延伸方向均为5'—3'

D.DNA聚合酶催化转录过程

16.（2024北京丰台高二下期中）利用PCR技术分析粪便已成为珍稀野生动物种群调查的有效手段。同种

生物不同个体在同源染色体某些位置上DNA片段长度存在差异，这些片段可作为辨别不同个体的依据。

下列叙述正确的是（）

A.需去除粪便中微生物的DNA以免干扰实验结果

B.设计PCR引物时需要考虑物种特异性

C.反应体系中需加入四种碱基作为原料

D.PCR体系需要加入限制性内切核酸酶

17.（2024北京清华附中高二下期中）利用新鲜洋葱作为实验材料提取DNA时，下列叙述正确的是

（）

A.可将洋葱置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来

B.离心后上清液中加入95%冷酒精，出现的白色丝状物就是纯净的DNA

C.将白色丝状物置于2moi/L的NaCl溶液中，会发生溶解现象

D.向DNA溶液中加入适量二苯胺试剂混匀，溶液即呈现蓝色

18.（2024北京中关村中学高二下期中）采用基因工程的方法培养抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确

的是（）

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中

②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中

③将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组导入细菌，用该细菌感染棉花体细胞，再进行组织培养

④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花子房，并进入受精卵

A.①②B.②③C.③④D.①④

19.（2024北京丰台高二下期中）CRISPR/dCas9基因抑制系统来源于CRISPR/Cas9,Cas9酶能够切割核

酸片段，当其特定的结构区域发生改变后，失去切割功能，称为dCas9,但仍然能由gRNA引导后与DNA

结合，如下图所示。对该系统理解簿误的是（）

A.CRISPR/dCas9是由蛋白质与RNA构成的复合体

B.正常的Cas9酶不能催化磷酸二酯键的断裂

C.gRNA能与DNA上特定的碱基序列互补配对

D.dCas9与靶位点结合可以直接干扰转录的进行

20.（2024北京丰台高二下期中）酪醇具有抗癌、降血脂等众多药理作用。科研人员通过蛋白质工程改造

合成酪醇路径中的限速酶CtPDC,以提高酪醇的产量。对此过程的理解第送的是（）

A.不能直接改造CtPDC酶的空间结构

B.此项技术的操作思路与中心法则一致

C.可以生产自然界不存在的蛋白质

D.最终还是要通过改造或合成基因来完成

21.（2024北京东城二中高二下期中）为了构建可以直接利用纤维素发酵的酿酒酵母工程菌，研究人员构

建基因表达载体（如图所示），并导入不能合成尿嚏咤的酵母菌。

同源序列

PCR

正向引物

反向引物

目的基因

下列相关分析不正确的是（）

A.尿嚏咤合成基因可以作为表达载体上的标记基因

B.该方法需利用限制酶和DNA连接酶实现目的基因与载体的连接

C.扩增目的基因时应在引物的5,端添加与线性化载体两端相同的DNA序列

D.在以纤维素为唯一碳源的液体培养基中检测酒精含量确定工程菌发酵效果

22.（2024北京东城二中高二下期中）图为构建茴麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中Nptll是

卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是

（）

匚=>启动子曰终止子

A.PCR扩增A时可在引物中加入PstI和Xhol的酶切位点

B.在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌

C.用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养

D.启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费

23.（2024北京东城二中高二下期中）下列有关生物实验试剂以及现象的描述，正确的是（）

A.二苯胺试剂鉴定DNA结果呈紫色

B.苏丹m染液可将蛋白质染成橘黄色

c.甲紫染色可观察根尖细胞染色体的状态

D.用黑藻观察细胞质流动需对叶绿体染色

24.（2024北京清华附中高二下期中）噬菌体展示技术（如图）可将某些蛋白质呈递至噬菌体表面，便于

对目标蛋白进行筛选、鉴定。以下对该技术的分析错误的是（）

多

轮

筛

选

建立噬菌体展示库

A.建立噬菌体展示库需限制性内切核酸酶和DNA连接酶

B.可利用抗原一抗体杂交技术筛选目标蛋白

C.可用动物细胞做宿主培养噬菌体

D.该技术可用于获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因

25.（2024北京清华附中高二下期中）基因工程的核心是构建表达载体，下列不属于载体作用的是（）

A.防止目的基因被受体细胞限制酶“切割”B.能协助目的基因在受体细胞中复制

C.含有启动子和终止子协助目的基因表达D.具有标记基因，便于筛选重组受体细胞

26.（2024北京中关村中学高二下期中）采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确

的是（）

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中

②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中

③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养

④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵

A.①②B.②③C.③④D.④①

27.（2024北京十一学校高二下期中）利用PCR技术分析粪便已成为珍稀野生动物种群调查的有效手段。

同种生物不同个体在同源染色体某些位置上DNA片段长度存在差异，这些片段可作为辨别不同个体的依

据。下列叙述错误的是（）

A.需去除粪便中微生物的DNA以免干扰实验结果

B.设计PCR引物时需要考虑物种特异性

C.反应体系中需加入四种脱氧核甘酸作为原料

D.PCR获得的不同长度片段可通过电泳检测

28.（2024北京中关村中学高二下期中）快速、准确地确定蛋白质的三维空间结构，一直是生命科学领域

的研究热点和难点。人工智能程序AlphaFold2对大部分蛋白质结构的预测极为精准，接近真实的蛋白质

结构，达到了人类利用冷冻电镜等复杂仪器观察预测的水平。下列相关叙述不正确的是（）

A.蛋白质的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础

B.预测、设计并制造新蛋白质的技术属于蛋白质工程

C.结构预测能帮助揭示蛋白质分子间相互作用的机制

D.依据新蛋白质的氨基酸序列能推出唯一的基因序列

29.（2024北京中关村中学高二下期中）新冠病毒（SARS-CoV-2）S蛋白的受体结合结构域（RBD）是引

导病毒进入宿主细胞的关键结构。我国科研人员将GP67基因（指导合成一段信号肽，引导新合成的蛋白

分泌到细胞外）与R8O基因融合，构建融合基因，大量生产RBD蛋白，用于制备疫苗，流程见下图。下

列相关叙述正确的是（）

尺8°基因、①RBD-GP67②导入③筛选并培养④分离

GP67基因融合基因^昆虫细胞>昆虫细胞*RBD

A.过程①的基础是生物的密码子是共用的

B.过程②是直接将融合基因注射到受精卵内

C.过程③需用PCR技术检测是否合成RBD

D.过程④从培养液获得RBD无需裂解细胞

30.（2024北京丰台高二下期中）蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行

的，它最终要达到的目的是（）

A.分析蛋白质的三维结构

B.研究蛋白质的氨基酸组成

C.获取编码蛋白质的基因序列信息

D.改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求

31.（2024北京十一学校高二下期中）甲、乙是严重危害某二倍体观赏植物的病害。研究者先分别获得抗

甲、乙的转基因植株，再将二者杂交后得到Fi,结合单倍体育种技术，培育出同时抗甲、乙的植物新品

种，以下对相关操作及结果的叙述，簿送的是

A.将含有目的基因和标记基因的载体导入受体细胞

B.通过接种病原体对转基因的植株进行抗病性鉴定

C.调整培养基中植物激素比例获得Fi花粉再生植株

D.经花粉离体培养获得的若干再生植株均为二倍体

32.（2024北京中关村中学高二下期中）下图表示通过DNA过程获得目的基因并利用PCR扩增的示意

图。据图分析，下列有关叙述正确的是

RNA链DNA链

小\/

|①.||核酸「H|②||_______

■——

RNA单能杂交双倍双链DNA

"70-75T

90-95r

⑤

一④

55-60T

A.催化①过程的酶是RNA聚合酶

B.③过程不需要DNA解旋酶

C.④过程需要两个相同的引物

D.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，均须耐高温

参考答案

1.D

【分析】基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增

和人工合成。(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。(4)目

的基因的检测与鉴定。

【详解】A、启动子是与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列，所以B基因在水稻卵细胞中不能

转录，可能是B基因的启动子在卵细胞中无法启动转录，A正确；

B、目的基因获取途径之一就是从cDNA文库中获得，故可从水稻体细胞和精子中提取RNA合成cDNA

来获得B基因中编码蛋白的序列，B正确；

C、由于基因表达载体上有Luc基因，其表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光，所以在鉴定和筛选转基

因植株时，可以检测加入荧光素的该植株卵细胞中是否发出荧光，C正确；

D、检测T-DNA是否整合到水稻细胞染色体DNA上，应该用DNA分子杂交法，D错误。

故选D。

2.B

【分析】基因工程技术的基本步骤：

(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基

因等。

(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法

有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，将目

的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA

分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-

-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】A、农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体

细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆

菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定

维持和表达，因此农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞过程中用到了该载体，A正确；

B、T-DNA上含有潮霉素抗性基因，T-DNA会整合到植物细胞中染色体的DNA上，因此培养基中应加入

潮霉素以检测玉米细胞中是否含有目的基因，B错误；

C、转基因玉米的检测与鉴定可以从分子水平，如通过PCR等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插

入了目的基因或检测目的基因是否转录出了mRNA；个体水平上，如是否出现目的基因对应的性状，C正

确；

D、该玉米具有C-V融合基因具有高抗虫性，与转一种抗虫基因相比，此玉米可延缓害虫抗性基因频率增

加，D正确。

故选B。

3.A

【分析】1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用

这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）

DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一

步的分离。

2、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试

剂。

【详解】A、菜花是植物细胞，其细胞壁有保护和支撑的作用，不会吸水涨破，需要用洗涤剂瓦解细胞

膜，A错误；

B、DNA不溶于酒精溶液，在上清液中加入等体积的95%的冷酒精，白色丝状物是粗提取的DNA,B正

确；

C、DNA在2mol/L的氯化钠溶液中溶解度较大，所以将晾干的白色丝状物置于2mol/L的NaCl溶液中，

会发生溶解现象，C正确；

D、DNA在沸水浴条件下遇到二苯胺试剂呈现蓝色反应，可利用该原理对DNA进行鉴定，D正确。

故选A。

4.C

【分析】PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核甘酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR

的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可

自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】A、图示环节为引物与模板碱基互补配对，表示的是复性（50℃）环节，复性的上一环节为变性

（90℃）,复性的温度比变性的温度低，A错误；

B、引物的设计要有一段已知目的基因的核昔酸序列，保证其与已知模板能碱基配对，在后续扩增的过程

中才能进行子链的延伸，不需要知道DNA模板的全部碱基序列，B错误；

C、子链是从S-3,端延伸的，耐高温Taq酶只能从引物的3,端开始延伸DNA链，C正确；

D、由于两个引物均不在该片段的端点，因此延伸出的子链与DNA模板的碱基序列不完全相同，D错误。

故选Co

5.B

【分析】1、农杆菌转化法的具体过程：（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到

土壤农杆菌的Ti质粒上。（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。（3）利用土壤农杆菌

感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。（4）含有目的基因

的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包

含了目的基因。

2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根

据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目

的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。

3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受

体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。

4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上农杆菌-导入植物细胞一目的基因整合到植物细胞染色体上

一目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

【详解】A、将整合了目的基因（除草剂抗性基因）的Ti质粒导入农杆菌细胞内，在培养基中添加农杆菌

侵染愈伤组织，该过程实际上是将含有目的基因（除草剂抗性基因）的农杆菌Ti质粒导入愈伤组织内，A

错误；

B、四环素抗性基因为标记基因，需用含四环素的培养基筛选含重组质粒的农杆菌，B正确；

C、转化愈伤组织时需用农杆菌，先要使用Ca2+（氯化钙）处理使农杆菌使其易于吸收DNA,然后使用农

杆菌处理愈伤组织，C错误；

D、用PCR技术可以检测除草剂抗性基因是否插入植物细胞中染色体的DNA上，或除草剂抗性基因是否

转录，不能检测除草剂抗性基因是否翻译，D错误。

故选B。

6.D

【分析】基因工程的原理是基因重组，基因工程的基本操作程序为：目的基因的筛选与获取、基因表达载

体的构建、将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。

【详解】A、导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组，目的基因会插入到受体细胞的基因组中，发生

的可遗传变异类型为基因重组，A正确；

B、基因突变可能大幅度提升生物的优良性状，因此诱变处理可能获得产药物A能力更强的菌株，B正

确；

C、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一个启动子，二者共同表达，所以卡那霉素抗性强

弱可反映药物A基因的表达量，C正确；

D、诱变处理后将菌液稀释后涂布，在含不同浓度卡那霉素的培养基上各接种等量同一稀释度的培养液，

应该选择含卡那霉素浓度最高的培养基（即d）上所长出的菌落，其生产药物A的能力也较强，D错误。

故选D。

7.A

【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；

目的基因的检测与鉴定。

【详解】A、根据启动子的方向，以及终止子的位置，图中引物I、II分别加入Xhol、BamHI识别序列，

A错误；

B、基因表达载体上应具有启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点等元件，因此质粒载体上除

具有图中所示的元件外还应有复制原点，B正确；

C、氨茉青霉素抗性基因为标记基因，可使用添加氨芳青霉素的培养基筛选转入载体的菌株，C正确；

D、PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方向）插入图中载体P区，若水中有毒物，绿色

荧光蛋白能表达，可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中是否含毒物，D正确。

故选Ao

8.A

【分析】胚胎移植的生理学基础：

①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供

了相同的生理环境。

②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。

③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。

④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

【详解】A、卵母细胞需要培养到MII期才具备与精子受精的能力，因此过程①获得的卵母细胞需培养至

MH期，A正确；

B、过程②是体外受精，体外受精是将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时

间，来促使它们完成受精，B错误；

C、③是导入含S基因的表达载体，应该将含S基因的表达载体通过显微注射法注射至小鼠的受精卵中，

C错误；

D、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，故过程④不需要抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排

斥，D错误。

故选Ao

9.C

【分析】物种，简称“种”，是生物分类学研究的基本单元与核心。它是一群可以交配并繁衍后代的个体，

但与其它生物却不能交配，不能性交或交配后产生的杂种不能再繁衍。

【详解】A、尼安德特人和智人发生发生有限的基因交流，这说明尼安德特人和智人发生了杂交，A正

确；

B、生活在非洲之外的现代人体内都有1%-4%的尼安德特人基因，这说明非洲人不具有上述1%-4%的尼安

德特人基因，B正确；

C、非洲以外现代人类族群具有少量尼安德特人基因（1%到4%）,这少部分的尼安德特人基因都存在于人

类的常染色体，C错误；

D、斯万特・帕博团队完成尼安德特人细胞核DNA的全基因组测序工作，帕博的研究依赖于PCR技术（体

外DNA扩增技术）、DNA测序技术、防止除古人类化石DNA以外的外源DNA污染技术，D正确。

故选C。

10.C

【分析】1、蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。由

于基因决定蛋白质，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过基因来完成；

2、蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发一设计预期的蛋白质结构-推测应有的氨基酸序

列一找到相对应的脱氧核甘酸序列。

【详解】A、由题意可知，该技术属于蛋白质工程，已经获得该目的基因片段，不需要合成编码目的肽的

DNA片段，A错误；

B、未改造前的基因表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1,在P1的基础上研发抗菌性强但溶血

性弱的多肽药物，所以必须对蛋白质进行改造，保持其抗菌性强，抑制其溶血性，而不是改造编码多肽P1

的基因，B错误；

C、蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能，设计氨基酸序列，即目的肽的结构，从而推出其基因序

列，C正确；

D、是需要构建含目的肽DNA片段的表达载体，但这不是第一步，D错误。

故选C。

11.C

【分析】、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组

并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。

2、植物细胞具有全能性，因此植物复生可以通过植物组织培养来实现，而动物细胞的全能性受到限制，

因此动物复生不能通过动物细胞培养实现。

【详解】A、动物细胞的全能性受到限制，因此动物细胞培养不能形成新个体，A错误；

B、动物细胞融合技术还不能形成新的动物个体，况且细胞融合后会导致遗传物质加倍，B错误；

C、将野驴的体细胞核移植到雌性家驴的去核卵细胞中，可以克隆形成野驴，C正确；

D、将野驴的基因导入家驴的受精卵中，属于基因工程，可培育成新性状的家驴，D错误。

故选Co

12.C

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增

和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体

细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通

道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态

细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目

的基因——PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——PCR技术；③检测目的基因是否翻译成蛋

白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】A、采用PCR扩增目的基因时，设计的引物间要避免形成氢键，以免两个引物配对或自身环化，

影响子链的延伸，A正确；

B、为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种不同的限制酶，产生不同的黏性末端，B正确；

C、据图分析可知，质粒上含有氨苇青霉素抗性基因，可以作为标记基因，因此筛选1需要用氨苇青霉素

培养基筛选出成功导入表达载体的农杆菌，随后再利用报告基因的相关特性进行筛选2,所以需要依次利

用抗生素抗性基因和报告基因，C错误；

D、利用T-DNA可以将目的基因插入到玉米的染色体DNA上，D正确。

故选C。

13.B

【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：

（1）DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点

可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；

（2）DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA

进一步分离。

【详解】A、DNA不容易酒精溶液，能溶解在2moi/L的NaCl溶液中，A正确；

B、鉴定DNA时，应将丝状物溶解到一定浓度的氯化钠溶液中之后再加入二苯胺试剂中进行沸水浴加热，

B错误；

C、将扩增得到的DNA与凝胶载样缓冲液混合，再将混合液缓慢注入凝胶加样孔内，C正确；

D、电泳鉴定时，在带电量相同的情况下相对分子质量越小的DNA片段在凝胶中的迁移速率越快，距离加

样孔越远，D正确。

故选B。

14.C

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增

和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目

的基因的检测与鉴定。

【详解】A、农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法，可采用农杆菌转化法将A基因导入

黄瓜细胞，A正确；

B、基因表达载体的构建是基因工程的核心，B正确；

C、黄瓜细胞中检测到A基因意味着目的基因已经成功导入并表达，但此项研究是否取得成功还需在个体

水平上进行鉴定，C错误；

D、将转基因水稻细胞培育成植株需要采用植物组织培养技术，该过程体现了植物细胞的全能性，D正

确。

故选Co

15.D

【分析】转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要RNA聚合

酶参与。

【详解】A、启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，使转录开始，终止子是转录在需要的地方停止，识

图分析可知，根据图中潮霉素抗性基因和psy基因的启动子和终止子的位置可知，潮霉素抗性基因转录方

向向左，psy基因转录方向向右，二者的转录方向不同，A正确；

B、转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，B正确；

C、转录时，在RNA聚合酶的作用下，RNA子链延伸方向均为5'T3',C正确；

D、RNA聚合酶催化转录过程的进行，D错误。

故选D。

16.B

【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；过程：①高温

变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链，PCR扩增中双

链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

【详解】A、由于不同的生物DNA具有特异性，故利用PCR技术辨别不同个体时不需要去除粪便中微生

物的DNA,A错误；

B、引物是一端目的基因的核昔酸序列，设计PCR引物时需要考虑物种特异性，B正确；

C、PCR是对目的基因进行扩增的技术，反应体系中需加入四种脱氧核甘酸作为原料，C错误；

D、PCR体系不需要加入限制性内切核酸酶，需加入耐高温的DNA聚合酶，D错误。

故选B。

17.C

【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：

1、DNA的溶解性：

（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这

一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的；

（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白

质进一步的分离；

2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不

能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响；

3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试

剂。

【详解】A、洋葱是植物细胞，其细胞壁有保护和支撑的作用，不会吸水涨破，需要用洗涤剂瓦解细胞

膜，A错误；

B、离心后在上清液中加入等体积的95%的冷酒精，白色丝状物是粗提取的DNA,B错误；

C、DNA在2moi/L的氯化钠溶液中溶解度较大，所以将白色丝状物置于2moi/L的NaCl溶液中，会发生

溶解现象，C正确；

D、DNA在沸水浴条件下遇二苯胺试剂呈现蓝色反应，D错误。

故选C。

18.C

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增

和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目

的基因的检测与鉴定。

【详解】①将毒素蛋白直接注射到棉受精卵中，没有获得目的基因，子代细胞不会有抗虫性状，①错误；

②将编码毒素蛋白的DNA序列，直接注射到棉受精卵中而没有将目的基因与运载体结合，这样目的基因

无法被保留下来的，很容易被水解掉，②错误；

③基因工程中，在导入目的基因前，首先要获得目的基因即编码毒素蛋白的DNA序列，然后要将目的基

因与运载体结合即与细菌质粒重组，通过农杆菌转化法导入植物细胞，再通过植物组织培养获得转基因植

株，③正确；

④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花子房，并进入受精卵，进而可实现目的基因的表

达，④正确。

故选C。

19.B

【分析】由题干和题图可知，Cas9蛋白为限制酶，在gRNA引导下能特异性切割靶向基因；dCas9蛋白无

切割功能，是由Cas9基因突变后表达形成的蛋白质，但可与靶向基因的启动子区域结合使靶向基因失去

功能。

【详解】A、由题可知，CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，A正

确；

B、Cas9蛋白为限制酶，能够切割核酸片段，能催化磷酸二酯键的断裂，B错误；

C、由题意可知，gRNA识别受体细胞中的靶向基因序列，gRNA为RNA分子，通过碱基互补配对识别靶

向基因DNA分子，C正确；

D、由图可知，dCas9蛋白可与靶基因的启动子结合，阻止其转录过程，D正确。

故选B。

20.B

【分析】蛋白质工程的过程为：预期蛋白质功能一设计预期的蛋白质结构一推测应有氨基酸序列一找到对

应的脱氧核昔酸序列（基因）。蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通

过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活

的需要。

【详解】A、蛋白质改造工程师通过改变基因的结构进而改变表达的蛋白质的空间结构，因此不能直接改

造CtPDC酶的空间结构，A正确；

B、中心法则没有从蛋白质到DNA的遗传信息的传递规律，B错误；

C、通过对基因的结构进行改造生产自然界不存在的蛋白质，C正确；

D、蛋白质改造工程的过程是预期蛋白质功能一设计预期的蛋白质结构一推测应有氨基酸序列一找到对应

的脱氧核甘酸序列（基因），最终还是要通过改造或合成基因来完成，D正确。

故选B。

21.B

【分析】基因工程中常用限制酶切割目的基因和质粒（载体），用DNA连接酶连接目的基因和载体。

【详解】A、由题意可知，表达载体导入不能合成尿喀咤的酵母菌，所以可将尿嚎咤合成基因作为表达载

体上的标记基因，若导入表达载体后酵母菌能产生尿嚏咤，说明导入成功，A正确；

B、该方法需利用DNA连接酶实现目的基因与载体的连接，不需要使用限制酶，B错误；

C、扩增目的基因时应在引物的S端添加与线性化载体两端相同的DNA序列，以便引物与目的基因配对,

C正确；

D、在以纤维素为唯一碳源的液体培养基中检测酒精含量确定工程菌发酵效果，若能利用纤维素发酵，则

证明转基因成功，D正确。

故选B。

22.C

【分析】基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标

记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的

方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；

将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；②检测目

的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术；

个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】A、PCR扩增A后，为使A能与质粒结合形成重组质粒，需要在A的两侧加入相应的限制酶的

酶切位点，即在引物中加入PstI和Xhol的酶切位点，A正确；

B、由图可知，卡那霉素抗性基因是标记基因，因此在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农

杆菌，B正确；

C、由题意可知，GUS基因仅在