免疫学应用课件

免疫学应用

免疫学治疗与预防：熟悉人工免疫的种类；掌握人工自动免疫的概念和主要生物制品；掌握人工被动免疫的概念和主要生物制品；了解人工自动免疫应注意的事项。免疫学诊断：抗原抗体反应的原理、特点及种类(凝集反应、沉淀反应)，熟悉常用血清学试验(直接凝集、琼脂扩散、ELISA)的原理和结果判定；了解细胞免疫功能检测方法。

第一节免疫学防治

应用免疫制剂或免疫调节剂来调节机体免疫功能,预防和治疗疾病

人工免疫：人为的给机体输入抗原使机体发生免疫应答或直接输入特异性抗体或免疫细胞等制品，使机体获得特异性免疫力的方法。自动免疫被动免疫过继免疫一、人工自动免疫法：人工接种方法给机体输入疫苗或类毒素等抗原性生物制品，刺激机体产生特异性免疫应答、从而预防感染的措施。疫苗——应用微生物制备的具有免疫原性的物质。包括灭活疫苗（死疫苗）和减毒活疫苗。类毒素——将细菌毒素用甲醛减毒后制备的具有免疫原性的物质。如白喉、破伤风类毒素。新型疫苗:亚单位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗比较点死疫苗活疫苗死疫苗与活疫苗的比较制剂特点死,强毒株活,无/弱毒株剂量较大较小次数2~3次1次保存易不易，4。C免疫效果较低较高数月~2年3~5年甚至更长

常用的生物制品（一）

死伤寒、副伤寒菌苗、霍乱菌苗疫流脑菌苗、百日咳菌苗苗钩体疫苗、狂犬病疫苗流乙脑疫苗、斑疹伤寒疫苗

类破伤风类毒素、白喉类毒素毒肉毒类毒素、霍乱类毒素素

性质种类名称活卡介苗（BCG）、鼠疫菌苗疫炭疽菌苗、布氏菌苗、脊灰疫苗苗麻疹疫苗、流感疫苗人工自动免疫10免疫学的临床应用外毒素、类毒素与抗毒素外毒素0.3%~0.4%甲醛类毒素免疫血清：血清蛋白（Ag）抗毒素（Ab）多次免疫马（相应细菌）外毒素中和双重性预防接种应注意的问题对象途径剂量次数间隔复种接种反应禁忌症按说明书规定进行注意生物制品是否变质或失效疫苗的应用1、抗感染2、抗肿瘤3、计划生育4、防止免疫病理损伤

二、人工被动免疫治疗:给机体输入含有特异性抗体的免疫血清，把现成的免疫力输给机体的方法。是以抗体为基础的免疫疗法。见效快，持续短1、抗毒素：用于治疗和紧急预防外毒素所致的疾病，如白喉抗毒素、破伤风抗毒素。2、胎盘（丙种）球蛋白：用于被动预防传染病、治疗丙种球蛋白缺乏症。来源受限，有传播疾病可能。

常用的生物制品（二）

其丙种球蛋白抗菌血清、抗病毒血清抗Rh球蛋白他特异性人免疫球蛋白性质种类名称抗破伤风抗毒素白喉抗毒素毒肉毒抗毒素霍乱类毒素素人工被动免疫

过继淋巴细胞、转移因子、腺素免疫剂淋巴因子、免疫核糖核酸免疫细菌脂多糖、多聚核苷酸

增强剂卡介苗、TNF、IFN等三、过继疗法：细胞为基础的免疫治疗1、骨髓移植（1）自体骨髓移植（2）异体骨髓移植（3）脐血干细胞移植2、免疫效应细胞（1）同种淋巴细胞被动转移：注意配型（2）自体免疫效应细胞过继免疫疗法LAK（lymphokineactivatedkillercells）细胞—

淋巴因子活化的杀伤细胞。是将外周血淋巴细胞在体外经过IL-2培养后诱导产生的一种的杀伤细胞，具有更强的杀瘤特性。其杀伤肿瘤细胞不需抗原致敏且无MHC限制性。主要为NK细胞TIL(tumorinfiltratinglymphocytes)细胞——肿瘤侵润淋巴细胞。是从实体瘤组织中分离得到的,经体外IL-2培养后获得比LAK细胞更强的杀伤活性。四、人工免疫的比较项目人工自动人工被动过继免疫

输入物质抗原抗体致敏淋巴细胞出现时间1~4周后立即生效较快维持时间数月~数年2~3周不确定用途多用于预防多用于治疗多用于治疗或紧急预防第二节免疫学诊断

抗原抗体反应的应用原则1、测定抗原

（已知）

（未知）

抗体+相应抗原（诊断血清）（被检标本）2、测定抗体

（已知）（未知）

抗原

+相应抗体（诊断菌液）（被检血清）——鉴定细菌、诊断疾病可见现象——诊断疾病、免疫力测定可见现象抗原抗体反应的特点1.特异性

疾病预防、诊断、治疗的依据第二阶段：非特异性，反应慢需电解质参与，表现为凝集、沉淀、细胞溶解等现象。4.反应分两个阶段

第一阶段：特异性结合，反应快不需电解质参与，无可见现象3.可见性：需要一定的分子比例2.可逆性

分子表面结合非共价键结合抗原抗体比例与其形成复合物大小的关系抗原过剩抗体过剩比例适当凝集反应沉淀反应补体结合反应抗原抗体反应的种类1.凝集反应（agglutination）

颗粒性抗原(红细胞、细菌、乳胶颗粒等)与抗体特异性结合,形成肉眼可见的凝集块(1)直接凝集(directagglutination)

玻片凝集：查抗原—定性、简便、快速试管凝集：查抗体—定量（效价或滴度）

(2)间接凝集（indirectagglutination）

可溶性抗原包被在乳胶颗粒(乳胶凝集试验)或红细胞(间接血凝试验)表面,与相应抗体混合出现的凝集现象。乳胶颗粒红细胞间接凝集直接凝集(3)间接血凝抑制试验抗原抗体致敏颗粒2.沉淀反应（precipitation）(1)单向免疫扩散（singleimmunodiffusion）沉淀环环直径与抗原含量成正相关

可溶性抗原与相应抗体结合，形成不溶性免疫复合物，出现不透明沉淀物。多在半固体琼脂凝胶上进行，形成白色沉淀。抗体混于琼脂凝胶中制板用途：检测体液中各类Ig、补体各成分的浓度等(2)双向免疫扩散（douleimmunodiffusion）：常用于抗原或抗体的定性检测、组成和两种抗原相关性分析。一致部分一致不一致，有多种成分用途：鉴定、检测血清Ig、AFP、HBsAg等

用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应,借以提高免疫学诊断的敏感性3.免疫标记技术免疫荧光检测法放射免疫检测法酶免疫检测法直接荧光法间接荧光法免疫荧光技术

荧光素-Ag+相应Ab→Ag*-Ab荧光显微镜下观察荧光已知特异性抗体(Ab)吸附于固相载体，洗涤加被检抗原(Ag)液，洗涤

加已知酶标记特异性抗体

(Ab*)，洗涤

加酶的底物，经酶催化产生有色产物终止反应，酶标仪测定双抗夹心法（测抗原）（2）酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmuno-sorbentassay,ELISA)：酶-Ag+相应Ab→Ag*-Ab，加酶底物,终止反应，酶标仪测定或肉眼观察放射免疫检测法（RIA）：同位素-Ag+相应Ab→Ag*-Ab,测定放射性或显影，灵敏度达pg水平。(3)同位素标记技术细胞免疫功能检测1.T细胞总数测定（1）E花环试验（2）T细胞特异性抗原检测

(荧光抗体染色)2.T细胞亚群测定3.淋巴细胞转化试验1、有丝分裂原

植物血凝素（PHA）刀豆蛋白A（ConA）等2、（T淋巴细胞）转化后形态淋巴细胞转化试验未转化淋巴细胞过渡型淋巴母细胞转化后淋巴细胞TE花环试验（-）绵羊红细胞（SRBC）E花环试验（+）正常值：0.60~0.80TTE花环试验体内免疫细胞功能检测一、体液免疫检测1、I型超敏反应皮肤试验

（青霉素过敏反应等）2、中和反应皮肤试验

（毒