高三 人教版 生物学选择性必修3 第1章《发酵工程》一轮复习(第1课时)课件

《发酵工程》一轮复习(第1课时)高三—人教版—生物学选择性必修3—第1章1.通过实例分析培养基的成分及作用，总结归纳培养基的相关内容。2.认同无菌技术是获得纯净微生物的关键，能正确地运用消毒和灭菌方法。3.掌握微生物分离、纯化的常用方法，通过探究特定微生物的选择培养过程提高实验设计能力。学习目标一、微生物的基本培养技术1.培养基2.无菌技术3.微生物分离、纯化的方法二、微生物的选择培养和计数1.选择性培养某种微生物的方法2.计数方法

学习内容一、微生物的基本培养技术1.培养基下表为培养某种微生物的培养基配方，请完成以下判断题：(1)从物理性质分析，该培养基属于液体培养基。（

）(2)培养基中的唯一氮源是NaNO3，可用于合成DNA和蛋白质等。（

）(3)该培养基可培养异养型生物，如酵母菌。（

）(4)若用该培养基培养分解纤维素的细菌，只需将葡萄糖替换成纤维素。（

）√√成分NaNO3K2HPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4葡萄糖H2O青霉素含量3g1g0.5g0.5g0.01g30g1L0.1万单位√×【解析】除了将葡萄糖替换成纤维素，还应去除青霉素。【夯实基础】培养基基本成分碳源氮源水无机盐特殊需求：类型配制物理性质功能液体培养基固体培养基选择培养基鉴别培养基pH、O2、特殊营养物质等（1）获得纯净微生物的关键是什么？（2）对接种环、涂布器及培养基应使用灭菌还是消毒？防止杂菌污染接种环、涂布器使用灼烧灭菌一、微生物的基本培养技术2.无菌技术培养基使用湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）【夯实基础】无菌技术

灭菌（较为强烈）

消毒（较为温和）煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法灼烧灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌法）一、微生物的基本培养技术3.微生物分离、纯化的方法（1）某同学使用平板划线法对尿素分解菌进行纯化培养，结果发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区几乎无菌落，产生此情况的可能原因是？（2）另一同学在利用稀释涂布平板法纯化尿素分解菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是什么？第二次划线前灼烧接种环就立即划线；或者划线操作不当。选择了浓度高的稀释液；或者涂布不均匀。【夯实基础】

（以上图片来自网络）

（以上图片来自网络）平板划线法

稀释涂布平板法平板划线法【夯实基础】思考：1.如何保证无菌？2.划线前后，应注意什么？3.能获得单菌落吗？能对微生物计数吗？划线前后均应灼烧灭菌，冷却后再操作。能获得单菌落，但不能计数。接种环灼烧灭菌；在酒精灯火焰旁操作。图片来源于教材稀释涂布平板法【夯实基础】思考：1.如何保证无菌？2.能获得单菌落吗？能对微生物计数吗？能获得单菌落，也能计数。涂布器灼烧灭菌；在酒精灯火焰旁操作。图片来源于教材【提升能力】1.(2022·湖北高考)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（

）A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌D【解析】动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，A选项错误；抗生素具有杀菌作用，不能培养细菌，B选项错误；虽然在高温环境下，蛋白质会变性，但并不影响被培养的微生物所吸收，依然能发挥其作为氮源的作用，因此牛肉膏蛋白胨培养基常采用湿热灭菌法，C选项错误。【提升能力】2.（高考题改编）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述错误的是（

）A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B.该鉴别培养中纤维素是碳源，能筛选目的菌C.菌落周围的纤维素被降解后，可形成透明圈D.该实验结果出现了单菌落，达到菌种纯化的目的AI区Ⅱ区Ⅲ区【解析】倒平板时只需覆盖培养皿底部即可，不需间歇晃动，A选项错误。微生物的基本培养技术无菌技术分离纯化平板划线法稀释涂布平板法消毒灭菌灼烧灭菌干热灭菌湿热灭菌煮沸消毒巴氏消毒化学药剂消毒基本

成分特殊

需求

碳源、氮源、无机盐、水pH、O2、特殊营养物质按物理性质、功能划分类

型【知识总结】培养基

情境：产脂肪酶酵母可用于含油废水处理，为筛选出高产脂肪酶酵母菌株，科研人员欲开展相关的研究。如果你是科研团队中的一员，请完成以下任务。2.欲筛选目的菌，培养基的配方如何设计？配置以脂肪为唯一碳源的选择培养基；还可以添加适量的抗生素。从富含脂肪（或油脂）的环境中去寻找。思考：1.从哪里寻找产脂肪酶酵母菌株？二、微生物的选择培养和计数【夯实基础】选择性培养某种微生物的方法

加入特定物质通过特殊环境改变培养基成分（例如通过高温环境筛选耐高温微生物）（例如以尿素为唯一氮源筛选尿素分解菌）（例如加入青霉素筛选真菌）思考：3.如何分离、纯化产脂肪酶酵母菌株？此方法能否测数量？平板划线法或稀释涂布平板法。只有稀释涂布平板法能测数量。4.欲测定样品中产脂肪酶酵母菌的数量，请写出实验思路。

取样后，进行连续等比稀释，选取适宜稀释倍数的菌液涂布到固体培养上，至少涂布3个平板，放在适宜的环境中培养一段时间后，统计平板上的菌落平均值。二、微生物的选择培养和计数思考：5.取10克样品加入90mL无菌水中，依次等比稀释，取稀释倍数为104的菌液0.1mL涂布后，三个平板中的菌落数量分别为100、110、120，则每克样品中的酵母菌数量是多少？6.上述方法算出的数值与实际值有偏差吗？7.还有其他计数方法吗？该值为估算值，比实际值偏小显微镜计数法(100+110+120)/3

0.1×104=1.1×107个二、微生物的选择培养和计数【夯实基础】选择性培养某种微生物的方法

加入特定物质通过特殊环境改变培养基成分计数方法稀释涂布平板法显微镜计数法（例如血细胞计数板）思考：8.如何对分离、纯化的产脂肪酶酵母菌株进行鉴定？

观察菌落的特征（如形状、大小和颜色等）

借助生物化学的方法。

（以上图片来自人教版选必3）

（以上图片来自网络）二、微生物的选择培养和计数（1）研究者先制备富集培养基，然后采用

法灭菌，冷却后再放入沉积物样品，28℃

（填“有氧”或“厌氧”）培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。（2）为了获得纯种培养物并测定目的菌的数量，科研团队使用了

法。取10克样品加入90mL无菌水中，混匀、静置后取上清液1mL加入9mL无菌水中，依次等比稀释，取稀释倍数为103的菌液涂布四个平板，测得数量为18、78、91和95，则每克样品中目的菌的数量为

个。（3）研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是

（答出一点即可）。【提升能力】稀释涂布平板8.8×105高压蒸汽灭菌厌氧某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存

（高考改编题）近期在“科学号”考察船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。回答下列问题：

微生物的基本培养技术微生物的选择培养和计数无菌技术分离纯化平板划线法稀释涂布平板法消毒灭菌灼烧灭菌干热灭菌湿热灭菌煮沸消毒巴氏消毒化学药剂消毒选择培养的方法基本

成分特殊

需求碳源、氮源、无机盐、水pH、O2、特殊营养物质按物理性质、功能划分类

型通过特殊环境改变培养基成分加入特殊物质稀释涂布平板法显微镜计数法计数方法鉴

定观察菌落或生物化学方法【构建网络】培养基谢谢观看！

《发酵工程》一轮复习(第1课时)答疑高三—人教版—生物学选择性必修3—第1章【重难点突破】计数法的注意事项问题1：稀释涂布平板法的原理是什么？如何保证计数结果的准确？

原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。问题2：使用显微镜计数法（血细胞计数板）时，需要注意什么？

为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数；至少取3个平板，取平均值。（1）操作规范，先加盖玻片，再滴加菌液于盖玻片边缘；（2）加样前，应先将试管摇匀，避免误差；（3）采用抽样检测法在显微镜下计数一个小方格内的菌数，再以此估算总菌数。稀释涂布平板法显微镜计数法原理

用具特点结果

当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。显微镜、血细胞/细菌计数板不能区分活菌、死菌比实际值偏大培养基、涂布器对活菌计数比实际值偏小【重难点突破】计数法的注意事项

某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题:(1)实验时，涂布器、接种环通常采用

的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是

。甲、乙培养基均属于

培养基。

(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释

倍。

灼烧灭菌琼脂选择200

0.1

104(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是

(答出1点即可)。

(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验思路：