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备案号：51449-2016DB32TechnicalregulationfortissuecultureseedlingsofAnthura江苏省质量技术监督局发布I本标准主要起草人：叶晓青、佘建明、梁丽建、贾新平、邓衍明、孙晓波、汤日1红掌种苗组培快繁技术规程下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标选择交通便捷、地势平坦、光照充足、通风良好、水电配套、排灌便利的场地进行设施建设。用于玻璃、塑料器皿及其他实验用具的清洗、干燥和保存，药品的称量、溶解、配制，培配制、分装、包扎和灭菌，以及植物材料的预处理、培养材料的观察分放置超净工作台，开展植物材料的无菌操作，包括外植体的消毒、接种、培养物的转移和试管苗2用于试管苗的炼苗、移栽和生长，根据实际情况可选择玻璃温室或薄膜温室，必须具备夏蒸馏水器、冰箱、培养箱、天平、电热磁搅拌器4.1接种前准备工作4.1.1培养基配制和灭菌以MS培养基为基本培养基，添加琼脂6.0g/L～6分化培养基：MS+BA0.5mg/L～1.0mg/L+芽增殖培养基：MS+BA0.1mg/L～0.5mg/L+生根培养基为：1/2MS+NAA0.1mg/L～0.3mg/L+IBA0.1mg/L培养基配制完毕后，分装至组培瓶中。在121℃下高压灭菌154.1.2超净工作台消毒4.1.3接种人员的准备②入室时穿戴上经过消毒的工作服、帽子、口罩和鞋子34.2外植体接种4.2.1外植体选取和清洗外植体在加有适量洗衣粉的自来水中浸泡后，用4.2.2接种工具的消毒4.2.3外植体的灭菌然后再用0.1%的升汞灭菌8min～10mi4.2.4材料切割将叶片平放在无菌滤纸上进行切割操作，先用解剖刀沿主脉切开叶片，再将两侧纵切成3mm左右宽4.2.5接种器内分布均匀。接种完毕立即盖好瓶盖并作好标4.3培养4.3.1分化培养愈伤组织生长50d左右可将愈伤组织切割成2mm～3mm的小块，均匀接种于分化培养基表面。4.3.2增殖培养44.3.3生根培养4.4炼苗移栽4.4.1炼苗4.4.2移栽基质4.4.3移栽取出试管苗，以一手的拇指和食指轻捏茎叶部，在流水下轻轻洗净根部附着的琼脂。一减少对根系的伤害。移栽时每穴栽1苗，4.4.4消毒移栽后立即喷施一遍800

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