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DB32江苏省地方标准DB32/T1599—2010油菜菌核病菌对苯并咪唑类杀菌剂抗药性检测技术规程TechnicalSpecificationforDetectingResistanceofSclerotiniasclerotiorumtoBenzimidazoleFungicide2010-06-23发布2010-08-23实施江苏省质量技术监督局发布1NY/T1667.1～1667.8-2008农药登记所检测菌株对苯并咪唑类杀菌剂的敏感性参数与其野生敏感菌株对同一杀有效中浓度MedianEffectiveConcen培养皿(Φ90mm），三角瓶，高压灭菌锅，超净工作台，高温恒温箱（50℃~300℃之间），恒温培养箱（使温度保持在15℃~35℃之间）、显微镜、高压灭菌锅、铝锅、量筒、试管、移液管、“L”24.2.1马铃薯蔗糖琼脂培养基(PotatoSucroseAga15～20g，再煮沸至琼脂完全溶解，再经过双层纱布过滤后用清水定溶至1000m4.2.2水琼脂培养基(Water50mg/L，先用灭菌水分别将氯霉素和链霉素溶解成5000mg/L溶液，将PSA培养基加热溶解后，在100mL培养基中加入多菌灵母液后，待培养基冷却到50℃左右时，加入氯霉素和链霉素母液各1mL，充分摇匀在油菜成熟期，按不同检测目的，在用药田块随机采集油菜病株上的菌核，每株油菜病株重采集1个菌核，病株间距30m以上，每块田采30～40个菌核，每个地点采集10～20块油菜田，每块田集中器制取4mm直径的菌丝块，分别移至含多菌灵浓度药剂抑菌率（%）=对照菌落直径-药剂处理菌落直径）/对照菌落直用上面方程计算出各菌株菌丝生长抑制50%时的多菌灵浓度，朝上，每菌株重复3皿。在22℃下培养2d，观察在各浓度平板上是否有新的菌丝体长出。计算药抑制菌丝生长的最低抑制浓度（MIC值）。经过多年研究，多菌灵完全抑制油菜菌核病菌菌丝生长的最低抗菌株从田间

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