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22法I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的本文件起草单位：吉林农业大学、吉林参王植保科技有1人参锈腐病菌分子检测实时荧光定量PCR法本文件适用于人参根和土壤中锈腐病菌的实时荧光定量PCR分GB/T6682分析实验室用水规格和GB/T28067甘蔗黄叶病毒实时荧光RT-PCR检测方法一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测定每次聚合根据人参锈腐病强壮土赤壳菌I.robusta组蛋白Histone基因的保守序列设计一对特异性引物进行PCR扩增反应。利用荧光信号伴随目的PCR产物的增加而增强的原理，收集PCR扩增过程的荧26.1天平：感量0.001g。升降温速度≥3.0℃/s;均一性≤±0.5℃;准确性≤±0.3℃;温度范围4℃~100℃。6.4离心机：离心转速12000rpm以上。6.5冰箱：4℃,-20℃,-80℃。7.1.2.1经分子检测3次未检出强壮土赤壳菌的健康人参根基因组DNA。7.1.2.2经分子检测3次未检出强壮土赤壳菌的土壤总DNA。3每25m2人参田块采用梅花形采样法，不少准备人参根样品和土壤样品，参照基因组DNA提取试剂盒说明要求提取基因组DNA。采用核酸蛋体积(μL）按照商品化试剂盒说明书进行荧光定量PC4在PCR反应体系正常工作的前提下，Ct值>30为阴性，≤30为阳性。检测过程

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