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备案号：42280-2014DB22DB22/T2078—2014鹿源结核杆菌基因分型MLVA法MLVAMethodforGenotypingofMycobacteriumTuberculosisfromDeer2014-05-04发布2014-06-01实施吉林省技术质量监督局发布I1GB/T6682分析实验室用2本规程选择13个MLVA位点作为扩增位点，各位点引物见表1，引物保存于-20℃,临用前取出用双ACTGATTGGCTTCATACGGCTCTTGGCCGGCATCAAGCGCAAATCGGTCCCATCACCTTCTTACTTGAACCCCCACGCCCATTCGGCCGTGCCGGCCAGGTCCTAGCTCAACGGGTTCGCCCTTTTGGCTCTCATTGCTGGAGGGMIRU23相)于一新离心管中，加入等体积的三氯甲烷/），min，4℃,12000r/min离心10min，小心弃去上清液，向沉淀加入500µL70%冷乙醇，洗涤沉淀，4℃,12000r/min离心5min，小心倒出上清液，室温干燥后，将DN4PCR反应体系确定为：DNA0.5μl、上下游引物(10pmol/L)各0.2μl、PCR扩增预混液10μl、工作温度：10℃~30℃;运行程序：使用系统软件自带程序，检测时间455将PCR产物长度换算为重复序列拷贝数后39、MIRU40、MIRU23、MIRU2、ETRA、Mtub4、Mtub21、Mtub30、Mtub34、

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