DB2305-T 036-2024大豆灰斑病田间接种及抗性评价技术规程

ICS65.020.20CCSB16

DB2305双 鸭 山 市 地 方 标 准DB2305/T036—2024大豆灰斑病田间接种及抗性评价技术规程2024-08-302024-08-302024–09-30双鸭山市市场监督管理局发布DB2305/T036—2024前  言本文件按照GB/T1.1—20201草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由双鸭山市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：黑龙江省农业科学院佳木斯分院、宝清县小城子镇乡村振兴发展服务中心、芜湖IIDB2305/T036DB2305/T036—2024DB2305/T036—2024DB2305/T036—2024大豆灰斑病田间接种及抗性评价技术规程范围本文件规定了在人工接种条件下，大豆灰斑病抗性田间鉴定和评价的技术要求。本文件适用于大豆品种对灰斑病抗性的田间鉴定和评价。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，（包括所有的修改单适用于本文件。GB4404.2粮食作物种子第2部分：豆类术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.13.1大豆灰斑病由大豆尾孢菌引起的叶部症状为主的大豆病害，又称蛙眼病。田间症状见附录A。3.2抗病性力。3.3鉴定圃种植大豆品种进行田间接种的试验区。3.4接种体用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。13.5人工接种在人工条件下，将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程。3.6接种悬浮液用于接种的含有定量接种体的液体。3.7抗性评价根据采用的技术标准判定寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的定性描述。品种种植将供试品种在鉴定圃内按编号顺序排列，每隔19份鉴定材料播种1行感病对照品种，每个品种播一小区，小区面积2.8m2，人工单粒点播，株距5cm，行距0.65m。种子符合GB4404.2标准。病原物接种体制备5.1病原菌的来源5.1病原菌的来源选择经权威部门纯化和鉴定的大豆尾孢菌病株。5.2培养基的配制5.2.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）200g1000mL25min20g，再煮沸后加入葡萄糖20g，加水定容至1000mL，121℃下湿热灭菌25min。5.2.2高粱粒培养基挑选大小均匀、饱满的高粱粒，清洗后文火煮40min～60min，用手碾搓，高粱粒软而不烂（一捏及瘪0.5～1500mL30030min。2病原菌的活化将保存备用的大豆尾孢菌从4℃冰箱内取出，在超级工作台内，挑起菌丝接种于灭菌的PDA平板，25℃7d～10d，待菌丝长满培养皿后，即完成病原菌的活化。病原菌繁殖在超净工作台中，将活化后的病原菌菌块置于装有高粱粒培养基的三角瓶内，25℃培养30d。待菌丝长满高粱粒后，停止培养。将高粱粒从三角瓶中倒出，洗1～2次，洗去菌丝，将高粱粒放置晾干，于阴干处保存备用。接种6.1孢子诱发2d5d3%蔗糖，孢子悬浮液浓度为显微镜1010视野下5～8个孢子。田间人工接种田间人工接种3次接种，间隔时间约为3～5d。诱发条件遇干旱天气时，鉴定圃内铺设微喷管进行水分补充，以利于大豆灰斑病发生。7调查与评价病级标准01%1%～级：6%～21%～51%以上。调查方法30d～40d，调查发病情况。每个品种调查20株。记录发病级别，计算病情指数。计算公式如下：3病情指数 病级该病发病株数 100供试总株数最高级代表值

（1）抗性评价计算病情指数后，按病情指数范围确定抗性。具体抗性情况见表1。表1大豆灰斑病品种抗性评价表抗性病情指数范围免疫0高抗≤20%抗病21%～40%中抗41%～60%感病61%～80%高感≧81%有效性评价7.5调查记载表格大豆灰斑病鉴定结果记载表格，见表2。表2大豆灰斑病鉴定结果记载表7.5调查记载表格大豆灰斑病鉴定结果记载表格，见表2。表2大豆灰斑病鉴定结果记载表4编号品种名称来源病情分级病情指数平均病指抗性评价12345播种日期接种日期接种生育期接种病原菌分离物编号株系类型调查日期附录A(规范性附录)大豆灰斑病田间症状大豆灰斑病可危害大豆叶、茎、荚和籽粒，以叶片和籽粒受害最