2024高考生物一轮复习第11单元生物技术实践第40讲微生物的培养与应用学案

PAGE16-第40讲微生物的培育与应用[考纲明细]1.微生物的分别和培育2.某种微生物数量的测定3.培育基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用学问自主梳理一微生物的试验室培育1．培育基(1)概念：人们依据微生物对eq\x(\s\up1(01))养分物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的eq\x(\s\up1(02))养分基质。(2)养分成分：水、eq\x(\s\up1(03))碳源、eq\x(\s\up1(04))氮源、无机盐四类养分物质，另外还须要满意微生物生长对eq\x(\s\up1(05))pH、特别养分物质以及eq\x(\s\up1(06))氧气的要求。(3)培育基的分类①按物理状态分类培育基种类特点用途eq\x(\s\up1(07))液体培育基不加凝固剂工业生产半固体培育基加凝固剂(如琼脂)视察微生物的eq\x(\s\up1(08))运动、分类鉴定eq\x(\s\up1(09))固体培育基加凝固剂(如琼脂)微生物分别、eq\x(\s\up1(10))鉴定，活菌计数，菌种保藏②按化学成分分类培育基种类特点用途自然培育基含化学成分eq\x(\s\up1(11))不明确的自然物质工业生产合成培育基培育基成分eq\x(\s\up1(12))明确(用化学成分已知的化学物质配成)微生物的分类、鉴定③按功能分类种类制备方法原理用途举例选择培育基培育基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质的特别需求或抗性而设计从众多微生物中eq\x(\s\up1(13))分别所需的微生物加入eq\x(\s\up1(14))青霉素分别得到酵母菌和霉菌鉴别培育基培育基中加入某种eq\x(\s\up1(15))指示剂或化学药品产生特定的颜色或其他变更鉴别不同种类的微生物用eq\x(\s\up1(16))伊红美蓝培育基鉴别大肠杆菌为什么选择培育能够“浓缩”所需的微生物？提示在选择培育的条件下，可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速繁殖，而那些不适应这种养分条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。2．无菌技术(1)含义：指在培育微生物的操作中，全部防止eq\x(\s\up1(17))杂菌污染的方法。(2)关键：防止eq\x(\s\up1(18))外来杂菌的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法(连线)答案①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ3．大肠杆菌的纯化培育(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基①操作步骤eq\x(计算)→eq\x(\x(\s\up1(19))称量)→eq\x(溶化)→eq\x(\x(\s\up1(20))灭菌)→eq\x(\x(\s\up1(21))倒平板)②倒平板的方法及留意事项a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：eq\x(\s\up1(22))丙→乙→甲→丁。b．乙中的灭菌方法是eq\x(\s\up1(23))灼烧灭菌。c．丁中的操作须要等待eq\x(\s\up1(24))平板冷却凝固才能进行。1．倒平板操作为什么须要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培育基。2．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示平板冷凝后，皿盖上会凝聚水珠，凝固后的培育基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培育基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染。(2)纯化大肠杆菌的两种方法1)平板划线法①概念：是通过eq\x(\s\up1(25))接种环在琼脂固体培育基表面eq\x(\s\up1(26))连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。②留意事项：a．灼烧接种环第一次划线每次划线之前划线结束目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种干脆来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目削减杀死接种环上残存的菌种，避开污染环境和感染操作者b．灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。c．其次次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端起先，能使细菌的数目随着划线次数的增加而渐渐削减，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。d．划线时最终一区不要与第一区相连。e．划线用力大小要适当，防止用力过大将培育基划破。2)eq\x(\s\up1(27))稀释涂布平板法①概念：是将菌液进行一系列的eq\x(\s\up1(28))梯度稀释，然后将eq\x(\s\up1(29))不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面，进行培育。②操作过程(3)菌种的保存方法①对于频繁运用的菌种，可以采纳eq\x(\s\up1(30))临时保藏的方法。②对于须要长期保存的菌种，可以采纳eq\x(\s\up1(31))甘油管藏的方法。二土壤中分解尿素的细菌的分别与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：依据它对eq\x(\s\up1(01))生存环境的要求，到相应的环境中去找寻。(2)试验室中微生物筛选的原理：人为供应有利于eq\x(\s\up1(02))目的菌株生长的条件(包括养分、温度、pH等)，同时eq\x(\s\up1(03))抑制或阻挡其他微生物生长。(3)选择培育基：允许特定种类的微生物生长，同时eq\x(\s\up1(04))抑制或eq\x(\s\up1(05))阻挡其他种类微生物生长的培育基。2．统计菌落数目(1)常用方法：eq\x(\s\up1(06))稀释涂布平板法。(2)统计依据当样品的eq\x(\s\up1(07))稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个eq\x(\s\up1(08))活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。(3)活菌计算方法：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M[其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数]。(4)其他方法：还可利用eq\x(\s\up1(09))显微镜干脆计数。3．设置比照设置比照的主要目的是解除试验组中eq\x(\s\up1(10))非测试因素对试验结果的影响，提高试验结果的eq\x(\s\up1(11))可信度，例如为了解除培育基被杂菌污染的可能性，需以eq\x(\s\up1(12))未接种细菌的培育基培育作为空白比照。除设置比照组外，设置重复组的作用是什么？应如何设置重复组？提示设置重复组的作用是为解除偶然因素对试验结果的干扰；在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，选择菌落数均在30～300且数目相差不大的三个平板，用“平均值”代入计数公式予以计算菌落数。4．试验设计项目内容试验原理①能合成eq\x(\s\up1(13))脲酶的细菌才能分解尿素②配制以eq\x(\s\up1(14))尿素为唯一氮源的培育基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌试验流程土壤取样(富含eq\x(\s\up1(15))有机质)→配制土壤溶液和制备培育基→eq\x(\s\up1(16))样品梯度稀释→涂布平板与培育→菌落eq\x(\s\up1(17))视察鉴定①方法：在以尿素为唯一氮源的培育基中加入eq\x(\s\up1(18))酚红指示剂培育分解尿素的细菌②原理：细菌分解尿素的反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了eq\x(\s\up1(19))氨，其会使培育基的eq\x(\s\up1(20))碱性增加，pH上升5．结果分析与评价内容结论分析是否有杂菌污染空白比照组培育基上无菌落生长→未被杂菌污染选择培育基是否具有筛选作用牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落数目明显多于选择培育基上的菌落数目→选择培育基具有eq\x(\s\up1(21))筛选作用样品的稀释操作假如得到了2个或2个以上菌落数在30～300的平板→操作胜利重复组的结果若选取的是同一种土样，统计的结果应当接近三分解纤维素的微生物的分别1．纤维素酶(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括eq\x(\s\up1(01))C1酶、eq\x(\s\up1(02))CX酶和eq\x(\s\up1(03))葡萄糖苷酶三种组分。(2)作用：纤维素eq\o(→,\s\up17(C1酶),\s\do15(CX酶))eq\x(\s\up1(04))纤维二糖eq\o(→,\s\up17(葡萄糖苷酶))eq\x(\s\up1(05))葡萄糖。2．纤维素分解菌的筛选(1)方法：eq\x(\s\up1(06))刚果红染色法。(3)培育基：以eq\x(\s\up1(09))纤维素为唯一碳源的选择培育基。(4)试验流程土壤取样：富含eq\x(\s\up1(10))纤维素的环境↓选择培育：用eq\x(\s\up1(11))选择培育基培育，以增加纤维素分解菌的浓度↓eq\x(\s\up1(12))梯度稀释：制备系列稀释液↓涂布平板：将样品涂布到eq\x(\s\up1(13))鉴别纤维素分解菌的培育基上↓选择产生eq\x(\s\up1(14))透亮圈的菌落(5)分别纤维素分解菌所用的两种培育基比较分别纤维素分解菌的试验中先用eq\x(\s\up1(15))选择培育基，再用eq\x(\s\up1(16))鉴别培育基。①选择培育基为eq\x(\s\up1(17))液体培育基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长。②鉴别培育基含琼脂，为eq\x(\s\up1(18))固体培育基，细菌可在培育基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培育基。考点题型突破考点1微生物的纯化培育技术题型一无菌技术1．(2024·上海高三模拟)微生物培育过程中消毒和灭菌环节特别重要，以下灭菌或消毒方法不正确的是()ABCD仪器或试剂固体培育基接种环(针)菌种稀释液滴管消毒或灭菌方法高温高压火焰灼烧紫外光照耀酒精消毒答案C解析固体培育基应当用高压蒸汽灭菌，A正确；接种环应当采纳灼烧灭菌，B正确；菌种稀释液不须要灭菌或消毒操作，C错误；滴管应当用酒精消毒，D正确。2．(2024·全国卷Ⅱ)在生产、生活和科研实践中，常常通过消毒和灭菌来避开杂菌的污染。回答下列问题：(1)在试验室中，玻璃和金属材质的试验器具________(填“可以”或“不行以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采纳巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________________________________。(3)密闭空间内的空气可采纳紫外线照耀消毒，其缘由是紫外线能__________________，在照耀前，适量喷洒__________________，可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在运用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的缘由是____________________。答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时，养分物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽解析(1)能耐高温的、须要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30min或在80℃煮15min，可以杀死微生物，并且保证养分物质不被破坏。因此，与煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采纳的巴氏消毒法或高温瞬时消毒法的优点是在达到消毒目的的同时，养分物质损失较少。(3)因紫外线能破坏DNA结构，所以密闭空间内的空气可采纳紫外线照耀消毒。在照耀前，适量喷洒消毒液，可强化消毒效果。(4)通常乙醇消毒有气味，影响水质，不相宜消毒自来水；高锰酸钾本身有颜色，消毒后溶液呈紫红色，无法运用；因此水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。(5)采纳高压蒸汽灭菌时，锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底解除后才能将锅密闭。假如未将锅内冷空气排尽，则会出现压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度的现象。全面比较消毒和灭菌手段结果常用方法应用范围消毒较为温柔的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源紫外线消毒法接种室、接种箱或超净工作台灭菌剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属用具高压蒸汽灭菌法培育基及容器题型二微生物的纯化技术3．用牛肉膏蛋白胨固体培育基进行大肠杆菌的纯化培育，相关叙述正确的是()A．牛肉膏和蛋白胨主要为微生物供应糖和维生素两种养分物质B．牛肉膏蛋白胨培育基需经高压蒸汽灭菌后调整pHC．倒平板操作的最终将平板倒置，可以使培育基表面的水分更好地挥发D．可以在低温条件下采纳斜面保藏法长期保存大肠杆菌菌种答案C解析牛肉膏和蛋白胨可为大肠杆菌生长供应碳源、氮源和维生素等养分物质，A错误；牛肉膏蛋白胨培育基应先调pH再经高压蒸汽灭菌，B错误；倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，一方面可防止水蒸气倒流污染培育基，另一方面可以使培育基表面的水分更好地挥发，C正确；长期保存大肠杆菌菌种，须要用甘油管藏法在－20℃的冷冻箱中保存，D错误。4．(2024·四川高三月考)下列依据相应试验现象分析得出的结论，错误的是()A．牛肉膏蛋白胨空白比照培育基上没有菌落生长，说明培育基没有被杂菌污染B．牛肉膏蛋白胨培育基的菌落数大于选择培育基，说明选择培育基有选择作用C．稀释涂布平板法获得的培育基上菌落数小于30，说明可能是稀释的倍数太大D．在接种大肠杆菌的培育基上视察到菌落有大有小，说明培育基已被杂菌污染答案D解析牛肉膏蛋白胨培育基不具有选择性，假如牛肉膏蛋白胨培育基的菌落数大于选择培育基，说明选择培育基有选择作用，B正确；在接种大肠杆菌的培育基上视察到菌落有大有小，培育基不肯定被杂菌污染，可能是大肠杆菌菌落形成的时间不一，不能仅通过菌落的大小判别不同种类的微生物，D错误。5．(2024·江苏高考)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严峻危害。小明同学打算依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分别筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。(2)将采集到的样品接种培育，苯酚用量应随转接次数增加而渐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分别。制备平板培育基时除了须要水、养分物质外，还必需添加________。(3)如图为连续划线法示意图，在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。(4)采纳比色测定法(运用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为____________________。管号123456苯酚浓度(mg/L)1假如废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释___________________________(填序号：①5②10③20)倍后，再进行比色。答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③解析(1)分析富集培育基的成分可知，培育基中蛋白胨、苯酚中含C，可作为碳源。(2)在接种培育时，随转接次数的增加，应渐渐增加培育基中苯酚(碳源)的含量，以达到富集酚降解菌的目的。若接种培育后平板中菌落过于密集，应接着稀释涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落计数与分别。稀释涂布时所用的培育基为固体培育基，制备平板培育基时除了须要水、养分物质外，还必需添加琼脂等物质作为凝固剂。(3)利用连续划线法接种时，越在最终划线区域，菌落的密度越小，越简洁获得单菌落，所以，图中③区域更易获得单菌落。(4)依据表中6号比色管中苯酚浓度为1mg/L可以推知，1～5号比色管的苯酚浓度应分别为0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。依据题意，废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，即苯酚残留液浓度为10.5mg/L，要使稀释后的苯酚残留液浓度介于0～1mg/L之间，需将残留液稀释20倍左右，再进行比色。两种纯化细菌的方法的比较比较项目平板划线法稀释涂布平板法图示关键操作接种环在固体培育基表面连续划线①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作留意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确保试验胜利可以增加稀释度的范围菌体获得在具有所需显著菌落特征的区域菌落中挑取菌体从相宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优点可以依据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作困难，须要涂布多个平板考点,2)微生物的筛选与计数题型一培育基的成分及配制1．(2024·上海高三模拟)下表为某培育基配方，下列叙述正确的是()牛肉膏蛋白胨乳糖蔗糖琼脂5g10g5g5g2gK2HPO4伊红美蓝蒸馏水pH2g0.4g0.065g10007.2A．供应碳源的只有蔗糖B．该培育基中需加入生长因子C．牛肉膏、蛋白胨均可供应氮源D．该培育基可特定培育自生固氮菌答案C解析牛肉膏、蛋白胨均可用于供应碳源和氮源，A错误，C正确；该培育基中含有的牛肉膏、蛋白胨中含有生长因子，因此培育基不需加入生长因子，B错误；该培育基含有含氮有机物，不能特定培育自生固氮菌，D错误。2．(2024·甘肃武威十八中高三月考)关于培育基的配制说法不正确的是()A．在配制培育乳酸杆菌的培育基时，需加入维生素B．微生物的适应性强，配制培育基时可以不考虑pHC．虽然各种培育基的详细配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D．配制培育基时要留意各种养分的浓度和比例答案B解析培育基除须要满意碳源、氮源、水和无机盐几种养分物质外，还须要满意微生物生长对pH、特别养分物质以及氧气的要求，如培育乳酸杆菌时须要在培育基中添加维生素，A正确，B错误；虽然各种培育基的详细配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，C正确；不同微生物的生长对各种养分物质的需求不同，配制培育基时要留意各种养分的浓度和比例，D正确。3．(2024·甘肃武威十八中高三月考)鉴别培育基是依据微生物的代谢特点在培育基中加入一些物质配制而成的，这些物质是()A．指示剂或化学药品 B．青霉素或琼脂C．高浓度食盐 D．维生素或指示剂答案A解析鉴别培育基的原理是：在培育基中加入某种试剂或化学药品，依据微生物产生的某种代谢产物与培育基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征，从而鉴别不同种类的微生物，A正确。4．选择培育基是依据某一种或某一类微生物的特别养分要求或一些物理、化学抗性而设计的培育基。利用这种培育基可以将所须要的微生物从混杂的微生物中分别出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培育基分别为()A．伊红美蓝培育基、含青霉素的培育基B．含青霉素的培育基、含氨的无机培育基C．含氨的无机培育基、含青霉素的培育基D．含青霉素的培育基、伊红美蓝培育基答案B解析酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培育基进行选择培育，因为青霉素能抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长；硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸所释放的能量，把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培育基可进行选择培育。1.选择培育基的作用原理(1)在培育基中加入某种化学物质，如加入青霉素可以分别出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在满意基本所需培育成分的基础上加入。(2)变更培育基中的养分成分，如缺乏氮源时可以分别出固氮微生物；以石油作为唯一碳源时，可以分别出能消退石油污染的微生物。(3)变更微生物的培育条件，如将培育基放在高温环境中可以得到耐高温的微生物。2．培育基的配制原则(1)目的要明确：配制时应依据微生物的种类、培育目的等确定配制的培育基种类。(2)养分要协调：留意各种养分物质的浓度和比例。(3)pH要相宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培育不同微生物所需的pH不同。3．培育基中养分物质的确定方法不同种类的微生物代谢特点不同，因此对培育基中养分物质的需求也不同。如：(1)自养型微生物所需的主要养分物质是无机盐，碳源可来自大气中的CO2，氮源可由含氮无机盐供应。(2)异养型微生物所需的养分物质主要是有机物(即碳源)，必需由含碳有机物供应，氮源也主要是由有机物供应，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。题型二微生物的筛选与计数5．欲从土壤中分别出能分解尿素的细菌，下列试验操作中不正确的是()A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培育基在相同条件下培育作为比照D．用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解尿素的细菌答案D解析为防止土壤浸出液浓度过高，不能获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对试验结果的影响，B正确；可以将未接种的培育基在相同条件下培育作为比照，以推断培育基灭菌是否彻底，C正确；可筛选出分解尿素的细菌的培育基是以尿素为唯一氮源的选择培育基，加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解纤维素的细菌，D错误。6．下列是关于“检测土壤中细菌总数”试验操作的叙述，其中错误的是()A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C．将试验组和比照组平板倒置，37℃恒温培育24～48小时D．确定比照组无菌后，选择菌落数在300以上的试验组平板进行计数答案D解析检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，将试验组和比照组平板倒置，37℃恒温培育24～48小时，在确定比照组无菌后，选择菌落数在30～300的一组平板为代表进行计数，D错误，A、B、C正确。7．(2024·全国卷Ⅰ)将马铃薯去皮切块，加水煮沸肯定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入肯定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培育基。回答下列问题：(1)M培育基若用于真菌的筛选，则培育基中应加入链霉素以抑制________的生长，加入了链霉素的培育基属于__________培育基。(2)M培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供应了多种养分物质，养分物质类型除氮源外还有________________(答出两点即可)。氮源进入细胞后，可参加合成的生物大分子有________________(答出两点即可)。(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培育，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是______________________________________。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其缘由是____________________________________________________。答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈(4)乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差解析(1)链霉素是一种抗生素，可以抑制细菌的生长，加入了链霉素的培育基能筛选出真菌，该培育基属于选择培育基。(2)微生物生长须要多种养分物质，除氮源外，还须要碳源、无机盐、水以及特别养分物质等。氮元素是蛋白质和核酸等生物大分子的组成元素，因此氮源进入细胞后，可参加合成的生物大分子有蛋白质和核酸。(3)淀粉遇碘液会变成蓝色，产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈，可依据透亮圈来筛选产淀粉酶的微生物。(4)乙同学结果不合理，因为1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差，不能简洁的用其平均数计算得到最终结果。微生物的筛选与鉴别方法(1)微生物的筛选方法单菌落挑取法利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体培育基表面，干脆依据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物选择培育法利用选择培育基对微生物进行选择培育，干脆获得目的微生物鉴定培育法利用鉴别培育基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物(2)微生物的鉴别方法菌落特征鉴别法依据微生物在固体培育基表面形成的菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别指示剂鉴别法如培育基中加入酚红指示剂，培育某种微生物后，培育基变红说明该种微生物能够分解尿素染色鉴别法如利用刚果红染色法，依据培育基中出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈来鉴别分解纤维素的微生物方向真题体验1.(2024·全国卷Ⅲ)回答下列与细菌培育相关的问题。(1)在细菌培育时，培育基中能同时供应碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”______________________________________。(2)用平板培育细菌时一般须要将平板________(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落，探讨人员通常可依据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，缘由是__________________________。(4)有些运用后的培育基在丢弃前须要经过________处理，这种处理可以杀死丢弃物中全部的微生物。答案(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在肯定的培育条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌解析(1)蛋白胨中含有碳元素和氮元素，可为细菌生长供应碳源和氮源，葡萄糖只能供应碳源，NaNO3只能供应氮源。不同细菌生长繁殖所须要的最适pH不同，制备培育基时要依据所培育细菌种类的不同来调整pH。硝化细菌是自养生物，可通过化能合成作用利用空气中的CO2合成有机物，所以在没有碳源的培育基上也能生长。(2)用平板培育细菌时，一般将平板倒置，防止水滴倒流到培育基中造成污染。(3)在肯定的培育条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此探讨人员可依据菌落的这些特征初步区分微生物的种类。(4)消毒仅杀死物体表面或内部的部分微生物，灭菌可杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和孢子。运用后的培育基丢弃前要进行灭菌处理，防止其中的微生物感染操作者或污染环境。2．(2024·全国卷Ⅲ)回答下列与酵母菌有关的问题：(1)分别培育酵母菌通常运用______________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培育基，该培育基应采纳________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培育一段时间后会视察到菌落，菌落的含义是____________________________。(2)酵母菌液体培育时，若通入氧气，可促进______________(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)；若进行厌氧培育，可促进________________(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌，酵母