全国统考版2025届高考生物二轮复习梳理纠错预测专题十四生物技术实践学案

2024年高考“2024年高考“最终三十天”专题透析PAGE好教化好教化云平台--教化因你我而变PAGE17生物技术实践1．近五年的考题中，对微生物的分别和培育的考查尤为突出，侧重考查微生物的培育、分别、计数、无菌技术等基本学问，对传统发酵技术的发酵原理、制作流程等的考查频度也在不断提高。对植物组织培育、胡萝卜素的提取仅进行了两次考查，前者侧重考查养分条件及有关植物激素的作用等；后者侧重考查胡萝卜素的萃取剂的选择等。2．本专题以非选择题的形式考查。常借助某一特定的微生物的分别和培育考查微生物的养分、接种方法等；对于生物技术在食品加工中的应用，常借助发酵实例考查，填充内容多为教材中一些结论性语句等。植物组织培育技术、植物有效成分的提取的考查也多以教材基础学问为主。3．2024年备考时应留意：(1)某种微生物数量的测定。(2)利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。(3)利用比较法归纳总结并驾驭常见传统发酵技术的原理、流程及影响因素等。(4)列表比较玫瑰精油、橘皮精油及胡萝卜素的提取方法、原理、试验步骤等异同。考点一微生物的培育、分别与计数1．消毒和灭菌的比较2．平板划线法每次灼烧的目的3．纯化微生物的接种方法项目平板划线法稀释涂布平板法原理通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。在数次划线后培育，可以分别到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子胞群体，即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面，进行培育。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培育基表面形成单个的菌落优点可以视察菌落特征，对混合菌进行分别可以计数，可以视察菌落特征缺点不能计数汲取量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，简单扩散4．选择培育基与鉴别培育基的比较考点二传统发酵技术的应用5．比较果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作项目内容果酒和果醋的制作腐乳的制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量作用菌种果酒:酵母菌果醋:醋酸菌毛霉乳酸菌原理(1)酵母菌在无氧条件下将葡萄糖氧化成乙醇(2)醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸毛霉将蛋白质、脂肪分解成小分子有机物乳酸菌将糖转化为乳酸原料选择簇新葡萄(或苹果)豆腐大白菜、花椰菜等簇新干净的蔬菜发酵条件果酒:前期需氧，后期不需氧果醋:始终需氧始终需氧无氧发酵温度果酒:18~25℃果醋:30~35℃15~18℃常温试验流程选择葡萄↓榨汁↓↘酒精发酵醋酸发酵↓↓果酒果醋让豆腐上长出毛霉↓加盐腌制↓加卤汤装瓶↓密封腌制制泡菜：选材配制盐水↓加调味料，装坛↓发酵↓成品测亚硝酸盐含量:配制溶液制备标准显色液→制备样品处理液→比色考点三植物有效成分的提取6．植物有效成分的提取实例(1)玫瑰精油的提取留意：①加入NaCl的目的是增加水层的密度，有利于玫瑰油与水分层。②加入无水Na2SO4的目的是汲取精油中残留的水分。(2)橘皮精油的提取留意：①为了提高出油率，须要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡时间为10h以上。②橘皮要浸透，这样压榨时不会滑脱，且出油率高，过滤时不会堵塞筛眼。(3)胡萝卜素的提取留意：原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件也能影响萃取效率。因此在萃取的过程中，要先将胡萝卜进行粉碎和干燥，使之与萃取剂充分接触，提高溶解度。

1．（2024年全国统一高考生物试卷（新课标Ⅰ）·37）某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。探讨人员依据下图所示流程从淤泥中分别得到能高效降解S的细菌菌株。试验过程中须要甲、乙两种培育基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题：（1）试验时，盛有水或培育基的摇瓶通常采纳_______________的方法进行灭菌。乙培育基中的Y物质是_______________。甲、乙培育基均属于______________培育基。（2）试验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。（3）在步骤⑤的筛选过程中，发觉当培育基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其缘由可能是________________（答出1点即可）。（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要试验步骤________________。（5）上述试验中，甲、乙两种培育基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长供应4类养分物质，即________________。【答案】（1）高压蒸汽灭菌琼脂选择（2）104（3）S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长（4）取淤泥加入无菌水，涂布（或稀释涂布）到乙培育基上，培育后计数（5）水、碳源、氮源和无机盐【解析】（1）常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培育基的摇瓶，乙为固体培育基，故须要加入Y琼脂；甲和乙培育基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培育基。（2）若要在每个平板上涂布100μL稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）当培育基中的S超过某一浓度后，可能会抑制菌株的生长，从而造成其对S的降解量下降。（4）要测定淤泥中能降解S的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培育基上，培育后进行计数。（5）甲和乙培育基均含有水、无机盐、碳源、氮源。【点评】培育基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，接种工具应当进行灼烧灭菌，玻璃器皿等耐高温的、须要干燥的物品，常采纳干热灭菌。2．（2024年全国统一高考生物试卷（新课标Ⅱ）·37）探讨人员从海底微生物中分别到一种在低温下有催化活性的α-淀粉酶A3，并对其进行了探讨。回答下列问题：（1）在以淀粉为底物测定A3酶活性时，既可检测淀粉的削减，检测应采纳的试剂是_________，也可采纳斐林试剂检测________的增加。（2）在A3的分别过程中可采纳聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是___________________和___________________。（3）本试验中，探讨人员在确定A3的最适pH时运用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图推断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其推断依据是______________。（4）在制备A3的固定化酶时，一般不宜采纳包埋法，缘由是_________________________（答出1点即可）。【答案】（1）碘液还原糖（或答：葡萄糖）（2）消退蛋白质所带净电荷对迁移率的影响使蛋白质发生变性（3）在pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同（4）酶分子体积小，简单从包埋材料中漏出【解析】（1）测定酶活性时，可以通过检测反应物的削减或生成物的增加来反映酶活性，所以可以用碘液检测淀粉的削减，也可用斐林试剂检测还原糖（或葡萄糖）的增加。（2）鉴定蛋白质纯度常用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法，凝胶中加入SDS可以消退蛋白质所带净电荷对迁移率的影响，并使蛋白质发生变性。（3）分析题中曲线可知，在pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同，可推想缓冲系统的组分对酶活性有影响。（4）由于酶分子体积小，简单从包埋材料中漏出，所以固定化酶时，一般不采纳包埋法。【点评】本题比较基础，考查蛋白质的提取和分别、固定化酶技术等相关学问，对于此类试题，须要考生留意的细微环节较多，照试验的原理、试验采纳的试剂及试剂的作用、试验操作步骤等，考生在平常的学习过程中应留意积累。3．（2024年全国统一高考生物试卷（新课标Ⅲ）·37）水果可以用来加工制作果汁、果酒和果醋等。回答下列问题：（1）制作果汁时，可以运用果胶酶、纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、________（答出2种即可）。纤维素酶可以分解植物______________（填细胞膜或细胞壁）中的纤维素。（2）用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，须要限制反应的温度，缘由是__________________。（3）现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶，某同学拟在果泥用量、温度、pH等全部条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的凹凸可用_____________来表示。（4）获得的果汁（如苹果汁）可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒须要__________________菌，这一过程中也须要O2，O2的作用是__________________。制作果醋须要醋酸菌，醋酸菌属于_____________（填好氧或厌氧）细菌。【答案】（1）果胶分解酶、果胶酯酶细胞壁（2）温度对果胶酶活性有影响，在最适温度下酶活性最高，出汁率最高（3）在肯定条件下，单位时间内、单位体积中反应物的消耗量或者产物的增加量（4）酵母促进有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧【解析】（1）果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。植物细胞壁由纤维素和果胶构成，故可用纤维素酶分解细胞壁。（2）酶发挥催化作用须要相宜的温度和pH条件，在最适温度下，果胶酶的活性最高，出汁率最高。（3）酶的活性是指酶催化肯定化学反应的实力，酶活性的凹凸可以用在肯定条件下，单位时间内、单位体积中反应物的消耗量或者产物的增加量来表示。（4）由分析可知，果酒的制作离不开酵母菌，在初期通入氧气，可以促进酵母菌的有氧呼吸，使其大量繁殖；醋酸菌是一种好氧细菌。【点评】本题考查果酒、果醋的制作和果胶酶的相关内容，要求考生识记制作果酒、果醋的原理，驾驭果汁生产中果胶酶的作用，并结合题干信息解题。1．红树莓果酒酿造的基本工艺流程为：破裂原料→酶解处理→发酵→后处理→成品。回答下列问题：（1）来自红树莓破裂细胞壁的果胶会造成原料液浑浊，所以在“酶解处理”环节须要加入果胶酶。某些微生物能够产生果胶酶，要筛选一株高产果胶酶的微生物，最佳菌体采样点应为_____________（填“红树莓果实”“红树莓果汁产品”或“红树莓果酒产品”）。要获得高产果胶酶微生物的单菌落，需配制的选择性固体培育基应包括水、磷酸氢二钾、硫酸镁、硝酸钠、刚果红，还须要_____________（填序号：A．牛肉膏B．蛋白陈C．果胶D．葡萄糖E．琼脂）。接种、培育一段时间后，选择____________的菌落作为高产果胶酶微生物的候选菌种。（2）写出从微生物中提取和分别果胶酶的基本步骤____________。（3）果胶酶是能够分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等，采纳凝胶电泳分别果胶酶中不同组分，是利用了各种酶分子____________的差异。（4）在反应体系中底物足量且处于最适温度和pH条件下，测定果胶酶活性须要在反应____________（填“初期”“中期”或“末期”）进行，主要缘由是____________。（5）工艺中“发酵”环节所用菌株为酵母菌，如图中____________号试管为酵母菌在半固体培育基中培育后状态。（6）工艺中“后处理”环节的一个重要工序是将酒样置于87℃保温30min，目的是____________。【答案】（1）红树莓果实CE具有透亮圈（2）原料处理→粗分别→纯化→纯度鉴定（3）分子本身大小、形态以及带电性质（4）中期中期时全部酶都与底物充分接触，化学反应速率稳定（5）2（6）杀死酵母菌，停止酒精发酵，同时防止发酵液中有机物的破坏和酒精的流失【解析】（1）找寻目的菌株时，要依据它对生存环境的要求，到相应的环境中区找寻。本题中须要筛选一株分解红树莓果实中果胶酶的微生物，最佳菌体采样点应为红树莓果实。该培育基为固体培育基，所以要加入凝固剂：琼脂。因为要筛选分解过胶的微生物，所以要以果胶作为唯一的碳源。因此，培育基中还需加入果胶和琼脂，而不能加入蛋白胨和牛肉膏。培育基中的刚果红可以与果胶结合生成红色复合物，但是不与果胶分解后的产物结合，接种一段时间后，假如微生物能产生分解果胶的酶，就会出现透亮圈，所以选择具有透亮圈的菌落。（2）从微生物中提取和分别果胶酶的基本步骤：原料处理→粗分别→纯化→纯度鉴定。（3）采纳凝胶电泳分别果胶酶中不同组分，在同一电场下，由于各种酶分子带电性质的差异以及分子本身大小、形态的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别。（4）在反应体系中底物足量且处于最适温度和pH条件下，测定果胶酶活性须要在反应中期进行，主要缘由是前期酶和底物接触不充分，化学反应速率慢；后期由于产物增多、积累，可能会影响酶促反应的进行；中期时全部酶都与底物充分接触，化学反应速率稳定。（5）工艺中“发酵”环节所用菌株为酵母菌，图中2号试管为酵母菌在半固体培育基中培育后状态，因为酵母菌为兼性厌氧菌，在有氧的条件下大量繁殖，在无氧的条件下进行酒精发酵，所以固体培育基与空气接触的部位分布了较多酵母菌，固体培育基底部和中部无氧的环境中也有酵母菌生活。（6）工艺中“后处理”环节的一个重要工序是将酒样置于87℃保温30min，目的是杀死酵母菌，停止酒精发酵；同时87℃的条件下可以防止有发酵液中机物的破坏和酒精流失（合理即可）。【点评】本题以红树莓果酒酿造为背景，综合考察了微生物的培育和分别、酶的分别和提纯。结合生活实际，联系应用所学学问是解决本题的关键。2．近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲解并描述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。依据相关学问，回答关于果酒、果醋和腐乳制作的相关问题。(1)醋酸杆菌属于________核生物，其细胞结构中________(填“含有”或“不含有”)线粒体。(2)在果酒制作中，温度是重要的限制条件，________左右的温度最适合酵母菌繁殖，酵母菌无氧呼吸产生的酒精可用________________溶液进行检验。(3)下图为腐乳制作的试验流程示意图：①图中A代表____________，毛霉菌在-20℃长期保存时，菌液中常须要加入肯定量的________(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。②配制卤汤中酒的含量一般限制在________左右，酒精含量过低，________________________，可能导致豆腐腐败。【答案】（1）原不含有（2）20℃(酸性)重铬酸钾（3）①加盐腌制甘油②12%不足以抑制微生物的生长【解析】(1)醋酸杆菌属于原核生物，其细胞结构中只有核糖体，不含有线粒体。(2)在果酒制作中，温度是重要的限制条件，20℃左右的温度最适合酵母菌繁殖；酒精可用重铬酸钾溶液进行检验，颜色由橙色变成灰绿色。(3)①腐乳制作的流程为：eq\x(\a\al(让豆腐上,长出毛霉))→eq\x(\a\al(加盐,腌制))→eq\x(\a\al(加卤汤,装瓶))→eq\x(\a\al(密封,腌制))，因此图中A代表加盐腌制，其主要目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时还能抑制微生物的生长，避开豆腐块腐败变质。毛霉菌在－20℃长期保存时，菌液中须要加入肯定量的甘油。②在配制卤汤中酒的含量一般限制在12%左右，酒精含量过高腐乳成熟时间将会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败。3．探讨人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌（目标菌），并对其进行探讨。回答下列问题：（1）在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以__________为唯一碳源的固体培育基上进行培育，除碳源外，该培育基还含有氨源、水、无机盐和___________。（2）进行微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是___________。（3）从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B和C三种菌落（如图1所示）。假如要得到淀粉酶活力最高的菌株，应当选择__________（填“A”、“B”或“C”）菌落进一步纯化。A菌落经检测其为硝化细菌，据此说明A菌落能在此培育基上生长且没有形成透亮圈的缘由是__________。（4）经筛选获得了一菌株，能同时产两种不同的淀粉酶X和Y，其相对分子量分别为45000和58000。采纳凝胶色谱法将这两种淀粉酶分别时，先洗脱出来的是淀粉酶__________（填“X”或“Y”），其缘由是___________。（5）在探讨过程中获得了三种淀粉酶，其酶活性与反应温度和pH值有关（如图2和图3所示），假如要选择一种耐酸耐高温的淀粉酶进行后续探讨，应当选择淀粉酶__________（填“甲”“乙”或“丙”），理由是__________。【答案】（1）淀粉琼脂（凝固剂）（2）稀释涂布平板法和平板划线法（3）B硝化细菌为自养菌，不能产生淀粉酶，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物（4）Y在凝胶色谱柱中，淀粉酶Y的相对分子质量大，不简单进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动的速度快，先洗脱出来（5）丙淀粉酶丙的最适温度最高，最适pH最低，且为酸性【解析】（1）分析题意可知，该试验目的是欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，故在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以淀粉为唯一碳源的固体培育基上进行培育，除碳源外，该培育基还含有氨源、水、无机盐和琼脂（凝固剂）。（2）进行微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。（3）分析题图可知，从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上B菌落的透亮圈最大说明B菌产生的淀粉酶活力最高，故应当选择B菌落进一步纯化。A菌落经检测其为硝化细菌，据此说明A菌落能在此培育基上生长且没有形成透亮圈，缘由是硝化细菌为自养型细菌，不能利用现成的淀粉，而能利用空气中的二氧化碳合成糖类等有机物。（4）凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质简单进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量大的蛋白质不简单进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分别，由于淀粉酶Y的相对分子量比X大，故采纳凝胶色谱法将这两种淀粉酶分别时，先洗脱出来的是淀粉酶Y。（5）分析题中曲线可知，三种淀粉酶中，丙的最适温度为70℃，比甲乙的最适温度高，最适pH是3，比甲乙的最适pH低，故要选择一种耐酸耐高温的淀粉酶进行后续探讨，应当选择淀粉酶丙。【点评】本题考查微生物的分别和培育、蛋白质的提取和分别的相关学问，意在考查考生对相关学问点的识记、理解和运用实力，把握学问间内在联系，构建学问网络。4．青蒿素是一种无色针状晶体，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，60℃以上易分解，主要从黄花蒿中提取。近年来又发觉青蒿素具有较强的抗肿瘤作用，某科研小组按如下步骤进行了相关试验：①从黄花蒿中提取青蒿素；②将等量癌细胞分别接种到4组培育瓶中，相宜条件下培育24h后除去上清液；③向4组培育瓶中分别加入等量含2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L青蒿素的培育液，相宜条件下接着培育；④72h后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。回答下列问题：(1)提取青蒿素时不宜运用水蒸气蒸馏法，缘由是____________________________；依据青蒿素____________________的特点，可采纳有机溶剂萃取的方法，现有四氯化碳(沸点76.5℃)和乙醚(沸点34.5℃)两种溶剂，应选用________作为萃取剂，不选用另外一种的理由是____________________________。(2)萃取青蒿素的过程应采纳________加热；加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置，目的是____________________。(3)科研小组进行上述②～④步骤试验的目的是_______________________。步骤③中须要设置比照组，比照组的处理方法为_______________________。【答案】(1)青蒿素不易挥发，不能随水蒸气蒸馏出来(或水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素不易挥发)易溶于有机溶剂乙醚青蒿素在60℃以上易分解，应选择低沸点的萃取剂(2)水浴防止有机溶剂挥发(3)探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系在另一培育瓶中加入等量的不含青蒿素的培育液，相宜条件下接着培育【解析】(1)水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素不易挥发，所以提取青蒿素时不宜运用水蒸气蒸馏法；依据青蒿素易溶于有机溶剂的特点，可采纳有机溶剂萃取的方法；依据题意可知，青蒿素在60℃以上易分解，因此应选择低沸点的乙醚作为萃取剂。(2)由于有机溶剂易燃，所以萃取青蒿素的过程应采纳水浴加热；为防止有机溶剂挥发，加热时可在加热瓶口安装回流冷凝装置。(3)上述②～④步骤试验的目的是探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系；步骤③中缺少空白比照组，须要设置一组加入等量的不含青蒿素的培育液，在相宜条件下接着培育从而确定青蒿素的作用。1．山楂酒具有活血、补气、健脾等功效，对复原体力、增加精力、促进食欲有较显著的功效。以下为山楂酒制作的有关过程。分析回答以下问题。主要原料山楂设备榨汁机、发酵桶、地下室、大锅等制作过程山楂经充分水洗，用榨汁机榨汁。将山楂汁倒入发酵桶中，经7～10d的发酵，即成果酒。将经过发酵的果酒滤出，倒入发酵容器内，储存在地下室里，进行30d的再发酵。并接着放置在阴凉的地下室进行陈酿，陈酿期间，要坚持倒桶(换桶)，并保持酒桶常满，即得原汁山楂酒。(1)请写出山楂酒制作的原理(用反应式表示)____________________。(2)与山楂酒发酵有关的微生物主要是________，在山楂酒制作中菌种的主要来源是____________________。(3)发酵的温度应当在________℃，在发酵过程中要先通气后密封，先通气的缘由是_________________________。(4)检验是否产生酒精可在________条件下，用____________试剂检测。(5)若要进一步制作果醋，应在发酵液中加入__________菌种。【答案】（1）C6H12O6eq\o(→,\s\up7())2C2H5OH＋2CO2酵母菌山楂果皮上的野生酵母菌18～25酵母菌在有氧条件下大量繁殖，增加菌种数量酸性重铬酸钾醋酸菌【解析】(1)山楂酒的制作须要微生物无氧呼吸产生酒精，反应式为C6H12O6eq\o(→,\s\up7())2C2H5OH＋2CO2。(2)与山楂酒发酵有关的微生物主要是酵母菌，菌种的主要来源是山楂果皮携带的野生的酵母菌。(3)20℃左右最适合酵母菌生长繁殖，所以发酵的温度应当在18～25℃，先通气后密封，缘由是酵母菌在有氧条件下大量繁殖，增加菌种数量。(4)酒精可使酸性的重铬酸钾试剂由橙色变为灰绿色。(5)果醋发酵的菌种为醋酸菌。2．微生物合成的油脂是制备生物柴油的新型原料。图为产油脂芽孢杆菌筛选的流程，其中B平板上的5个菌落是初筛得到的芽孢杆菌，C为B平板上菌落的原位影印，利用苏丹黑B可使脂类物质呈黑色的特性，对C进行染色，得到结果D。回答下列问题：（1）图中对土壤菌液进行系列梯度稀释的目的是_________。（2）若要使菌落能在A平板上生长，下列培育基组分中最合理的是__________（填“甲”“乙”“丙”），缘由是___________。表2培育基组分：甲葡萄糖、牛肉膏、蛋白脉、NaCl、琼脂、水乙葡萄糖、蔗糖、NaCl、琼脂、水丙葡萄糖、牛肉膏、NaCl、蔗糖、水（3）培育基配制完成后须要马上进行灭菌，常用的灭菌方法为___________。（4）依据D的染色结果，可推断B平板中的___________（填图中数字）是产油脂芽孢杆菌的菌落。（5）将B平板中的产油脂芽孢杆菌的单菌落进一步纯化培育得到E。将E中的菌落接种到试管F的固体斜面培育基上，经培育后放入4℃冰箱中临时保藏，以后每3-6个月须要转接一次。这种方法不适合长期保藏菌种的缘由是___________。如需长期保存可采纳___________的方法。【答案】（1）土壤菌数量较多，菌液浓度较大，如干脆接种，菌落密集，在固体培育基表面无法形成单个菌落（2）甲培育基甲含有碳源、氮源、水、无机盐这几类养分物质，且加入了琼脂作为凝固剂，可以达到试验效果（3）高压蒸汽灭菌法（4）3（5）菌种简单污染或产生变异甘油管藏【解析】（1）因土壤菌数量较多，菌液浓度较大，如干脆接种，菌落密集，在固体培育基表面无法形成单个菌落，所以要对土壤菌液进行系列梯度稀释。（2）蛋白胨供应的主要养分是氮源和维生素。培育基甲含有碳源、氮源、水、无机盐这几类养分物质，且加入了琼脂作为凝固剂，可以达到试验效果；培育基乙不含蛋白胨（氮源），不合理；培育基丙不含凝固剂（琼脂），无法形成固体培育基，无法在培育基表面形成菌落。（3）培育基配制完成后须要马上进行灭菌，常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。（4）苏丹黑B将脂类染成黑色，而C又是B平板上菌落的原位影印，比照试验结果可知，平板B中的3是产油脂芽孢杆菌的菌落。（5）该种低温临时保藏菌种的方法，简单污染或产生变异，如需长期保存，可在温度为-20℃下采纳甘油管藏的方法。【点评】本题考查无菌操作技术、培育基、菌落的培育及筛选的相关学问。关键要求考生驾驭试验的原理及基本试验操作技能。3．腐乳是我国传统的发酵豆制品，已有近千年的历史。腐乳的生产过程一般分为前酵期（培菌）和后酵期（装瓶后常温条件下放置，自然发酵3个月），采集各时段腐乳坯样品，测定相关物质含量如图1所示。回答下列问题：（1）毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透亮圈，将三种纯化的毛霉菌种接种在酪蛋白培育基中得到三种单菌落甲、乙、丙，其菌落直径平均值分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm，菌落与透亮圈一起的直径平均值分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落____________（填“甲”、“乙”或“丙”）作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。（2）装瓶腌制腐乳时，在接近瓶口的表面要将盐铺厚一点，缘由是。卤水中的香辛料和料酒（食用酒）的作用是_________________________。（3）据图1分析从“白块”到“晾晒2d”，腐乳坯中游离氨基酸含量改变的最主要缘由是______________________________________；加盐腌制(腌坯)之后，腐乳坯中的游离氨基酸含量下降的缘由___________________________________________（答出两点）。请预料后酵期发酵瓶中的游离氨基酸的改变是___________。【答案】（1）乙（1分）（2）瓶口处被杂菌污染的可能性较大，加多点盐可以有效抑制微生物的生长抑菌防腐和调味（3）毛霉等微生物产生的蛋白酶将蛋白质分解成氨基酸，使氨基酸含量增加食盐使毛霉的酶活性降低；加盐使豆腐中的水分析出，部分氨基酸随之析出（2分）增加4．2024年世界性的新型冠状病毒肺炎大流行，为了能更好地对病毒绽开相关探讨，科学家须要分别和培育病毒。如图是其流程示意图：（1）将采集到的病毒样本进行稀释，如图所示，用____________________吸取100μL的病毒样本，注入到①中，使样本与稀释液充分混匀，依次操作后，④号试管中病毒浓度是样本的____________________倍。（2）分别病毒标本须要无菌操作的缘由____________________。是依据病毒的特征，培育体系A中必需含有____________________，病毒才能繁殖。（3）为鉴定B是目标病毒，需进行____________________检测或抗原抗体检测，两种检测的原理分别是____________________和____________________。（4）试验结束后，对全部废弃物必需进行____________处理。【答案】（1）移液管10−8（2）防止其它微生物对试验造成影响活细胞（3）核酸检测每一种生物的核酸都具有特异性，都有特定的核苷酸序列，都遵循碱基互补配对原则抗原、抗体的特异性结合（4）灭菌【解析】（1）识图分析可知，该图将采集到的病毒样本进行稀释操作，操作过程中利用移液管吸取100μL的病毒样本，注入到①中，使样本与稀释液充分混匀，每次操作后样本稀释了100倍，因此依次操作后，④号试管中病毒被稀释了108，因此病毒的浓度是样本的10−8倍。（2）进行微生物的培育过程中，做到无菌操作是培育的关键。因此为了防止其它微生物（杂菌）对试验造成的影响，分别病毒标本须要无菌操作。病毒全部营寄生生活，病毒必需在活的宿主细胞内才能进行表现诞生命活动，因此培育体系A中必需含有活的宿主细胞，病毒才能繁殖。（3）鉴定病毒可以采纳核酸检测法或抗原抗体检测，核酸检测的原理是每种生物的核酸都具有特异性的特点，且都遵循碱基互补配对原则，因此依据核酸中核苷酸特定的序列进行检测，抗原抗体检测法的原理是：依据抗体可以和抗原进行识别并发生特异性结合的原理。（4）试验结束后，对全部废弃物必需进行灭菌处理，防止病毒带出试验室对生物以及人类健康等造成影响。【点评】本题以新型冠状病毒为背景，考查微生物的分别和培育的过程，要求学生驾驭稀释涂布平板法的操作过程和留意事项，把握微生物培育过程中操作的要点和目的，理解病毒的特点和鉴定的方法及原理，识记灭菌的意义，能够结合题意和所学是学问点解决问题。5．植物芳香油气味芳香，自然的芳香可使人精神处于最舒适的状态。此外，植物芳香油还可预防传染病、对抗细菌、病毒、霉菌等。请回答下列问题：(1)植物芳香油是从植物中提取的特有的芳香物质，提取时的原料可取自植物的______________________________(答出两种即可)，以及茎、地下茎、树干、树皮等器官，主要成分是萜类化合物及其衍生物。植物芳香油通常用________________________(答出两种即可)等方法提取。(2)玫瑰精油是高级香水的主要成分，因为其____________________________，故常采纳水蒸气蒸馏法提取，原理是利用________将其携带出来，形成油水混合物。此法在提取的过程中，对收集到的液体冷却后加入NaCl，其目的是____________________________。(3)对于植物中另一些有效成分，如胡萝卜素之类，可以依据其____________________的特点，采纳萃取法提取。萃取的效率主要取决于________________________。提取的胡萝卜素粗品可通过________法进行鉴定。【答案】（1）花、叶、根、果实、种子蒸馏、压榨、萃取化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏水蒸气促使油水混合物分层易溶于有机溶剂萃取剂的性质和运用量纸层析【解析】(1)提取植物芳香油的材料可以是植物的花、叶、根、果实、种子等，常用的植物芳香油提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。(2