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双重荧光标记的多重连接探针扩增技术的建立及在SCA基因诊断中的应用的任务书任务书一、题目双重荧光标记的多重连接探针扩增技术的建立及在SCA基因诊断中的应用。二、任务背景及意义自20世纪90年代以来，分子生物学技术的不断发展，使得基因检测成为一项日渐普及的临床检测手段。在临床常见病中，许多以基因突变为基础的疾病，如困扰人类社会的癌症、遗传性疾病、心血管病等，都可以通过基因检测获得更好的治疗和预后。而多重连接探针扩增技术（MMDP）是一种基于PCR技术的分子生物学方法，可以精确地检测SCA基因上的突变。多重连接探针扩增技术是一项新兴技术，其在基因检测和疾病诊断中都有重要的应用潜力。因此，研究多重连接探针扩增技术在SCA基因诊断中的应用，具有重要的理论和实践意义。三、主要研究内容1、多重连接探针扩增技术的建立：根据SCA基因序列，设计适合的多重连接探针，并考虑其双重荧光标记。通过实验优化反应条件，建立多重连接探针扩增技术并确定最佳反应条件。2、建立SCA基因突变检测方法：采用多重连接探针扩增技术，设计特定的引物和探针，利用PCR扩增出SCA基因，通过双重荧光标记，检测突变点。3、验证实验：收集SCA基因突变样本，利用建立的SCA基因突变检测方法进行验证，确定其检测准确性和灵敏度。4、应用研究：利用建立的SCA基因突变检测方法，对家族性SCA疾病进行诊断和预测，为临床和基因治疗提供科学依据。四、预期成果1、成功建立多重连接探针扩增技术，并确定最佳反应条件。2、建立SCA基因突变检测方法，并成功应用于家族性SCA疾病诊断和预测。3、论文发表一篇。五、研究计划第一年：多重连接探针扩增技术的建立1、收集SCA基因序列，分析其特点，设计多重连接探针。2、优化反应条件，建立多重连接探针扩增技术，确定最佳反应条件。3、对建立的多重连接探针扩增技术进行验证实验。第二年：SCA基因突变检测方法的建立和应用研究1、利用多重连接探针扩增技术和PCR技术，设计SCA基因特定引物和探针。2、建立SCA基因突变检测方法，并分析其检测准确性和灵敏度。3、利用建立的SCA基因突变检测方法，对家族性SCA疾病进行诊断和预测。第三年：论文撰写和项目总结1、撰写论文一篇，介绍研究背景、目的和意义，详细阐述研究过程、结果和发现。2、总结项目经验，提出研究中存在的问题和改进措施。3、对未来研究方向进行展望。六、参考文献1.罗珍，戴红民，MMDP技术的原理与现状。中华医学遗传学杂志，2006，23(5)。2.梁敏，范晓东，连丽明。双重标记多重连接探针扩增技术在BRCA1基因检测中应用的初步研究。实用医技杂志，2011，18（5）。3.ZhouX，BaoP，ShenL，etal.EstablishmentofanovelmultipleDNAmarker-labeledmultipleconnectionprobeamplification（MMDP）assay

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