吉林省延边州汪清县第六中学2025届高三生物第一学期期末检测模拟试题含解析

吉林省延边州汪清县第六中学2025届高三生物第一学期期末检测模拟试题注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．森林群落中由于老龄树木死亡造成林冠层出现空隙，称为林窗。研究者调查了某森林中林窗下与林下的土壤动物群落，得到如图所示的结果。据此可以推断出（）A．在各层次中林窗的土壤动物丰富度均高于林下B．林窗下和林下土壤动物种类均随深度的增加而增加C．光照只影响土壤动物群落的水平结构D．林窗下和林下不同层次的土壤动物种群密度相同2．下列关于植物激素调节说法正确的是（）A．从植物体内提取的乙烯可用于农业生产中促进果实发育B．两种激素之间既可能有协同关系也可能有拮抗关系C．植物激素从产生部位运输到作用部位是极性运输的过程D．植物激素是微量、高效的有机物，需通过体液运输3．生物学家提出了“线粒体是起源于好氧细菌”的假说。该假说认为，在进化过程中原始真核细胞吞噬了某种好氧细菌形成共生关系，最终被吞噬的好氧细菌演化成线粒体。下列多个事实中无法支持该假说的是（）A．哺乳动物细胞的核DNA由雌雄双亲提供，而线粒体DNA则主要来自雌性亲本B．线粒体外膜的成分与真核细胞的细胞膜相似，而内膜则同现存细菌的细胞膜相似C．高等植物细胞的核DNA与蛋白质结合呈线状，而线粒体DNA裸露且主要呈环状D．真核细胞中有功能不同的多种细胞器，而线粒体中仅存在与细菌中类似的核糖体4．离体培养的小鼠造血干细胞经紫外线诱变处理后对甘氨酸的吸收功能丧失，其它功能不受影响，且这种特性在细胞多次分裂后仍能保持。下列分析正确的是（）A．造血干细胞产生的这种变异是不可遗传变异B．细胞发生变异后合成蛋白质不再需要甘氨酸C．紫外线诱发了细胞中的ATP合成酶基因突变D．细胞膜上相应载体蛋白缺失或结构发生变化5．人体内有多种激素参与血糖的调节，比如胰岛素、胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺糖皮质激素等，这些激素中促进组织细胞加速摄取。利用和储存葡萄糖的只有胰岛素。下列相关叙述或推断合理的是（）A．肾上腺素和肾上腺糖皮质激素均可升高血糖B．糖尿病患者体内胰岛A细胞分泌的胰岛素较少C．正常人的血糖浓度不会超出2．8~2．2mg/dLD．人类患糖尿病的概率要比患低血糖的概率低6．下列有关科学方法应用的分析，错误的是（）A．用类比推理的方法证明基因在染色体上B．用荧光标记法知道基因在染色体上的位置C．用同位素标记法探明在分泌蛋白形成过程中依次经历了哪些细胞结构D．用模型建构法研究血糖平衡的调节机理二、综合题：本大题共4小题7．（9分）以下为I型超敏反应的基本过程：过敏原初次进人机体后，诱导机体产生的某类抗体在不结合过敏原的情况下，就可以结合到肥大细胞等细胞上，使之成为致敏肥大细胞。当相同的过敏原再次进人机体，使致敏肥大细胞合成及释放组织胺等物质。组织胺等物质与平滑肌等效应器官细胞膜上相应受体结合而引发过敏类疾病。据图分析回答：（1）图中的某细胞是指___________________________，其作用是___________________________。（2）以下细胞中，具有特异性识别功能的细胞有___________________________。A．某细胞B．T细胞C．B细胞D．浆细胞（3）由图可知，过敏反应中抗体的存在部位不同于正常体液免疫的是：________________。（4）简略分析防治过敏的基本思路：_______________（答出一点即可）。8．（10分）某二倍体雌雄异株植物(性别决定方式为XY型)的花色有白色、粉色、红色三种类型，受两对等位基因(B、b和D、d)控制，机制如下图所示。已知基因B、b位于常染色体上，为进一步探究其遗传规律，现用开白色花和粉色花的的植株进行正反交实验获得F1，让F1杂交获得F2，结果如下表所示。杂交类型子一代(F1)表现型子二代(F2)表现型正交红色花(♀)粉色花(♂)红色花：粉色花：白色花=3：3：1反交红色花(♀)红色花(♂)红色花：粉色花：白花色=3：1：1请回答下列问题：（1）该植物花色的表现过程，说明基因通过控制____________________实现对生物体性状的控制。（2）基因D、d位于______(填“X”或“常”)染色体上，该植物花色遗传遵循_______定律。（3）反交实验中，亲代的基因型是__________________________；让F2中开白色花的植株随机交配得F3，理论上F3中雌雄比例为_________，其中雌株的基因型及比例为________________。（4）选取正交实验F2的红色花植株随机交配，子代中红色花：粉色花：白色花=_______。9．（10分）1996年克隆羊“多莉”诞生以后，马、牛、兔、猫、狗、骆驼等哺乳类动物的体细胞克隆相继成功，但与人类相近的灵长类动物（如猴）的体细胞克隆一直未被攻克。2017年底两只体细胞克隆猴“中中”和“华华”先后在中国科学院神经科学研究所诞生，成功培育全球首个体细胞克隆猴。（1）用动物体细胞克隆动物，实际上是通过___________来实现的，该技术分为______________________和______________________，其中难度更大的是___________，原因是______________________，恢复其全能性十分困难。（2）体细胞克隆猴的诞生还需要___________技术和___________技术的支持。（3）体细胞克隆猴的重要意义在于，能够在一年内产生大批___________相同、可以模拟人类疾病的模型猴，将为人类疾病机理研究、干预、诊治带来光明前景。10．（10分）最新研究发现，烟草燃烧产生的烟碱（尼古丁）通过与突触前膜上的烟碱接受器结合，引起钙离子由通道流入突触小体，释放神经递质，引起人体暂时兴奋。此外，吸烟者患Ⅱ型糖尿病的风险较高。请分析回答：（1）尼古丁接受器的化学本质是_________________，突触后膜兴奋时神经细胞膜外的电位变化是__________________________。（2）烟草中的烟碱会增加细胞微粒体酶活性，从而加速甲状腺激素的降解。吸烟会导致甲状腺肿大的发生，请解释原因____________________________________________________。（3）Ⅱ型糖尿病唐者体内的胰岛素浓度比正常人多，但胰岛素的作用效果较差。请推测Ⅱ型糖尿病患病机理__________________________。Ⅱ型糖尿病患者体内抗利尿激素的分泌量与正常人相比会___________，判断依据是________________________________。11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、A【解析】

分析柱形图：随着枯落物层的深度的增加，土壤动物种类数逐渐减少，但林窗和林下不同层次的土壤动物种群密度不相同，在各层次中林窗的土壤动物丰富度均高于林下。【详解】A、由图可知，在各层次中林窗的土壤动物丰富度均高于林下，A正确；B、由图可知，林窗和林下土壤动物种类随深度的增加而减少，B错误；C、随着枯落物层的深度的增加，土壤动物种类数逐渐减少，由此可知光照明显影响了土壤动物群落的垂直结构，C错误；D、由图可知，林窗和林下不同层次的土壤动物种群密度各不相同，D错误。故选A。2、B【解析】

植物激素是由植物自身代谢产生的一类有机物质，并自产生部位移动到作用部位，在极低浓度下就有明显的生理效应的微量物质，也被称为植物天然激素或植物内源激素。【详解】A、植物激素是微量高效的有机物，从植物体内提取的乙烯量少，不能可用于农业生产中，并且乙烯是促进果实的成熟，A错误；B、细胞分裂素和生长素在顶端优势方面，高浓度生长素使植物具有顶端优势，细胞分裂素解除顶端优势，两者属于拮抗关系；然而在促进果实生长方面，两者是协同关系，故两种激素之间既可能有协同关系也可能有拮抗关系，B正确；C、生长素由幼嫩组织运输到作用部位，存在极性运输，其他植物激素无极性运输，C错误；D、植物无体液，不能通过体液运输，D错误。故选B。3、A【解析】

1、线粒体：真核细胞主要细胞器（动植物都有），机能旺盛的含量多。呈粒状、棒状，具有双膜结构，内膜向内突起形成“嵴”，内膜和基质中有与有氧呼吸有关的酶，是有氧呼吸第二、三阶段的场所，生命体95%的能量来自线粒体，又叫“动力工厂”。含少量的DNA、RNA。2、真核细胞和原核细胞的比较比较项目原核细胞真核细胞大小较小较大主要区别无以核膜为界限的细胞核，有拟核有以核膜为界限的细胞核细胞壁有，主要成分是糖类和蛋白质植物细胞有，主要成分是纤维素和果胶；动物细胞无；真菌细胞有，主要成分为多糖生物膜系统无生物膜系统有生物膜系统细胞质有核糖体，无其他细胞器有核糖体和其他细胞器DNA存在形式拟核中：大型环状、裸露；质粒中：小型环状、裸露细胞核中：和蛋白质形成染色体；细胞质中：在线粒体、叶绿体中裸露存在增殖方式二分裂无丝分裂、有丝分裂、减数分裂可遗传变异方式基因突变基因突变、基因重组、染色体变异【详解】A、哺乳动物细胞的核DNA由雌雄双亲提供，而线粒体DNA则主要来白雌性亲本，这与题干假说无关，A错误；B、线粒体外膜的成分与真核细胞的细胞膜相似，而内膜则同现存细菌的细胞膜相似，这支持题干假说，B正确；C、高等植物细胞的核DNA与蛋白质结合呈线状，而线粒体DNA裸露且主要呈环状，这与细菌拟核DNA相同，因此支持题干假说，C正确；D、真核细胞中有功能不同的多种细胞器，而线粒体中仅存在与细菌中类似的核糖体，这支持题干假说，D正确。故选A。【点睛】本题考查线粒体和原核细胞的相关知识，要求考生识记线粒体的结构，掌握线粒体与原核细胞的异同，最重要的是结合题干信息进行分析。4、D【解析】

造血干细胞吸收甘氨酸的过程属于主动运输过程，需要载体蛋白的协助，同时需要消耗能量；离体培养的造血干细胞，经紫外线诱变处理后，可能导致控制合成运输甘氨酸的载体的基因发生基因突变，对甘氨酸的吸收功能丧失。【详解】A、根据题干信息“这种特性在细胞多次分裂后仍能保持”，可知造血干细胞产生的这种变异是可遗传变异，A错误；B、细胞发生变异后合成蛋白质仍需要甘氨酸，B错误；C、由题意知，紫外线照射后，细胞仍能进行细胞分裂等耗能过程，因此细胞中催化ATP合成的相关酶系没有被破坏，C错误；D、紫外线照射后，对甘氨酸的吸收功能丧失，可能是控制合成运输甘氨酸的载体的基因发生基因突变，导致细胞膜上相应的载体蛋白缺失或结构发生变化，D正确。故选D。【点睛】本题旨在考查学生理解所学自身的要点，把握知识的内在联系，并运用相关知识对某些生物学问题进行解释、推理、判断、获取结论的能力。5、A【解析】

胰岛素是唯一能降低血糖的激素，其作用分为两个方面：促进血糖氧化分解、合成糖原、转化成非糖类物质；抑制肝糖原的分解和非糖类物质转化；升高血糖的是胰高血糖素和肾上腺素，只有促进效果没有抑制作用，即促进肝糖原的分解和非糖类物质转化。【详解】A、根据题干信息“促进组织细胞加速摄取、利用和储存葡萄糖的只有胰岛素”，说明只有胰岛素能降低血糖，其余激素都是升高血糖，A正确；B、胰岛A细胞分泌胰高血糖素，胰岛素由胰岛B细胞分泌，B错误；C、正常人的血糖在2.8~2.2mg/dL，但如果在特别饥饿或者吃了过多的糖，血糖浓度可能低于或者高于这个范围，C错误；D、题干和教材中没有信息可以比较人类患糖尿病和患低血糖的概率，D错误。故选A。【点睛】本题考查了血糖平衡的调节过程的有关内容，重点抓住胰岛素是唯一降血糖的激素，同时结合生活实际进行解答。6、A【解析】

假说-演绎法是在观察和分析的基础上提出问题，通过推理和想象提出解释问题的假说，根据假说演绎推理，再通过实验检验演绎推理的结论。类比推理法是通过对已知事物的特点和性质来推断或理解未知事物的特点和性质，从而达到认识新事物、解决新问题的目的。但是类比推理得出的结论并不是有逻辑的必然性，其正确与否还必须进行验证。模型构建是自然科学中的一种常用的方法。当研究对象难以直接操作或研究时，可以考虑使用模型构建的方法。该方法用模型来模拟研究对象，被模拟的对象称为原模。模型构建是否正确，还需要通过与原模的比较来验证。【详解】A、萨顿用类比推理的方法提出基因在染色体上，但类比推理得出的结论不具有逻辑的必然性，是摩尔根利用假说-演绎法证明了基因在染色体上，A错误；B、现代分子生物学技术用特定的分子与染色体上的某一个基因结合，这个分子又能被带有荧光标记的物质识别，通过荧光显示，就可以知道基因在染色体上的位置，B正确；C、科学家在豚鼠的胰腺腺泡细胞中注射3H标记的亮氨酸，发现了被标记的亮氨酸依次出现在附着有核糖体的内质网中、高尔基体中、靠近细胞膜内侧的运输蛋白质的囊泡中、以及释放到细胞外的分泌物中，由此探明分泌蛋白形成过程中依次经过了哪些细胞结构，C正确；D、研究血糖平衡调节机理的方法是模型建构法，D正确。故选A。二、综合题：本大题共4小题7、吞噬细胞摄取（吞噬）、处理并呈递抗原（或过教原）BC能吸附（结合）在肥大细胞表面避免（减少）接触过教原；抑制免疫活性物质的合成和释放；与免疫活性物质竞争效应器官细胞膜上相应受体的药物；服用抗组织胺的药物；改善效应器官反应性的药物等【解析】

过敏反应：（1）过敏反应是指已产生免疫的机体在再次接受相同抗原刺激时所发生的组织损伤或功能紊乱的反应。（2）过敏反应的原理：机体第一次接触过敏原时，机体会产生抗体，吸附在某些细胞的表面；当机体再次接触过敏原时，被抗体吸附的细胞会释放组织胺等物质，导致毛细血管扩张、血管通透增强、平滑肌收缩、腺体分泌增加等，进而引起过敏反应。（3）过敏反应的特点是发作迅速、反应强烈、消退较快；一般不会破坏组织细胞，也不会引起组织损伤，有明显的遗传倾向和个体差异。【详解】（1）根据图中的某细胞把过敏原呈递给T细胞可知该细胞是吞噬细胞，吞噬细胞的作用是摄取（吞噬）、处理并呈递抗原（或过教原）。（2）某细胞识别抗原没有特异性，T细胞和B细胞都能特异性识别抗原，浆细胞没有识别抗原的功能，故选BC。（3）右图可知，过敏反应产生的抗体能吸附（结合）在肥大细胞表面，而体液免疫产生的抗体主要分布在血浆中。（4）根据引起过敏反应的过敏原和过敏反应的作用机理，可通过以下途径进行过敏的防治，具体有：避免（减少）接触过教原；抑制免疫活性物质的合成和释放；与免疫活性物质竞争效应器官细胞膜上相应受体的药物；服用抗组织胺的药物；改善效应器官反应性的药物等。【点睛】本题主要考查考生识记过敏反应的概念及发生机理，识记体液免疫的过程，并结合题干和题图信息准确答题。8、酶的合成来控制代谢过程X基因的自由组合bbXDXDBBXdY4：3bbXDXD：bbXDXd=3：124：8：3【解析】

题意分析，根据正反交结果不同可知，基因D、d位于X染色体上，另一对基因位于常染色体上，故两对基因的遗传符合基因的自由组合定律，结合题意可知，红色花的基因型为B_

XD_、粉色花的基因型为B_

Xd_、白色花的基因型为bb_

_，据此答题。【详解】（1）由图示可知，该植物花色受两对等位基因的控制，两对基因分别通过控制酶的合成来间接的控制生物的性状。

（2）根据正反交的结果不同可知，基因D、d位于X染色体上，而基因B、b位于常染色体上，故该植物花色遗传遵循基因的自由组合定律。

（3）由于白色的基因型为bb_

_，粉花的基因型为B_

Xd_，而反交后代中均为红色花，故亲本为bbXDXD和BBXdY，则子一代为BbXDXd和BbXDY，理论上子二代中红色：粉色：白色=3：3：2

，其中开白色花的植株的基因型为bbXDXD：bbXDXd：bbXDY：bbXdY=1：

1：

1：1，而实际上子二代中，红色：粉色：白色=3：

1：

1，故推测隐性纯合子bbXdY致死，故子二代的白花植株中存活的个体有bbXDXD：bbXDXd：bbXDY=1：1：1，其中雌性个体产生的配子及比例为bXD：bXD=3：

1

，雄性个体产生的配子及比例为：

bXD：

bY=1：1，若让F2中开白色花的植株随机交配得F3，后代的基因型及比例为bbXDXD：bbXDXd：bbXDY：bbXdY（致死）=3：

1：3：

1，故雌雄比例为4：

3

，其中雌株的基因型及比例为bbXDXD：bbXDXd=3：

1。

（4）根据正交的后代中有粉色和红色可知，亲本的基因型为：

bbXDY和BBXdXd子代的基因型为BbXDXd和BbXdY，子二代的红花植株的基因型为B_

XDXd和B_XDY

，其中BB：

Bb=1：

2，红色花植株随机交配，后代中B_

：bb=8：

1，4理论上红色的比例为8/9×3/4=24/36，粉色花的比例为8/9×1/4=8/36；白色花的比例为1/9，白色花中bbXDXD：bbXDXd：bbXDY：bbXdY（致死）=1：

1：

1：1，故白色花的比例为1/9-1/9×1/4=3/36，故子代中红色花：粉色花：白色花=24：8：3。【点睛】熟知基因的自由组合定律是解答本题的关键！能够根据图中子代的表现型进行突破是解答本题的另一关键！9、核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植体细胞核移植动物体细胞分化程度高动物细胞培养胚胎移植遗传物质（或DNA，或基因）【解析】

动物体细胞核移植过程：动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。克隆分治疗性克隆和生殖性克隆。治疗性克隆指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植；生殖性克隆指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。【详解】（1）用动物体细胞克隆动物，实际上是通过核移植来实现的，该技术分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故其中体细胞核移植难度更大。（2）据分析可知，体细胞克隆猴的诞生还需要动物细胞培养技术和胚胎移植技术的支持。（3）核移植过程遗传物质没有发生改变，体细胞克隆猴的重要意义在于，能够在一年内产生大批遗传物质相同、可以模拟人类疾病的模型猴，将为人类疾病机理研究、干预、诊治带来光明前景。【点睛】本题考查克隆动物核移植相关过程和知识点，掌握相关知识结合题意答题。10、糖蛋白(蛋白质)由正变负甲状腺激素偏低，机体通过负反馈调节下丘脑和垂体的分泌，促甲状腺激素浓度增加，促使甲状腺增生肿大胰岛素受体被破坏或者被占据，导致胰岛素不能与胰岛素受体结合，机体血糖浓度升高，胰岛素分泌增加增加Ⅱ型糖尿病患者血液中含有较多葡萄糖，导致细胞外液渗透压增高，抗利尿激素的合成与分泌量增加【解析】

根据题干信息分析，烟碱（尼古丁）通过与突触前膜上的烟碱接受器结合，引起钙离子由通道流入突触小体，释放神经递质，神经递质释放到突触间隙后，与突触后膜上的特异性受体结合，导致人体暂时兴奋。Ⅱ型糖尿病患者的胰岛素水平较高，但是不能作用于胰岛素受体，导致胰岛素不能发挥作用而患糖尿病。【详解】（1）尼古丁接受器在突触前膜上，其本质是糖蛋白；动作电位表现为外负内正，静息电位表现为外正内负，因此突触后膜兴奋时神经细胞膜外的电位变化是由正变负。（2）烟草中的烟碱会增加细胞微粒体酶活性，从而加速甲状腺激素的降解，导致吸烟者的甲状腺激素偏低，机体通过负反馈调节下丘脑和垂体的分泌，促甲状腺激素浓度增加，促使甲状腺增生肿大。（3）根据题意分析，Ⅱ型糖尿病唐者体内的胰岛素浓度比正常人多，但胰岛素的作用效果较差，说明其胰岛素不能正常发挥作用，可能的原因是胰岛素受体被破坏或者被占据，导致胰岛素不能与胰岛素受体结合，机体血糖浓度升高，胰岛素分泌增加。Ⅱ型糖尿病患者血液中含有较多葡萄糖，导致细胞外液渗透压增高，因此其抗利尿激素的合成与分泌量会增加。【点睛】解答本题的关键是掌握兴奋的产生与传递、血糖平衡的调节等知识点，了解兴奋时发生的电位变化以及甲状腺激素的分级调节和负反馈调节的过程，弄清楚糖尿病的发病机理等，进而结合题干要求分析答题。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常