2024年高考生物考点突破训练酶的研究和应用及DNA和蛋白质技术含解析新版新人教版

酶的探讨和应用及DNA和蛋白质技术1．某些蛋白酶在生产和运用前须要测定酶活性。下图表示科研人员选用酪蛋白对多种蛋白酶的活性进行测定的试验结果（注：试验在30℃、pH=9.0的条件下进行），下列分析错误的是（）A．在上述试验条件下，蛋白酶K和α-胰凝乳蛋白酶的活性最高B．在试验过程中，部分菠萝蛋白酶和胰蛋白酶可能失活C．这几种蛋白酶均能分解酪蛋白，说明这些酶不具有专一性D．可用盐析的方法从各种蛋白酶的提取液中沉淀出蛋白酶【答案】C【解析】在题中所给试验条件下，蛋白酶K和α-胰凝乳蛋白酶的活性最高，A项正确；该试验是在pH=9.0的条件下进行的，pH较高，木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和胰蛋白酶在试验中的活性较低，部分酶可能失活，B正确；酶的专一性是指一种酶能催化一种或一类化学反应，酪蛋白酶的化学本质是蛋白质，因此不同蛋白酶都能分解酪蛋白，这能体现酶的专一性，C项错误；题中几种酶的化学本质都是蛋白质，能溶于盐溶液，因此，可用盐析的方法把这几种酶从各自的提取液中沉淀出来，D正确。2．下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是()A．从酶的固定方式看，物理吸附法比化学结合法对酶活性影响小B．固定化酶可以反复运用，反应产物对固定化酶的活性无影响C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶，可以反复运用D．固定化细胞含有多种酶，可以催化各种反应底物的一系列反应【答案】A【解析】化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确；固定化酶可以反复运用，但某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变更，从而变更酶的催化活性，B错误；尿糖试纸由于运用后不能将反应物和酶分开，故不能再次运用，C错误；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但假如反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，D错误。3．图是某试验小组利用A酶和B酶进行试验后绘制的曲线图。下列相关叙述正确的是()A．该试验的自变量是温度，因变量是酶活性B．酶活性可用底物的消耗量或产物的生成量来表示C．若要探究pH对酶活性的影响，应将温度限制在50℃左右D．80℃时A酶的空间结构完整，B酶的空间结构被破坏【答案】C【解析】分析题图可知，该试验的自变量是温度和酶的种类，因变量是酶活性，A错误；酶活性可用单位时间单位体积内底物的消耗量或产物的生成量来表示，B错误；若要探究pH对酶活性的影响，那么PH值为自变量，应将温度限制在最相宜，即50℃左右，C正确；在80℃高温条件下，A酶、B酶的空间结构均被破坏，D错误。4．酶的固定化是20世纪60年头快速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以探讨固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。如图甲、乙、丙为部分探讨结果。下列有关叙述中，不正确的是（）A．由甲图可知，固定化酶比游离酶对温度变更适应性更强B．由乙图可知，浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好C．由丙图可知，固定化酶一般可重复运用3次，之后若接着运用则酶活力明显下降D．固定化酶的酶活力较高，主要缘由是增加了酶与底物的接触面积【答案】D【解析】由甲图可知，当温度变更时，游离酶的酶活力比固定化酶变更明显，说明固定化酶比游离酶对温度变更适应性更强，A正确；乙图曲线表明：浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好，此时的酶活力最高，B正确；丙图显示：固定化酶的活力随运用次数的增多而下降，且在运用3次以后，若接着运用则酶活力明显下降，C正确；固定化酶的优点是：不溶于水，易于产物分别，可反复运用，能连续化生产且稳定性好，D错误。5．下列有关利用海藻酸钠固定酵母细胞试验的叙述，错误的是A．干酵母加蒸馏水活化的时间不宜过长，以防止凝胶珠中酵母细胞代谢减弱B．在烧杯中完全溶化海藻酸钠后应倒入容量瓶中定容，以保证溶液浓度精确C．固定化酵母时注射器的推动速度不宜过快，以防止凝胶珠不呈球形D．固定好的凝胶珠应用蒸馏水冲洗2〜3次，以防止凝胶珠硬度过大影响物质交换【答案】B【解析】干酵母活化的时间大约为1小时，不宜过长，避开凝胶珠中酵母细胞代谢减弱，A正确；海藻酸钠在水中溶解速度很慢，须要用小火间断加热搅拌加速溶解，待冷却至室温后与酵母细胞混合即可，不须要定容，B错误；固定化酵母时，须要缓慢地将注射器中的溶液滴加到配置好的CaCl2溶液中形成凝胶珠，C正确；固定好的凝胶珠应用蒸馏水冲洗2〜3次，是为了洗去杂质和杂菌，防止凝胶珠污染导致硬化影响物质交换，D正确。6．制作葡萄酒时，在部分发酵液中加入果胶酶处理一段时间后，得到如下表所示结果，相关叙述错误的是()A．果酒制作时一般将温度限制在18～25℃B．葡萄酒的澄清度随果胶含量削减而下降C．果胶酶在酸性条件下仍具有催化活性D．Ⅰ组中还原糖含量高主要是因为有更多的多糖被分解【答案】B【解析】18-25℃是酵母菌生长和发酵的最适温度，A正确；果胶是果汁加工中影响出汁率和果汁澄清度的主要缘由，葡萄酒的澄清度随果胶含量削减而提高，B错误；果胶酶的活性受PH影响，最适作用PH:3.0，C正确；果胶是一类多糖的总称，I、II组作比照，I组加入了果胶酶，果胶含量低，还原糖含量高，II组位加入果胶酶，果胶含量高，还原糖含量低，D正确。7．某科研小组制备了海藻酸钠—活性炭固定化微球(含菌种Bbai－1)来降解原油，下表表示不同pH和盐度对游离菌和固定化微球降解原油的影响，以下叙述错误的是()A．该固定化技术兼具吸附法和包埋法的优点B．菌种Bbai－1经固定化后对环境的耐受性增加C．与游离菌相比，固定化菌的降解原油实力提高D．在pH＝8、盐度＝3%时，接种量越大降解率越高【答案】D【解析】海藻酸钠—活性炭固定化微球，海藻酸钠是包埋细胞的原料，活性炭吸附性强，故该固定化技术兼具吸附法和包埋法的优点，A正确；分析表格，随着PH、盐度的上升，同一条件下固定化菌的降解率均比游离菌降解率高，所以菌种Bbai－1经固定化后对环境的耐受性增加，B正确；分析表格，随着PH、盐度的上升，同一条件下固定化菌的降解率均比游离菌降解率高，C正确；在pH＝8、盐度＝3%时，固定化菌的降解率高，看不出接种量对降解率的影响，D错误。8．某小组为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组试验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他试验条件均相同，下表为试验记录。下列叙述错误的是（）A．本试验的自变量是洗衣粉中的酶B．甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有专一性C．甲组在洗衣粉中加入了蛋白酶；乙组在洗衣粉中加入了蛋白酶和脂肪酶D．添加蛋白酶的洗衣粉不相宜洗涤毛织品、蚕丝织品【答案】A【解析】由表格数据可知本试验的自变量是洗衣粉中的酶和水温，A错误；甲、乙组洗涤效果的差异，主要缘由是其中酶种类不同，说明酶具有专一性，B正确；甲组去除血渍所学的时间相对较短，说明甲组加入了蛋白酶，乙组去除血渍和油渍的时间都相对较短说明乙组加了蛋白酶和脂肪酶，C正确；添加蛋白酶的洗衣粉不相宜洗涤含蛋白质的毛织品、蚕丝织品，D正确。故选A。9．下列关于固定化酵母细胞制备过程的叙述，错误的是A．将干酵母与蒸馏水混合并搅拌，有利于酵母菌的活化B．配制海藻酸钠溶液时要进行小火或间断加热C．将溶化并冷却的海藻酸钠溶液干脆转移至注射器中D．将制备好的凝胶珠放入氯化钙溶液中浸泡半小时左右【答案】C【解析】干酵母与蒸馏水混合并搅拌，以利于酵母菌活化，A正确；配制海藻酸钠溶液时要用小火或间断加热的方法，防止焦糊，B正确；溶化好的海藻酸钠溶液需冷却后才能加入已活化的酵母细胞，再将混合液转移至注射器中，C错误；将与酵母菌混匀的海藻酸钠溶液注入CaCl2溶液中浸泡半小时左右，以形成球形或椭球形的凝胶珠，D正确。10．下面是利用苹果块固定乳酸菌进行的有关试验流程图，相关叙述错误的是A．将苹果切成小块可以增大相对表面积，有利于固定化乳酸菌与外界进行物质交换B．步骤③中用无菌水清洗的目的是洗去苹果块表面乳酸菌，使步骤④的结果更精确C．步骤④中设置的比照试验应是用等质量的苹果小块在相同条件下进行试验D．与传统运用海藻酸钠固定细胞相比，用苹果固定乳酸菌可以保证发酵食品的平安性【答案】C【解析】将苹果切成小块可以增大相对表面积，有利于固定化乳酸菌与外界进行物质交换，A正确；步骤③中用无菌水清洗的目的是洗去苹果块表面乳酸菌，使步骤④的结果更精确，B正确；步骤④中设置的比照试验应是用等量的乳酸菌在相同条件下进行试验，C错误；与传统运用海藻酸钠固定细胞相比，用苹果固定乳酸菌可以保证发酵食品的平安性，D正确。41强，衣服上的汗渍、血迹及人体排出的蛋白质、油渍遇到它，皆能水解而除去。下列衣料不能用加酶洗衣粉洗涤的是()①棉织品②羊毛织品③腈纶织品④蚕丝织品⑤涤纶织品⑥锦纶织品A．①②③ B．②④ C．③④⑤ D．③⑤⑥【答案】B【解析】加酶洗衣粉含有生物催化剂酶，可以催化蛋白质的分解反应，由题意可知这种加酶洗衣粉能分解蛋白质，凡由蛋白质组成的衣料皆不宜用加酶洗衣粉洗涤，②毛织品④蚕丝织品属于蛋白质，所以不能用加酶洗衣粉；棉织品为自然纤维，腈纶织品、涤纶织品、尼龙织品的主要成分是合成纤维，可用加酶洗衣粉洗；答案选D。12．下列对生物技术及应用的有关叙述，正确的是A．果胶酶和纤维素酶都不是单纯的一种酶，而是一类酶B．植物组织培育时须要对外植体和接种器材进行灭菌处理C．用PCR技术扩增DNA时须要在72℃以上的温度条件下进行D．DNA在常温下遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可用于鉴定DNA【答案】A【解析】果胶酶和纤维素酶都不是单纯的一种酶，而是一类酶，A正确；植物组织培育时须要对外植体和接种器材进行消毒处理，B错误；用PCR技术扩增DNA时须要在55℃以上的温度条件下进行，C错误；DNA在水浴条件下遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可用于鉴定DNA，D错误。13．下表是利用固定化a—淀粉酶进行酶解淀粉的试验，下列叙述错误的是A．预期丙组流出液中产物的纯度可能最高B．固定后的a—淀粉酶装入柱中后可以重复利用C．各组试验中淀粉溶液的浓度、pH、温度等都应当相同且相宜D．流出液产物的纯度只与固定化酶柱长度和淀粉溶液的流速有关【答案】D【解析】丙组固定化酶柱长度大，淀粉溶液流速慢，流出液中产物的纯度可能最高，A正确；固定后的a—淀粉酶装入柱中后可以重复利用，B正确；本试验的探讨目的是探究固定化酶柱长度和淀粉溶液流速对流出液产物的纯度的影响，各组试验中淀粉溶液的浓度、pH、温度等属于无关变量，应当相同且相宜，C正确，D错误。14．洗衣粉是生活的必需用品，某试验小组为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果,将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组试验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他试验条件均相同，下表为试验记录。下列叙述错误的是A．本试验的自变量是洗衣粉中的酶B．甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有专一性C．甲组在洗衣粉中加入了蛋白酶；乙组在洗衣粉中加入了蛋白酶和脂肪酶D．添加蛋白酶的洗衣粉不相宜洗涤毛织品、棉织品、蚕丝织品【答案】D【解析】甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，所以试验的自变量是洗衣粉中的酶，A正确；甲、乙组洗涤效果的差异，主要缘由是其中酶种类不同，说明酶具有专一性，B正确；依据表格数据分析，5种温度下，丙组清除血渍和油渍的时间最长，为比照组。甲组和乙组清除血渍和油渍的时间差不多，说明甲乙两组都含有蛋白酶，乙组清除油渍的时间短于甲组，说明乙组含有脂肪酶，C正确；毛织品、蚕丝织品的主要成分是蛋白质，不相宜用添加蛋白酶的洗衣粉洗涤，而棉织品的主要成分是纤维素，可以用添加蛋白酶的洗衣粉洗涤，D错误。15．下图1为固定化酵母细胞的部分操作，图2为其试验结果。针对图示的有关说法中，正确的是（）A．图1X溶液有利于凝胶珠的形成，用自来水配制即可B．图1中注射器距离X溶液液面的远近对凝胶珠的形态无影响C．图2中出现的试验结果最可能海藻酸钠溶液浓度过小所致D．变更图1中滴加溶液的速度也可能导致图2的结果【答案】D【解析】混合液加入CaCl2溶液进行固定化酵母细胞，CaCl2的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠，CaCl2溶液是用蒸馏水配制的，A错误；注射器距离X溶液液面的远近对凝胶珠的形态影响很大，B错误；海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色，C正确；滴加CaCl2溶液的速度太高，无法形成凝胶珠，D错误。16．随着酶工程的发展，酶还可用于疾病的诊断及检测，例如应用尿糖试纸检测糖尿病，检测的原理如下图所示。下列有关叙述不正确的是（）A．过程④为比色，若试纸呈深棕色，可推出此人尿液中含较多的葡萄糖B．科学家将上述两种酶固定在糖尿试纸上就可检测尿糖C．步骤③原子氧可以将某无色物质氧化成有色化合物D．为确诊是否患有糖尿病，还应检测空腹时血液中血糖的浓度【答案】B【解析】过程④为比色，若试纸呈深棕色，可推出此人尿液中含较多的葡萄糖，A正确；将上述两种酶和无色的化合物固定在纸条上，制成测试尿糖含量的酶试纸，B错误；步骤③原子氧可以将某无色物质氧化成有色化合物，依据葡萄糖含量的少或多而依次呈现出浅蓝、浅绿、棕或深棕色，C正确；尿液中含有葡萄糖，不肯定为患有糖尿病，如一次性吃糖过多，肾脏病变等，还应检测血液中胰岛素的含量，D正确。17．为达到试验目的，必需在酸性条件下进行的试验是（）A．DNA粗提取试验中利用冷酒精使鸡血细胞中的DNA析出B．动物细胞培育试验中利用盐酸进行解离使细胞分散开C．测定胃蛋白酶催化蛋白质水解的最适温度D．用酒精提取菠菜叶片中的光合色素【答案】C【解析】DNA粗提取试验中，利用冷酒精使鸡血细胞中的DNA析出不须要在酸性条件下进行，A错误；动物细胞培育过程中利用胰蛋白酶把细胞分散开，不能在酸性条件下进行，B错误；胃蛋白酶在酸性条件下才具有生物学活性，测定胃蛋白酶催化蛋白质水解的最适温度须要在酸性条件下进行，C正确；试验室可以用无水乙醇提取绿叶中的色素，不须要酸性环境，D错误。18．生物试验中通常利用生物学分别技术分别生物活性物质，下列应用错误的是（）A．应用纸层析法分别叶片中的各种色素B．利用电泳法分子质量不同的蛋白质分子C．利用差速离心法分别获得不同细胞器D．利用离心法分别噬菌体的DNA和蛋白质衣壳【答案】D【解析】叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，可以用纸层析法分别色素，A正确；利用电泳法可以分别质量不同的蛋白质分子，B正确；分别不同细胞器可以采纳差速离心法，C正确；干脆利用离心法不能分别出噬菌体的DNA和蛋白质衣壳，可以利用噬菌体侵染细菌的方法分别，D错误。19．关于DNA和血红蛋白的提取与分别试验的分析，正确的是()A．提取DNA或血红蛋白均可用猪的红细胞或鸡的红细胞B．提取细胞中的DNA和蛋白质均须要用蒸馏水涨破细胞C．通过用不同浓度NaCl溶液的反复溶解与析出DNA，可去除蛋白质D．在蛋白质提取和分别过程中，进行透析可去除溶液中的DNA【答案】C【解析】哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，不能提取DNA，故不能用猪的红细胞提取DNA，A错误；提取动物细胞中的DNA用蒸馏水涨破细胞，提取植物细胞中的DNA须要用研磨的方法破坏细胞，B错误；提取DNA时，可用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA，高浓度的盐溶液中溶解DNA，去掉不能溶解的杂质（如蛋白质），用低浓度的盐溶液使得DNA析出，去除溶解的杂质（如蛋白质），C正确；透析可用于去除小分子物质，不能去除大分子的DNA，D错误。20．下列有关电泳的叙述，不正确的是(

)A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B．待测样品中各种分子的形态、大小及带电性质的差异等会影响其在电泳中的迁移速度C．进行电泳时，带电粒子会向着与其所带电荷相同的电极移动D．常用的电泳方法是琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳【答案】C【解析】电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，A正确；电泳利用了待分别样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小、形态的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别，可见，待测样品中各种分子的形态、大小及带电性质的差异等会影响其在电泳中的迁移速度，B正确；进行电泳时，带电粒子会向着与其所带电荷相反的电极移动，C错误；常用的电泳方法是琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳，D正确。21．下列有关提取和分别猪血红蛋白的试验，叙述错误的是(

)A．用生理盐水洗涤红细胞，以防止红细胞裂开B．用蒸馏水和甲苯处理红细胞，使其释放出血红蛋白C．用生理盐水透析血红蛋白溶液，以保持血红蛋白活性D．用磷酸缓冲液洗脱，有利于血红蛋白在凝胶柱中移动【答案】C【解析】生理盐水的浓度与红细胞的细胞质的浓度相当，在生理盐水中，红细胞能维持正常的形态，因此用生理盐水洗涤红细胞，可以防止红细胞裂开，A正确；红细胞释放血红蛋白，需加入蒸馏水和40%的甲苯，再在磁力搅拌器上充分搅拌10min，在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞裂开，释放出血红蛋白，B正确；将盛有血红蛋白溶液的透析袋放入肯定浓度的磷酸缓冲液中透析，C错误；磷酸缓冲液可维持血红蛋白的正常特性，用磷酸缓冲液洗脱，有利于血红蛋白在凝胶柱中移动，D正确。22．推断从植物体榨出的黄色液体是否含有脂肪、酵母菌酒精发酵是否彻底、提取的DNA是否被DNA酶污染、酪蛋白是否充分水解成氨基酸，饮用水中是否含有大肠杆菌依次选择试剂（）①苏丹Ⅲ②苏丹Ⅳ③Ca（OH）2④斐林试剂⑤双缩脲试剂⑥二苯胺⑦伊红美蓝A．②④⑤⑤⑦ B．②④⑥⑤⑦ C．①④⑥⑤⑦ D．①③⑤⑥⑦【答案】A【解析】脂肪可用苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）鉴定，呈橘黄色（或红色），因此检测从植物体榨出的黄色液体是否含有脂肪，可选用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ，即①或②；酵母菌酒精发酵的底物是葡萄糖，属于还原糖，因此检测酵母菌酒精发酵是否彻底，可用本尼迪特试剂，即④；DNA酶能水解DNA，且DNA酶本身属于蛋白质，因此检测提取的DNA是否被DNA酶污染，可用双缩脲试剂检测其中是否含有DNA酶，即⑤；蛋白质可以用双缩脲试剂检测，因此检测酪蛋白是否充分水解成氨基酸，可选用双缩脲试剂，即⑤；饮用水中是否含有大肠杆菌，可以将饮用水接种到含伊红美蓝的培育基上，假如形成紫黑色的菌落，并带有金属光泽，可以用⑦伊红美蓝检测饮用水中是否含有大肠杆菌。综上所述，A正确，B、C、D错误。23．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验原理与方法的叙述，正确的是()A．向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水涨破，释放出其中的DNAB．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在氯化钠中的溶解度C．调整NaCl溶液浓度至0.14mol/L，过滤后取滤液进行后续步骤的操作D．加入冷却的酒精后用玻璃棒快速搅拌滤液会导致DNA获得量增加【答案】A【解析】向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水涨破，释放出其中的DNA，A正确；洗涤剂能瓦解细胞膜，但不能增加DNA在氯化钠中的溶解度，B错误；DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最大，调整NaCl溶液浓度至0.14mol/L，DNA析出，因此过滤后去除滤液进行后续步骤的操作，C错误；加入冷却的酒精后用玻璃棒缓慢沿一个方向搅拌滤液将白色的丝状物DNA卷起，D错误。24．关于血红蛋白的提取和分别试验，叙述正确的是A．血红蛋白的提取和分别一般分为四步：样品处理、粗分别、透析和纯度鉴定B．用生理盐水对红细胞反复洗涤、离心，目的是去除杂蛋白C．血红蛋白粗分别阶段透析的目的是除去小分子杂质，削减缓冲液用量效果会更好D．凝胶色谱法分别蛋白质时，相对分子质量小的蛋白质移动速度较快【答案】B【解析】血红蛋白的提取和分别一般分为：样品处理、粗分别、纯化和纯度鉴定四步，A错误；用生理盐水对红细胞反复洗涤、离心，目的是去除血浆中的杂蛋白，B正确；血红蛋白粗分别阶段透析的目的是除去小分子杂质，原理是依据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可以将分子量较小的杂质除去，C错误；凝胶色谱法分别蛋白质的原理是不同蛋白质的相对分子质量不同，在凝胶柱中移动的速度不同而分别开。相对分子质量小的蛋白质通过凝胶时进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，D错误．25．下列有关DNA粗提取与鉴定过程的叙述中，正确的是A．将猪的成熟红细胞置于清水中，红细胞涨破后将DNA释放出来B．用2mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后，须保留上清液C．在提取液中加入75%的冷冻酒精后蛋白质会与DNA分别并析出D．将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后溶液快速变为蓝色【答案】B【解析】猪为哺乳动物，其成熟红细胞不含细胞核和细胞器，不含DNA，A错误；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，氯化钠溶液为2mol/L时，DNA溶解度最大，所以用2mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后，须保留上清液，B正确；DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，在提取液中加入95%的冷冻酒精后蛋白质会与DNA分别并析出，C错误；需将提取的丝状物加入2mol/L的NaCl溶液中溶解，再加入二苯胺试剂，混匀后将试管置于沸水中水浴加热5min，指示剂将变蓝，D错误。26．下列有关DNA粗提取与鉴定试验，叙述正确的是（）A．酵母菌、菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取DNA的材料B．研磨植物组织时加入洗涤剂的作用是瓦解细胞壁C．0.14moI/L的NaCl溶液能充分溶解DNAD．试验中提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点【答案】D【解析】猪的成熟红细胞无细胞器和细胞核，不能作为提取DNA的材料，A错误；研磨植物组织时加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜，B错误；0.14moI/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小，C错误；将处理后的溶液过滤，加入体积分数95%的酒精处理一段时间后，会出现白色絮状物，即DNA，该过程利用了DNA不溶于酒精的特点，D正确。27．下列有关生物学试验中颜色反应的叙述，错误的是A．在酸性条件下，橙色重铬酸钾溶液与酒精反应呈现灰绿色B．在溶解有DNA的溶液中加入二苯胺试剂，加热后溶液变蓝C．细菌分解尿素使培育基的pH上升，加入酚红指示剂后变红D．刚果红与纤维素分解后的纤维二糖结合，形成红色复合物【答案】D【解析】在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，A正确；在溶解有DNA的氯化钠溶液中加二苯胺试剂，水浴加热后出现蓝色，B正确；细菌分解尿素后，会使培育基的碱性增加，使得加入的酚红指示剂变红，C正确；刚果红可以与纤维素形成红色复合物，D错误。28．如图为“DNA的粗提取与鉴定”试验过程的部分操作示意图。有关叙述正确的是A．正确的操作依次是C→B→D→E→AB．步骤A中加入酒精是为了去除DNA中的杂质蛋白C．步骤C中可以用猪血细胞或猕猴桃细胞代替D．步骤E中加入蒸馏水的量与DNA析出的量成正相关【答案】B【解析】DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水，裂开细胞→过滤，获得含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定。所以正确的操作依次是C→B→E→D→A，A错误；DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步骤中加入酒精是为了除去溶于酒精的杂蛋白，提取含杂质较少（或较纯净）的DNA，B正确；猪血中的红细胞不含DNA，不能用于DNA的粗提取与鉴定，C错误；步骤E中加蒸馏水的目的是使NaCl溶液的浓度降低，析出DNA，随加入蒸馏水的量增加，DNA析出的量先增加后削减，D错误。29．下图为几种蛋白质通过SDS—聚丙烯酞胺凝胶电泳后的图谱，据图分析，相对分子质量最大的蛋白质以及用凝胶色谱法分别它们时最终流出的蛋白质依次是A．γ球蛋白，清蛋白B．γ球蛋白，γ球蛋白C．清蛋白，清蛋白D．清蛋白，γ球蛋白【答案】A【解析】图为SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱，γ球蛋白离样品处最近，说明质量最大，清蛋白离样品处最远，分子质量最小；在凝胶色谱法中分子质量小的蛋白质简洁进入凝胶颗粒内部的通道，路程长，移动速度慢；而分子量大的蛋白质无法进入凝胶颗粒内部，路程较短，移动速度快，最终流出的蛋白质应当是分子量最小的清蛋白。通过分析可知，相对分子质量最大的蛋白质是γ球蛋白；用凝胶色谱法分别它们时最终流出的蛋白质是清蛋白，综上所述A正确。30．将经处理裂开后的红细胞混合液以2000

r/min的速度离心10min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的依次依次是(

)A．血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层B．甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层C．脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D．甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层【答案】D【解析】混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的依次依次是：第一层为无色透亮的甲苯层；其次层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第三层为红色透亮液体，这是血红蛋白的水溶液；第四层为暗红色沉淀物，主要是红细胞裂开物沉淀。故选D。二、非选择题1．固定化酵母细胞发酵生产啤酒是当前啤酒生产的重大改革和发展方向。固定化细胞具有操作简洁、对酶活性影响小、可催化一系列反应、简洁回收的特点；同时可实现连续化生产，提高产品的转化率。回答下列问题：（1）发酵时如用大麦作原料，可用______________________（填激素名称）处理大麦，这样可以使大麦种子无需发芽就能将淀粉转变成麦芽糖等物质，生产用的培育液pH应为___________性，大麦在培育过程中的作用是______________________。（2）用包埋法固定酵母菌前，要将酵母菌进行___________________处理。在工业生产上，细胞的固定化是在______________________条件下进行的，这样才能反复运用固定化的酵母细胞。（3）将制好的凝胶珠放于培育液中，在___________（温度）下进行啤酒的生产。（4）如在试验室检验固定化酵母细胞的发酵效果，经恒温培育后可用______________________（填两种）等方法来测定是否有酒精产生；若要测定发酵过程中溶液的活菌数，可用的接种方法是___________。【答案】赤霉素酸为酵母菌供应养分物质活化严格无菌18—25℃（酸性）重铬酸钾检验、嗅味稀释涂布平板法【解析】（1）发酵是用大麦作为原料为酵母菌供应养分物质，主要是利用大麦作为碳源，大麦种子中的淀粉需在淀粉酶的作用下转变成麦芽糖和葡萄糖酵母菌利用，赤霉素能促进未发芽的种子中形成淀粉酶。酿酒应在酸性培育液及无氧条件下进行。（2）固定酵母菌前，须要用蒸馏水处理使酵母菌活化。要是固定化的酵母细胞反复运用，细胞的固定化必需在严格无菌的条件下进行。（3）18-25℃是酵母菌发酵的最佳温度。（4）是否产生酒精可以看出固定化的酵母菌是否正常进行发酵，检测酒精可用酸性重铬酸钾，也可以用简洁的嗅味等方法来检验。可以用稀释涂布平板法测定发酵过程中溶液的活菌数。为了保证结果精确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。2．为获得果胶酶，科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分别、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的应用试验。（1）为分别果胶酶产生的某种霉菌，科研人员配制了如表所示成分的培育基，该表中应加入的成分a是______，该成分在培育基中的作用为______；在各种成分溶解配制好后应将pH调到______，再进行高压蒸汽灭菌。成分K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4a琼脂蒸馏水质量0.1g0.5g3g0.01g2g15g加至1L（2）将获得的菌株进行扩大培育后，再用______（工具）从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性，可先将等量的果胶酶和果胶混合处理相宜时间，再加入等量的______，最终依据沉淀物的生成量来推断。（3）在果汁和果酒制作过程中，常用果胶酶处理来提高相应产品的______；生产上通过明胶、海藻酸钠（包埋剂）或戊二醛（交联剂）等对果胶酶进行______处理，以削减酶的运用量，降低生产成本。【答案】果胶作为霉菌的碳源，起筛选菌种的作用中性偏酸G6玻璃砂漏斗95%乙醇出汁率和澄清度固定化【解析】（1）要分别能产生果胶酶的微生物，应当用以果胶为唯一碳源的培育基，因此该表中应加入的成分a是果胶；该成分在培育基中的作用为作为霉菌的碳源，起筛选菌种的作用；培育霉菌时需将培育基的pH调至中性偏酸性。（2）将获得的菌株进行扩大培育后，再用G6玻璃砂漏斗从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性，可先将等量的果胶酶和果胶混合处理相宜时间，再加入等量的95%乙醇，最终依据沉淀物的生成量来推断。（3）果胶酶可以分解植物细胞壁中的果胶，因此在果汁和果酒制作过程中，常用果胶酶处理来提高相应产品的出汁率和澄清度；生产上通过明胶、海藻酸钠（包埋剂）或戊二醛（交联剂）等对果胶酶进行固定化处理，固定化酶的运用可以使酶和底物分别，使酶重复利用，削减酶的运用量，降低生产成本。3．在现代食品工业中，固定化细胞技术可以节约成本，实现连续生产，因此得到广泛的应用。固定化细胞已可以用于酸奶的制作过程，下图为乳酸菌固定化的工艺流程。请回答下列有关问题：(1)将保存的菌种接种到脱脂乳培育液中培育，然后再扩培、离心、用灭菌水稀释，这一过程称为乳酸杆菌的_____。(2)流程图中，①为包埋细胞时所用的载体，常用的有______(答出两种）。②表示的操作处理为______，这样才能使放入包埋液体中的菌种保持活性。③代表的化学试剂为___________。要达到反复利用固定化细胞的目的，固定化过程必需在______的条件下进行。(3)探讨小组探究了固定化乳酸杆菌对产酸的影响，下面是固定化菌株与游离菌株发酵结果比较表：由表中数据可以得到的结论是:加大固定菌的接种量对酸度影响不明显，但与游离菌比，乳酸杆菌经固定后产酸实力____;随着发酵时间的延长，固定化乳酸杆菌的活力保持大于游离菌，给人们的启示是固定化的菌种可____，从而降低生产成本。发酵进行到肯定时间后，游离乳酸杆菌的活力降低，缘由可能是________。【答案】活化海藻酸钠、明胶、琼脂糖、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺冷却CaCl2严格无菌提高连续运用游离乳酸菌干脆与发酵液接触，受乳酸导致的pH变更的影响，活力降低【解析】（1）制备固定化细胞之前，须要对菌种进行活化。（2）包埋法包埋细胞时，要将微生物匀称地包埋在不溶于水的多孔性载体中。常用的载体有海藻酸钠、明胶、琼脂糖、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺。溶化好的海藻酸钠要冷却至室温后才能加入已活化的乳酸杆菌，否则高温会导致乳酸杆菌失活。将海藻酸钠等载体与乳酸杆菌的混合液滴加到配制好的CaCl2溶液中才能形成凝胶珠。要达到反复利用固定化细胞的目的，就须要避开其他微生物的污染，所以在工业生产中，固定化过程必需在严格无菌的条件下进行。（3）从表中可以看出，与游离乳酸杆菌相比，乳酸杆菌经固定后发酵过程中酸度增加更明显，说明产酸实力提高。在发酵的初期，固定菌和游离菌并没有太大区分，发酵24小时以后，才起先出现明显差距，72小时后差距更大，说明固定化的细胞始终保持较高活力，这一特性可应用于酸奶的连续发酵，使菌种多次重复利用。由于游离乳酸菌干脆与发酵液接触，所以简洁受到乳酸导致的pH变更的影响，而乳酸杆菌被载体固定后，可降低这种影响。4．某生物爱好小组在学习了生物技术实践的相关学问后，欲利用一些试验装置来进行相关试验。请回答下列问题：（1）该小组欲了解固定化酶与固定化细胞的技术。①制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是____________。②制备固定化酵母细胞时，充分混合匀称的酵母细胞溶液可在饱和____________溶液中形成凝胶珠。部分同学试验制得的凝胶珠不是圆形或椭圆形，其主要缘由是____________。（2）在利用葡萄酒制作葡萄醋时，除限制好温度等条件外，还要留意限制气体条件，因为醋酸菌是____________（填“好氧”、“厌氧”或“兼性厌氧”）型细菌。（3）该小组欲用甲、乙装置进行血红蛋白的提取和分别：①为了提取和分别血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应运用生理盐水而不运用蒸馏水的缘由是____________。②甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是____________；乙装置中，C溶液的作用是____________。③用乙装置分别血红蛋白时，待____________时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。【答案】海藻酸钠CaCl2海藻酸钠浓度过高（或针筒离液面过近，高度不够）好氧防止红细胞吸水裂开磷酸缓冲液（透析液）洗脱血红蛋白红色的蛋白质接近色谱柱底端【解析】（1）①固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将细胞固定在肯定空间内的技术，制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是海藻酸钠；②制备固定化酵母细胞时，充分混合匀称的酵母细胞溶液可在饱和CaCl2溶液中形成凝胶珠；若部分同学运用的海藻酸钠浓度过高或操作时针筒离液面过近，高度不够，试验制得的凝胶珠则不是圆形或椭圆形。（2）醋酸菌是好氧型细菌，故在利用葡萄酒制作葡萄醋时，除限制好温度等条件外，还要留意限制气体条件，应始终通气或通入无菌空气。（3）①为了提取和分别血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，生理盐水能维持细胞的形态，防止红细胞吸水裂开，故洗涤时应运用生理盐水而不运用蒸馏水。②甲装置中，B是血红蛋白溶液，磷酸缓冲液能让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能，故A是磷酸缓冲液（透析液）；乙装置为血红蛋白的分别装置，装置中C溶液的作用是洗脱血红蛋白。③用乙装置分别血红蛋白时，血红蛋白为红色，故待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。5．《舌尖上的中国》是中心电视台播放的美食记录片，在本片中中国美食更多的将以轻松快捷的叙述节奏和精致细腻的画面，向观众，尤其是海外观众展示中国的日常饮食流变，中国人在饮食中积累的丰富阅历，千差万别的饮食习惯和独特的味觉审美，以及上升到生存才智层面的东方生活价值观。依据所学学问回答有关生物技术实践的问题：(1)苹果醋是一种特别受欢迎的饮料，它的制作是利用醋酸菌在______________条件下将糖分解成醋酸；若糖不足时也可将乙醇变为_______，再将其变为醋酸。(2)腐乳在美食中具有及其独特的风味，它的制作是利用__________等微生物的发酵，在制作过程中为调整香味加入了香辛料，其作用还有______________。(3)如今微生物在食品制作过程中发挥着重要作用，为了保证产品的质量，在工厂生产中都运用纯化后的微生物，常见的分别纯化方法有____________、___________________。(4)几乎每人都酷爱美食，但美食带来的污渍却苦恼颇多，不同的污渍我们须要选择不同的加酶洗衣服，若要将血渍、奶渍洗净，最好选用加_____________的洗衣粉。从环境角度和洗涤效果上分析加酶洗衣粉比一般洗衣粉更具优势的缘由：___________________________。【答案】有氧乙醛毛霉防腐杀菌平板划线法稀释涂布法（碱性）蛋白酶加酶洗衣粉含磷少，对环境污染小；洗涤效果具有针对性，去污实力更强【解析】(1)醋酸菌是一种好氧细菌，当氧气、糖源都足够时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再进一步转变为醋酸。(2)参加腐乳制作的微生物主要是毛霉；腐乳制作过程中加入香辛料除调整香味外，还能防腐杀菌。(3)分别该微生物时，在固定培育基上接种该微生物的常用方法有稀释涂布平板法和平板划线法。(4)加酶洗衣粉对奶渍有较强的去污力，说明加酶洗衣粉中有蛋白酶。若要将血渍、奶渍洗净，最好选用加（碱性）蛋白酶的洗衣粉。从环境角度和洗涤效果上分析加酶洗衣粉比一般洗衣粉更具优势的缘由是加酶洗衣粉含磷少，对环境污染小；洗涤效果具有针对性，去污实力更强。6．回答与淀粉酶有关的问题(1)与用葡萄酿酒相比，利用大米酿酒，需增加____________的过程。为筛选胞外淀粉酶分泌型菌种，一般可从_______________(填“果圆树下”、“米酒厂四周”或“枯树四周”)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含淀粉的选培育基上培育，一段时间后在培育基表面滴加碘液，可在某些菌落四周视察到透亮的水解圏，从培育基上选择若干个____________比值大的菌落作为酶活性较高的菌种。(2)从上述菌种获得的纯化后的淀粉酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越___________。(3)如想让淀粉酶能反复利用，宜采纳化学结合法进行固定化，可通过检测固定化淀粉酶________确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括_________、_________、离子吸附法及交联法等。(4)一般酵母菌干脆利用淀粉的实力很弱，现通过基因工程方法得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。以淀粉为原料，用工程酵母菌和一般酵母菌在相同的相宜条件下密闭发酵一段时同后，接种_______菌的发酵罐须要先排气，其缘由是_______。【答案】淀粉水解成葡萄糖（糖化）米酒厂四周水解圈直径与菌落直径小（酶）活性[或（酶）活力]包埋法物理吸附法工程酵母工程酵母菌利用淀粉实力更强，产生CO2速率更快【解析】（1）大米的主要成分是淀粉，而葡萄酿酒的原理是酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生酒精，因此与用葡萄酿酒相比，利用大米酿酒，须要增加淀粉水解成葡萄糖的过程。筛选胞外淀粉酶分泌型菌种，应当从富含淀粉的环境获得土样，即应当选择米酒厂四周的土样；淀粉酶的活性越高，分解淀粉的实力越强，则在菌落四周产生的透亮的水解圈就越大，因此应当从培育基上选择若干个水解圈直径与菌落直径比值大的菌落作为酶活性较高的菌种。（2）淀粉酶的化学本质是蛋白质，可以利用电泳法检测其分子量的大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质的分子量越小，则电泳的速度越快。（3）固定化淀粉酶可以反复利用，一般常用的固定方法有化学结合法、物理吸附法、离子吸附法及交联法等，可以通过检测固定化酶的活性来确定其应用价值。（4）依据题意分析，通过基因工程获得的工程酵母菌利用淀粉实力更强，产生CO2速率更快，因此接种该菌时的发酵罐须要先排气。7．枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株，分别将浸过不同菌株的提取液(a-e)及无菌水(f)的无菌圆纸片置于平板培育基表面，在37℃恒温箱中放置2-3天，结果如图1。请回答问题：(l)在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培育基养分成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、____。培育枯草芽孢杆菌时，常用摇床进行振荡培育，目的是______。(2)a-e中蛋白酶产量最高的菌株是____（用字母回答），推断依据是____。(3)利用凝胶色谱法分别提取到的部分蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的____________到适当高度进行洗脱，结果先洗脱出来的是_________的蛋白质。(4)质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量，设计了如图2所示试验。假如试验结果是____，则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该试验来推断此酶活性大小可通过视察____实现。【答案】蛋白质（酪蛋白）增加培育液中的溶氧量并使菌株与培育液充分接触，有利于目的菌的生长繁殖aa四周的透亮圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多或活性高磷酸缓冲液相对分子质量较大A组胶片上的蛋白膜消逝，B组胶片上的蛋白膜未消逝胶片上的蛋白膜消逝所需时间的长短（相同时间内蛋白膜消逝的面积）【解析】(l)蛋白酶高产菌株可以分解蛋白质，在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培育基养分成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、蛋白质。培育枯草芽孢杆菌时，为了增加培育液中的溶氧量并使菌株与培育液充分接触，有利于目的菌的生长繁殖，常用摇床进行振荡培育。(2)由图1可知，菌株a的透亮圈最大，说明其蛋白酶含量高或活性高，故a的蛋白酶的产量最高。(3)利用凝胶色谱法分别提取到的部分蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液到适当高度进行洗脱，由于相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部，路程较短，移动速度较快，故最先洗脱出来。(4)图2中，自变量是洗衣粉是否煮沸，因变量是视察蛋白膜的消逝时间。若洗衣粉中含有蛋白酶，加热煮沸后会导致蛋白酶变性失活，蛋白膜不会消逝，故结果是A组胶片上的蛋白膜消逝，B组胶片上的蛋白膜未消逝。本试验可以通过视察胶片上的蛋白膜消逝所需时间的长短来推断酶活性的大小，酶活性越强，蛋白膜消逝所需的时间越短。8．我国水果生产发展快速，每年上市的簇新水果品种多，数量大。随着水果加工技术的发展，可满意人们不同层次的需求。水果的加工包括制作果汁、果酒、果醋、果干等。请回答下列问题(1)日常生活中可干脆用_________法生产苹果汁，加入______能够提高水果的出汁率并使果汁变得澄清。(2)簇新的苹果汁可发酵制成苹果酒，酵母菌常用于苹果酒的制作，其异化作用类型为____，其产生CO2的场所是__________。(3)若想对酵母菌进行计数，则应用____法在培育基上进行接种。平板划线法一般不用于活菌计数的缘由是____________。(4)利用固定化细胞技术发酵葡萄糖溶液，与固定化酶技术相比，_______技术对酶活性影响更小，缘由是___________。【答案】压榨果胶酶兼性厌氧型细胞质基质和线粒体基质稀释涂布平板得到的菌落多数不是由单个细胞繁殖而来的菌落，菌落数远小于活菌数固定化细胞技术固定化细胞由于保证了细胞的完整性，酶的环境变更小，所以对酶的活性影响较小【解析】（1）日常生活中可干脆用压榨法生产苹果汁，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，果胶酶作用：a、瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更简洁；b、把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变得澄清，故加入果胶酶能够提高水果的出汁率并使果汁变得澄清。（2）簇新的苹果汁可发酵制成苹果酒，酵母菌常用于苹果酒的制作，由于酵母菌既能进行有氧呼吸，又能进行无氧呼吸，故其异化作用类型为兼性厌氧型，当酵母菌进行无氧呼吸时，产生CO2的场所为细胞质基质，当其进行有氧呼吸时产生CO2的场所为线粒体基质，综上所述，其产生CO2的场所是细胞质基质和线粒体基质。（3）若想对酵母菌进行计数，则应用稀释涂布平板法在培育基上进行接种。平板划线法一般不用于活菌计数的缘由是得到的菌落多数不是由单个细胞繁殖而来的菌落，菌落数远小于活菌数。（4）利用固定化细胞技术发酵葡萄糖溶液，与固定化酶技术相比，固定化细胞技术对酶活性影响更小，缘由是固定化细胞由于保证了细胞的完整性，酶的环境变更小，所以对酶的活性影响较小。9．多孔陶瓷具有制备简洁、廉价、高效、节能、环保及良品率高等优点。某科研小组对多孔陶瓷球固定化β-葡萄糖苷酶的条件进行探讨，并将固定化酶的性质与游离酶进行比较，得到如下曲线。回答下列问题：注：残余酶活性：在同组试验中，将处理（酸、热、冷藏、操作反应等）前的固定化酶或游离酶的活性记为100%，各试验点的值与该点的值之比，通常以百分数表示。（1）固定化酶的方法一般包括_____________和物理吸附法；采纳物理吸附法固定化酶，因条件温柔，__________________________，且操作简便、载体廉价易得，可反复运用。依据酶的特性，固定化酶须要在_____________条件下保存。与固定化细胞相比，其主要缺点是__________。（2）β-葡萄糖苷酶能催化硝基苯酚β-D—葡萄糖苷水解成对硝基苯酚，试验中一般要测定酶活力，该试验中测定β-葡萄糖苷酶活力时，可用单位时间内_____________________表示。（3）从曲线分析能得出的结论是_________________________________。（4）试验中固定化酶在pH为4.8时的残余酶活性稍低于游离酶，其可能的缘由是_______________。【答案】化学结合（法）不会引起酶变性或失活低温只能固定一种酶，不利于催化一系列的酶促反应硝基苯酚-β-D—葡葡萄糖苷消耗量或对硝基苯酚生成量β-葡萄糖苷酶经过固定化后，其稳定的pH范围更广少量酶发生渗漏【解析】(1)固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在肯定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。由于酶分子很小，一般来说更适合采纳化学结合法和物理吸附法固定化酶。物理吸附法是通过氢键、疏水键等作用力将酶吸附于不溶性载体的方法。采纳物理吸附法固定化酶，因其操作简便、条件温柔，所以不会引起酶变性或失活，且载体廉价易得，可反复运用。温度过高、过酸、过碱，都会使酶的空间结构遭到破坏，导致酶永久失活，但0℃左右时，酶的活性很低，其空间结构稳定，在相宜的温度下酶的活性可以上升。可见，固定化酶须要在低温条件下保存。固定化细胞固定的是多酶系统，而固定化酶只能固定一种酶，不利于催化一系列的酶促反应。(2)β-葡萄糖苷酶能催化硝基苯酚β-D-葡萄糖苷水解成对硝基苯酚。酶活力的凹凸，可以通过酶所催化的化学反应在单位时间内反应物的消耗量或产物的生成量来加以体现。可见，若测定β-葡萄糖苷酶活力，可用单位时间内硝基苯酚-β-D—葡葡萄糖苷的消耗量或对硝基苯酚的生成量来表示。(3)曲线图显示：pH在4.2～5.0之间，游离酶的残余酶活性略高于固定化酶，但在pH在3.0～4.2与5.0～7.2之间，游离酶的残余酶活性明显低于固定化酶，而且随pH的变更，固定化酶的残余酶活性的变更幅度比游离酶的小。由此说明：β-葡萄糖苷酶经过固定化后，其稳定的pH范围更广。(4)试验中固定化酶在pH为4.8时的残余酶活性稍低于游离酶，可能是由于少量酶发生渗漏所致。10．请回答下列与酶和植物有效成分的提取有关的问题：（1）为提高出汁率过程②运用果胶酶处理，该酶包括果胶分解酶、果胶酯酶、_________酶，为提高该酶的利用率常采纳__________技术。（2）下图是表示检测某种碱性蛋白酶去污力的试验结果曲线，该试验的目的是_____________________。50℃时加洗衣粉中碱性蛋白的最适含量约是______%。（3）某植物的花中含有油性物质A、果肉中含有物质B．物质A是易挥发、难溶于水的无色物质；物质B是易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发，受潮易分解的有色物质。①依据题干信息推断，提取物质A________（填“能”“不能”或“不确定能否”）利用水中蒸馏法，缘由是_________________________________。②物质B___________（填“能”“不能”或“不确定能否”）运用苯取法提取，提取物质B时应选用___________（填“干燥”或“簇新”）的果肉【答案】半乳糖醛酸酶固定化酶探究40℃、50℃两种温度条件下碱性蛋白酶含量对加酶洗衣粉去污力的影响0.6不确定能否还须要确定水中蒸馏时是否会导致原料焦糊或者有效成分水解能干燥【解析】（1）果胶酶包括果胶分解酶、果胶酯酶、半乳糖醛酸酶。利用固定化酶技术，可以提高该酶的利用率。（2）由曲线图可知，试验的自变量是不同的温度和碱性蛋白酶的含量，因变量是去污力，故试验的目的是探究40℃、50℃两种温度条件下碱性蛋白酶含量对加酶洗衣粉去污力的影响。50℃时，加洗衣粉中碱性蛋白的最适含量约是0.6%，此时去污力即可达到最大。（3）某植物的花中含有油性物质A、果肉中含有物质B。物质A是易挥发、难溶于水的无色物质；物质B是易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发，受潮易分解的有色物质。①物质A是易挥发、难溶于水的无色物质，因为不确定水中蒸馏时是否会导致原料焦糊或者有效成分水解等问题，故不能确定物质A能否利用水中蒸馏法。②物质B是易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发，受潮易分解的有色物质。可以运用萃取法提取，提取物质B时应选用干燥的果肉，因为含水量会影响萃取的效率。11．纤维素酶在生产、生活中应用特别广泛，请回答下列问题：（1）一般认为，纤维素酶至少包括三种组分，即_______________________________。（2）可以利用分解纤维素的微生物提取纤维素酶，鉴别这类微生物可用______________法。（3）棉麻织物的主要成分是纤维素，但含纤维素酶的洗衣粉仍可洗涤这类衣物，缘由是________________________________________________________________________。（4）为提高纤维素酶的利用率，科研人员将纤维素酶与海藻酸钠混合后，滴加到肯定浓度的氯化钙溶液中，使液滴形成凝胶珠，该方法称为________________。其中氯化钙的作用是__________________________________________________________。若凝胶珠中纤维素酶量少，缘由可能是_________________________________。（5）该科研人员进一步探究纤维素酶固定化后的热稳定性变更。将固定化酶和游离酶置于60℃水浴中，每20min测定其活力一次。结果如图所示。据图分析，纤维素酶固定后热稳定性___________，依据_________________________。【答案】C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶刚果红染色纤维素酶使棉麻织物的结构变得蓬松，从而使渗入到深处的污垢能够与洗衣粉充分接触，达到很好地去污效果包埋法使海藻酸钠聚沉，形成稳定的凝胶珠海藻酸钠溶液浓度过低提高固定化酶活力下降速率小于游离酶【解析】（1）纤维素酶至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。（2）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，培育基中会出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈，故鉴别纤维素分解菌可以用刚果红染色法。（3）用含纤维素酶的洗衣粉洗涤棉麻衣物时，纤维素酶使棉麻织物的结构变得蓬松，从而使渗入到深处的污垢能够与洗衣粉充分接触，达到很好地去污效果。（4）将纤维素酶与海藻酸钠混合后，滴加到肯定浓度的氯化钙溶液（使海藻酸钠聚沉，形成稳定的凝胶珠）中，使液滴形成凝胶珠，即为包埋法。若海藻酸钠溶液浓度过低，会导致凝胶珠中纤维素酶量少。（5）据图分析，随着时间的延长，固定化酶活力比游离酶活力下降慢，说明纤维素酶固定化后热稳定性会提高。12．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。据血红蛋白的提取和分别流程图回答问题。（1）将试验流程补充完整：A为_____，凝胶色谱法是依据_____来分别蛋白质的有效方法。（2）洗涤红细胞的目的是去除_____。洗涤干净的标记是_____。释放血红蛋白的过程中起作用的物质有_____。（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是_____。（4）在装填色谱柱时不得有气泡存在，因为_____。在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干、露出凝胶颗粒的状况，一旦发生这种状况，需重新装填凝胶色谱柱。假如红色区带匀称一样地移动，说明色谱柱制作胜利。【答案】血红蛋白的释放相对分子质量的大小杂蛋白（血浆蛋白）离心后的上清液中没有黄色蒸馏水和甲苯精确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内一样气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分别效果【解析】（1）将试验流程补充完整：A为血红蛋白的释放，凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小来分别蛋白质的有效方法。（2）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白（血浆蛋白）。洗涤干净的标记是离心后的上清液中没有黄色。释放血红蛋白的过程中起作用的物质有蒸馏水和甲苯。（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是精确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内一样。（4）在装填色谱柱时不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分别效果。13．甘薯俗称“红薯”，它含有丰富的糖、蛋白质、纤维素和多种纤维素。就总体养分而言，甘薯可谓是粮食和蔬菜中的佼佼者。民间常用甘薯酿酒，从而提高其经济价值。请回答：（1）为提高甘薯的利用率，在工业化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可将果胶分解为____________。（2）利用酵母菌发酵甘薯汁，常须要将温度限制在____________。（3）为了提高酵母菌的利用率，探讨人员对酵母菌进行了固定化，过程如下：酵母细胞活化→→配置海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞①请将酵母细胞固定化过程补充完整：________________________。②海藻酸钠溶化时，最好采纳________________________的方法。③上述固定酵母细胞的方法称为____________法，制备固定化某酶则最好用_______________对其进行固定化。（4）探讨人员发觉甘薯发酵液中存在一种活性蛋白，可提高酒精的产量。探讨人员欲采纳电泳法分别该蛋白质，其原理是依据蛋白质的________________________、大小及形态不同，在电场中的迁移速度不同而实现分别。除电泳法外，请你写出另一种分别蛋白质的方法：___________________________________，该方法是依据___________________________________________________________使蛋白质得以分别。【答案】半乳糖醛酸18—25℃配制CaCl2溶液小火间断加热包埋化学结合或物理吸附法带电性质的差异凝胶色谱法（或安排色谱法）相对分子质量的大小【解析】（1）为提高甘薯的利用率，在工业化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解为半乳糖醛酸，淀粉酶可催化淀粉水解为糊精。（2）酵母菌酒精发酵的最适温度是18～25℃，因此利用酵母菌发酵甘薯汁，常须要将温度限制在18～25℃。（3）①制备固定化酵母细胞的试验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。②为防止发生焦糊，溶解海藻酸钠时最好采纳小火或间断加热的方法。③上述过程将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中，其固定酵母细胞的方法称为包埋法。由于个小的酶简洁从包理材料中漏出，因此制备固定化某酶则最好用化学结合或物理吸附法对其进行固定化。（4）电泳法分别蛋白质的原理是依据蛋白质的带电性质的差异、大小及形态不同，在电场中的迁移速度不同而实现分别。除电泳法外，还可以采纳凝胶色谱法分别蛋白质，其原理是依据蛋白质分子的相对分子质量大小使蛋白质得以分别。14．．血红蛋白的提取与分别：①将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入蒸馏水和甲苯，其中加入甲苯的目的是___________。②利用凝胶色谱法分别蛋白质，常选用血红蛋白为材料，其缘由是_____________________，该方法的基本原理是依据____________________（蛋白质特性）而达到蛋白质分别，蛋白质的提取和分别一般分为四步：样品处理、____________________。③下图1是凝胶色谱法分别血红蛋白时样品的加入示意图，正确的加样依次是____________。假如红色区带__________________，说明色谱柱制作胜利。④一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，视察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如下图所示。由图可知携带者有2种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的说明是_____________________【答案】加速红细胞的裂开并释放出血红蛋白取材简洁，本身有色便于视察相对分子质量的大小粗分别、纯化和纯度鉴定④①②③匀称一样地移动携带者具有(限制血红蛋白的)一对等位基因，可以限制合成两种不同的蛋白质【解析】①将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入蒸馏水和甲苯，其中加入甲苯的目的是加速红细胞的裂开并释放出血红蛋白。②由于血红蛋白取材简洁，本身有色便于视察，常作为利用凝胶色谱法分别蛋白质的材料；凝胶色谱法分别蛋白质的基本原理是依据相对分子质量的大小而达到蛋白质分别，蛋白质的提取和分别一般分为四步：样品处理、粗分别、纯化和纯度鉴定。③据图分析，凝胶色谱法分别血红蛋白时样品的加入的正确的依次是调整缓冲液面、滴加透析样品、样品渗入凝胶床、再调整缓冲液面，即④①②③；假如红色区带匀称一样地移动，说明色谱柱制作胜利。④据图分析可知，携带者有2种血红蛋白，其缘由是携带者具有一对等位基因，可以限制合成两种不同的蛋白质。15．请依据血红蛋白的提取和分别流程图回答下列问题：（1）将试验流程按先后依次补充完整：________、_________。（2）凝胶色谱法的基本原理是依据________________分别蛋白质。（3）洗涤红细胞的目的是去除_________，洗涤干净的标记是________________。为防止血液凝固，在采血容器中通常要预先加入___________。（4）凝胶色谱操作结束后，须要用电泳来对蛋白质进行纯度鉴定，电泳利用了待分别样品中各种分子的____________的特性，使带电分子产生不同的________，从而实现样品中各种分子的分别。（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质-SDS复合物，由于SDS_________，从而使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。【答案】血红蛋白的释放凝胶色谱柱的装填蛋白质相对分子质量的大小杂蛋白（或血浆蛋白）离心后的上清液不再呈现黄色柠檬酸钠带电性质差异以及分子本身的大小、性状的不同迁移速度所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别【解析】（1）血红蛋白的提取和分别流程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分别血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱。可见，A表示血红蛋白的释放，B表示凝胶色谱柱的装填。（2）凝胶色谱法的基本原理是：依据相对分子质量的大小分别蛋白质。（3）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分别纯化。洗涤干净的标记是离心后的上清液不再呈现黄色。为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂柠檬酸钠，其比例是每100mL血液加入3.0g柠檬酸钠。（4）电泳利用了待分别样品中各种分子的带电性质差异以及分子本身的大小、性状的不同的特性，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别。（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质-SDS复合物，由于SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，从而使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。16．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。请依据血红蛋白的提取和分别流程图回答问题：（1）将试验流程补充完整：A为________________，B为____________________。（2）洗涤红细胞的目的是去除__________，达到该目的的关键是限制离心的____________________。（3）将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，透析的原理是：_________。（4）凝胶色谱法是依据________________________而达到蛋白质分别的有效方法。（5）在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，是因为气泡会____________________，降低分别效果。（6）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是__________。（7）分别纯化好的血红蛋白，须要进行纯度鉴定，在鉴定方法中，运用最多的是_________________。【答案】血红蛋白的释放样品的加入和洗脱杂蛋白(血浆蛋白)速度和时间透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内相对分子质量的大小搅乱洗脱液中蛋白质洗脱的次序精确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一样SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳【解析】(1)样品处理包括红细胞的洗涤、图中A所示的血红蛋白的释放、分别血红蛋白溶液。凝胶色谱操作包括:凝胶色谱柱的制作、凝胶色谱柱的装填、图中B所示的样品的加入和洗脱。(2)洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白(血浆蛋白)，以利于后续步聚的分别纯化。若离心速度过高和时间过长，会使白细胞等一同沉淀，得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度，因此达到该目的的关键是限制离心的速度和时间。(3)透析袋一般是用硝酸纤维素制成的，透析的原理是：透析袋能使小分子自由进出，而将大分子则保留在袋内。(4)凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小来分别蛋白质的有效方法。(5)在装填凝胶柱时，若产生气泡，则其会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而影响分别效果，所以在装填凝胶柱时，不得有气泡存在。(6)在肯定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH值的影响，维持pH值基本不变，所以在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是：精确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一样。(7)琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常用的电泳方法。在对分别纯化好的血红蛋白进行纯度鉴定时，运用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。17．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。请依据血红蛋白的提取和分别流程图回答问题。（1）将试验流程补充完整：A为________________，B为____________________。凝胶色谱法是依据________________________而达到蛋白质分别的有效方法。（2）洗涤红细胞的目的是去除__________；离心速度过高和时间过长会使____________________一同沉淀，达不到分别的效果。释放血红蛋白的过程中起作用的是________________。（3）在洗脱过