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34DB34/T4315—2022甜叶菊组培快繁技术规程TechnicalregulationsfortissuecultureandrapidpropagationofSteviarebaudiana2022-10-26发布2022-11-26实施安徽省市场监督管理局发布I1本文件规定了甜叶菊[Steviarebaudiana（Bertoni）Hemsl.]组培快繁的组培设施、培养基配4.2准备室4.2.2配置高压蒸汽灭菌锅、微波炉、托盘、水浴锅、蒸馏水器、冰箱、培养箱、电子分析天平、电4.3接种室4.3.2配置超净工作台、双筒实体显微镜、空调、紫外灯、空气净化装置、组培灭菌器、镊子、剪刀4.4培养室24.5温室温室建造按JB/T10594的规定执行。可选择玻璃温室或薄膜温室，温度可控范围15℃~32℃,5.1培养基类型5.2培养基配制6.2接种工具灭菌6.3超净工作台灭菌将灭菌的培养基和接种工具放置在超净工作台上，接通电源，打开超净工作台上的紫外灯灭菌min～30min，先启动风机，再关闭紫3将选取的外植体用2‰～5‰洗衣粉溶液清洗茎段表面污垢后，在超净工作台上，用无菌滤纸吸干外植体表面水分，浸入70％乙醇中消乙醇倒去，用无菌水冲洗2次后，再浸入有效氯浓度27.4外植体接种将已消毒的外植体切除下端部分及上端幼叶，留取长1.5cm～2.0cm带侧芽茎段备用。培养温度为23℃~27℃,光照强度2000lx～3000lx，连续定时光照时间12h/d。7.6培养时间培养25d～30d。8.2培养条件8.3培养时间培养25d～30d。8.4培养代数4选取生长健壮、长势均匀，苗高2.0cm～3.0cm的继代培养苗，转接到生根培养基中。9.2培养条件9.3培养时间培养18d～20d。10.1炼苗时期培养瓶内组培苗长出4～5条长2.0cm～5.0cm不定根时，便可炼苗。10.2炼苗条件培养瓶放置在遮光率为7075％、相对湿度为7090％、温度为20℃~30℃的温室中，打10.3炼苗时长炼苗2d～3d。用自来水将炼苗后的组培苗基部的培养基冲

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