DB34T 4268-2022 发酵茶中B族和G族黄曲霉毒素的测定

34DeterminationofaflatoxinBandGgroupsinfermentedI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件主要起草人：周育、管道健、张海柱、唐蜀昆、张梁1发酵茶中B族和G族黄曲霉毒素的测定本文件第二法为双柱净化-液相色谱柱串联质谱法，适用于发酵茶中AFB1、AFB2、AFGGB/T6682分析实验室用水规格和GB5009.22食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的4第一法双柱净化-高效液相色谱柱后光化学衍生法除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为4.2.1试剂）：）：24.2.1.11N-丙基乙二胺（PSA，CAS：111-39-7）。4.2.2材料4.2.2.3玻璃纤维滤纸：快速、高载量、液体中颗粒保留1.6μm。4.2.2.4真菌毒素多功能净化柱（以下简称多功能净化柱）。4.2.3试剂配制）：）：4.2.3.3磷酸盐缓冲溶液（以下简称PBS）：称取8.00g氯化钠、14.2.4标准品4.2.5标准溶液配制4.2.5.1标准储备溶液移液管准确移取AFB1和AFG1标准储备溶液各1mL，4.2.5.3标准系列工作溶液稀释34.3.1高速粉碎机。4.3.4涡旋混合器。4.3.7空气压力泵。4.3.8氮吹仪。4.3.10液相色谱柱。4.4.1取样4.4.1.1茶汤法缩分至100g，储存于样品瓶中，密封保存，供4.4.2提取4.4.2.1茶汤），），），），），），），醇-水溶液（4.2.3.2），涡旋混匀，置于涡旋振荡器或摇床中振荡20min，将茶叶及取提液全部转移4.4.3净化44.4.3.1多功能净化柱净化移取适量上清液，按多功能净化柱的操作说明进行净化，收集全部净化液，并确保净化液多于44.4.3.2免疫亲和柱净化4.4.3.2.1上样液的准备用刻度移液管准确吸取上步的净化液4mL（茶汤样品20mL或依据浓度适当调整加入46），4.4.3.2.2免疫亲和柱准备将2℃~6℃条件下保存的免疫亲和柱从冷藏条件下取出，恢复至室温连接于固相萃取装置。4.4.3.2.3亲和层析净化待免疫亲和柱内原有液体流尽后，将上述样液（4.4.3.2.1）移至50mL注射器筒中（或按照批次分批次移入10mL-20mL注射器筒），调节下滴速度，控制样液以每秒一滴的速度稳定流过免疫亲1.0mL甲醇-水溶液（45:55，V/V4.4.4液相色谱参考条件h)激发波长：360nm；发射波长：440nm；4.4.5定性检测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准品色谱峰的保留时间相比较，变化范围4.4.6标准曲线制作54.4.7空白试验65.2.3试剂配制5.2.4标准品5.3.1高速粉碎机。5.3.4涡旋混合器。5.3.5空气压力泵。5.3.8氮吹仪。5.4.2提取5.4.4液相色谱参考条件b)梯度洗脱：95%A相（0min～5min），95%－35%A相（5min～7.5min），95%A相（5.4.5质谱参考条件7a)检测方式：多离子反应监测（MRM）；离子源温度，120℃;锥孔反吹气流量，50L/h；脱溶剂气温度，500℃;脱溶剂气流量，9005.4.6.1试样中各目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，变化范围应在±2.5%之内。不超过规定的范围（相对离子丰度＞50%，在5.4.4和5.4.5的液相色谱串联质谱仪分析条件下，将标准系列溶液由低到高浓度进样检测，以0.99。5.4.8试样溶液的测定及浓度范围调整应在标准曲线线性范围内，若超过线性范围则应进行适当稀释提取液或减少取样量重新测定。的峰面积，按照公式（2）计算出毒素浓度，计算结果保留三位有效数字，单位为(μg/kg或μg/L）。C——试样中AFB1、AFB2、AFG1或AFG2的含量，单位为微克每千克或微克每升(μg/kg或μg/Lρ——标准工作液中黄曲霉毒素的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)；A——样液中黄曲霉毒素的峰面积；A0——空白样液中黄曲霉毒素的峰面积；8V——样液最终定容体积，单位为毫升（mLm——最终样液所代表的试样量，单位为克或毫升（g或mLAS——标准工作液中黄曲霉毒素的峰面积。在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。），），924.028.03DB34/T4268—2022