鞣质的分离和分析方法研究进展

鞣质的分离和分析方法研究进展摘要：鞣质又被称之为单宁，鞣质是一种存在植物内的结构相对复杂的化合物，肉质可以与动物皮肤中的蛋白质结合，形成稳定性较强的皮革材料，因此，单宁被称为鞣质，鞣质多元化的化合结构使得鞣质具有特殊的化学性质，以及很强的生物活性，鞣质是一种价值较高的天然的化合物，随着鞣质分离研究的不断深入，鞣质分离的技术开始得到人们的关注。引言近年来发现，植物提取物在替代抗生素方面的研究取得了良好进展，其作用主要包括抗微生物活性、免疫增强活性和抗氧化活性等方面的提高，且负面效应甚微。1、鞣质的提取方法鞣质有多种提取方法，最为常用的一种提取方法就是温水浸泡提取法，有机溶剂溶解提取法，创新后的提取方法有微波鞣质提取法，超声波鞣质提取法，膜技术提取法，高压水鞣质提取法等，这些创新的鞣质提取法将传统与现代的方法结合，最大限度提高了鞣质的提取效率，为鞣质在现实世界的应用提供了更加广阔的前景。2、鞣质的分离方法当前研究的鞣质分离方法也有很多种，包括分级沉淀分离鞣质法，活性炭吸附分离鞣质法，离子交换分离鞣质法等。2.1分级沉淀法分级沉淀分离鞣质法是基于鞣质中不同物质的溶解度有所差别，使用浓度不同的溶解剂，比如说甲醇、乙醇等，可以达到分级分离鞣质的目的，一般来说都使用乙醇作为溶质分级沉淀的溶解剂，先使用明胶将宗鞣质沉淀，之后在沉淀物中加入丙酮溶液，将鞣质释放出来，可以初步将老鹳草提取液分离出来，明胶溶液可以优化鞣质的沉淀分级工艺，有机溶液对于机械设备的要求也相对较低，成本也较低，但是这种方法分离的鞣质不容易分离有害物质，这种方法分离鞣质的安全性还没有完全得到认可。2.2活性炭吸附活性炭是一种含碳的多孔物质，活性炭的孔隙构造高度发达，正是由于活性炭的孔隙构造高度发达，使得活性炭可以为鞣质分离提供大面积的平面，活性炭可以与鞣质流体充分接触，从而赋予活性炭更强的吸附功能，使得活性炭轻易将流体中的杂质去除，使用活性炭可以去除鞣质流体中的色素、树胶等杂质，可以一定程度上提高鞣质提取的质量，鞣质的透射率显著提高。2.3大孔树脂吸附大孔树脂的吸附法也有其优势所在，大孔树脂吸附法可以进一步分离和优化鞣质，一般非极性物质在极性介质(水)中容易被非极性树脂吸附，极性物质在非极性介质中容易被极性树脂吸附，具有较强极性基团的吸附剂在非极性溶剂中可以很好的吸附极性化合物。聚苯乙烯树脂一般适用于非极性和弱极性物质的化合物，如皂甙和类黄酮。聚丙烯酸树脂一般有酯基或酰基氨基，它们能很好地吸附中等极性和极性化合物，如黄酮醇和酚类。李青等采用D141大孔树脂对藏边大黄鞣质进行分离纯化。D141大孔树脂静态吸附鞣制质量为27.5mg/g。大孔树脂具有吸附选择性好、再生简单、解吸条件温和、使用周期长、易形成闭路、节约成本等优点，可广泛应用于物质的分离纯化。2.4膜分离技术膜分离技术是选择性地透过膜为分离介质,当有一定的推力(如压力差、浓度差和电位差)两岸的膜,原料端组件根据分子大小选择性地透过膜,以达到分离纯化的目的。该方法具有效率高、几乎无相变、常温操作、工艺简单、操作方便、投资低等优点。它已成为一种新型的绿色节能的澄清、分离、浓缩技术。杜云平等采用膜分离技术对板栗苞片单宁的纯化工艺条件进行了优化。结果表明，在最佳工艺条件下，缓凝液中单宁含量可达64%左右，浊度在0以下。8浊度单元(NTU)。该方法具有操作简单、效率高、节能环保等优点，为进一步开发单宁生产工艺提供了技术参考。2.5离子交换技术离子交换技术是基于某些溶质解出阳离子或阴离子的特点,使用离子交换剂和不同离子约束力的强度差异,暂时溶质交换离子交换剂,然后溶质离子与一个合适的洗脱液洗脱,分离和富集溶质的解决方案或净化技术。为了获得高纯度的多肽组分，先后采用离子交换层析和凝胶过滤纯化，采用水酶法提取菜籽粗肽。经离子交换层析纯化后，糖和单宁含量明显下降。2.6凝胶柱色谱凝胶柱色谱法是一种用多孔凝胶填料作为固定相，按分子大小将样品的各组分分离的液相色谱法。sephadexhl-20是最常用的单宁分离凝胶。主要用于分离不同聚合度的单宁，分离受各单宁的吸附影响，不受凝胶过滤的影响。原花青素可以用SephadexLH-20柱层析法分离，先用乙醇洗脱非鞣质成分，再用丙酮-水或乙醇-水洗脱原花青素。2.7液滴逆流色谱法和高速逆流色谱法近年来，液滴逆流色谱(DCCC)已被用来替代液相色谱法分离多酚类物质。优点是操作条件温和，样品负荷高，分离能力强，不需要固体支撑，避免了因吸附各种物质而造成单宁的损失。高速逆流色谱(HSCCC)是在DCCC的基础上发展起来的，弥补了DCCC发展时间长的缺点。采用HSCCC分离花青素。溶剂体系为叔丁基甲基醚/正丁醇/乙腈/水(2∶2∶1∶5)，以三氟乙酸为溶剂。2.8高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)已被广泛应用于多酚类物质的分离。正相高效液相色谱法可以根据聚合度对原花青素进行分离，最高可达十聚体。用反相高效液相色谱法可以分离黄烷-3-醇类单体和低聚物，特别是二聚体和三聚体，但洗脱的顺序与聚合度无关。3、结语近年来，我国对单宁的研究十分活跃，各种分离和分析单宁的新方法不断涌现，为单宁的研究提供了新的思路和方法。但目前单宁的提取、分离和含量测定方法多集中在总单宁上，对某一类单宁较少，希望在今后的研究中更具针对性。我国对单宁的研究还处于起步阶段，研究水平较低。参考文献：[1]孟凡恒,李佳佳,董兴童,等.仙鹤草中鞣质类成分的提取分离鉴定实验[J].山东化工,2019(13).[2]杨志刚,郑文惠,张凯雪,等.沙棘叶中鞣质类成分及其抗炎和抗肥胖活性研究[J].中草药,2019,50(12).[3]胡梦.百药煎传统炮制过程中微生物的分离、鉴定及降解鞣质最佳菌种组合的筛选[D].2019.[4]李博,彭静,郭立玮,等.基于Her