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DB34DB34/T3653—2020番鸭胚垂直传播病毒(RT-)PCR检测技术规范Technicalregulationfordetectionofverticaltransmissionvirusesby(RT-)PCRfromMuscovyDuckembryos2020-06-22发布2020-07-22实施安徽省市场监督管理局发布I1可以通过番鸭胚垂直传播的病毒统称，包括鸭甲肝病毒1型（DuckHepatitisVirustype1,DHAV-1）、鸭甲肝病毒3型（Du4.2台式低温高速离心机，温控范围：-4℃~25℃。4.7水浴锅，温控范围：37℃~100℃。4.8微量移液器，可调控量程：0.5～10μL，10～100μL25.5磷酸盐缓冲液（PBS见附录A.1。F:5’-AGGCCCAGAAGCATTCAAACA-3’R:5’-TGGGTGTTTTACGTGTACTC-3’F:5’-CAATGGGCTTTTACCAATATGC-3’R:5’-ATTTTTCCCTCCTCCCACCA-3’F:5’-GAATCGTGGTCTAGCGAC-3’R:5’-CTCGCATCTGCTGATCATAATTACC-3’F:5’-ACCTCAGGATATCGCTGAAACT-3’R:5’-CTCCATCCCTGCAGCACATGTAAAG-3’F:5’-TCAACAAACTCCACCGAAACTGT-3’R:5’-TCCCGTAAGAACATGTCCATACCA-3’3采集的尿囊液经8000g离心10min，取上清分装后，于-20℃冻存备用；采集的组织），6.3.2.2将上述反应混合液按照以下步骤进行PCR扩增，9446.4.2.2将上述反应混合液按照以下步骤进行一步法R），57.5.2当待检样品出现约732bp条带6A.1.1成分Na2HPO4·12H2OA.1.2制法将上述试剂溶于800mL灭菌双蒸水中，定容至A.375％乙醇制法A.4.10.5mol/L乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH8.0）制法羟基甲基氨基甲烷（Tris）242g0.5mol/L乙二铵四乙酸二钠溶液（pH8.7至8(规范性附录)番鸭胚垂直传播病毒(RT-)PCR检测结果判定B.1DHAVRT-PCR检测结果电泳图1,DHAV-1阳性对照样品；2,DHAV-3阳性对照样品；5,阴性对照样品；6,空白对照样品。966,空白对照样品。B.3MDRVRT-PCR检测结果电泳图13,阴性对照样品；4,空白对照样品。

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