盐碱化土壤作物品种筛选与评价技术规程

1盐碱化土壤作物品种筛选与评价技术规程本文件规定了耐盐碱作物品种萌发期、苗期耐盐碱性鉴定、鉴定方法及耐盐碱性评价标准。本文件适用于玉米、向日葵、大豆等耐盐碱作物品种种质资源的耐盐碱性快速鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3543农作物种子检验规程GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1耐盐碱saline-alkalinetolerance指作物在盐碱胁迫下，其生长发育和产量形成对盐碱胁迫的反应能力。3.2盐害指数saltinjuryindexofseedlings在盐胁迫条件下，反映苗期盐害率和盐害程度的指标4鉴定方法4.1萌发期耐盐碱性鉴定4.1.1种子准备种子纯度、净度、水分应符合GB/T4404.1中对作物种子质量的要求。种子发芽率大于95%，禁止包衣或拌种。挑选出籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15min消毒后，用蒸馏水冲洗晾干后置于培养皿15cm中。4.1.2胁迫处理将发芽纸放入培养皿中，注入混合盐碱胁迫溶液，待发芽纸吸水饱和时，沥去多余溶液，将种子均匀摆放在发芽纸上，种子间保持一定间距。每皿10粒种子。每隔1d用称重法补存水分，保持各处理2相对浓度不变；在第3d重新更换一次相应处理液，第7d天观察种子发芽情况。按当地盐渍化土壤盐碱化土壤实际盐分组成类型，采用NaCl、Na2SO4、NaHCO3三种单盐混合比例按9:11:2配比。向日葵盐碱胁迫浓度设置6个梯度，分别为：0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、100mmol/L、125mmol/L。4.1.3性状调查将发芽皿放入光照培养箱中，在每24h提供8h光照条件下，25℃恒温培养，第2d、4d、6d和8d调查发芽种子数。4.1.4萌发期耐盐碱率4.1.4.1相对发芽势胁迫率相对发芽势胁迫率按照公式（1）计算。Rge(%)=[(Cge-Tge)/Cge]×100(1)式中：Rge―相对发芽势胁迫率，Cge―对照发芽势，发芽处理后第5d统计种子发芽数，Tge―处理发芽势，发芽处理后第5d统计种子发芽数。4.1.4.2相对发芽率胁迫率相对发芽率胁迫率按照公式（2）计算。Rgr(%)=[(Cgr-Tgr)/Cgr]×100(2)式中：Rgr―相对发芽率胁迫率，Cgr―对照发芽率，发芽处理后第7d统计种子发芽数，Tgr―处理发芽率，发芽处理后第7d统计种子发芽数。4.1.4.3相对根长胁迫率相对根长胁迫率按照公式（3）计算。Rrl(%)=[(Crl-Trl)/Crl]×100(3)式中：Rrl―相对根长胁迫率，Crl―对照根长，培养7d时测定，Trl―处理根长，培养7d时测定。4.1.4.4相对盐碱胁迫率相对盐碱胁迫率按照公式（4）计算。RSA(%)=[(Rge+Rgr+Rrl)/3]×100(4)式中：RSA―相对盐碱胁迫率4.2苗期耐盐碱性鉴定34.2.1种子处理挑选出籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15min消毒后，用蒸馏水冲洗晾干后置于石英砂盆播内。4.2.2水培准备育种加速期培养法，挑选出发芽一直的梦萌发期幼苗，置于事先准备好的水培装置内中，每一个品种30株。4.2.3胁迫处理按当地盐渍化土壤盐碱化土壤实际盐分组成类型，采用NaCl、Na2SO4、NaHCO3三种单盐混合比例按9:11:2配比。向日葵盐碱胁迫浓度设置6个梯度，分别为：0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、250mmol/L。玉米和大豆盐碱胁迫浓度设置6个梯度，分别为：0mmol/L、25mmol/L、50mmol/L、75mmol/L、100mmol/L、125mmol/L。4.2.3抗逆指标检测4.2.3.1生理指标可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标。4.2.3.2检测方法参照《植物生理生化实验原理和技术》，从植株顶端连续向下取3片～4片叶片。5耐盐碱性评价标准5.1苗期耐盐碱率(i=0,1,2,.5)（5）式中：SS──苗期耐盐碱率；STi──苗情类别；SNi──每类苗情株数；TN──检测样本总株数。5.2评价标准根据耐盐指数对材料萌发期耐盐碱性评价，详见下表1。4表1苗期盐碱性分级标准0.0%～20%120.1%～40%240.1%～60%360.1%～80%480.1%～100%56综合评价6.1因子确定对种子萌发期发芽率、萌发指数、耐盐碱率和苗期叶片中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标进行主成分分析，确定耐盐碱性评价指标。6.2评价方法6.3隶属度确定运用隶属函数法对关键特征因子各指标进行标准化处理，然后计算隶属函数值。反隶属函数值计算公式:式中：Xi──各指标测定值；Xmin──各测定指标的最小值；Xmax──各测定指标的最大值。当某一指标与玉米耐盐碱性成正相关时，用公式（1当某一指标与玉米耐盐碱性成负相关时，则6.4权重确定采用标准差系数法，计算标准差系数，归一化后得到每个指标的权重系数。