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文档简介

19/22混合淋巴细胞培养中的免疫细胞群体第一部分混合淋巴细胞培养原理 2第二部分效应细胞群体种类及特点 4第三部分调节性细胞群体的作用机制 7第四部分免疫细胞群体扩增机制 9第五部分细胞因子在免疫反应中的影响 11第六部分混合淋巴细胞培养的应用前景 13第七部分混合淋巴细胞培养中的实验技术 16第八部分混合淋巴细胞培养的伦理考量 19

第一部分混合淋巴细胞培养原理关键词关键要点【混合淋巴细胞培养原理】

1.将不同个体的淋巴细胞混合培养,刺激淋巴细胞增殖分化,产生淋巴因子,引发免疫反应。

2.反应性细胞(效应细胞)识别异体主要组织相容性复合体(MHC)分子,与非反应性细胞(靶细胞)相互作用,形成免疫突触。

3.免疫突触促进效应细胞活化,释放细胞因子和穿孔素等效应分子,杀伤靶细胞或诱导靶细胞凋亡。

【免疫反应的类型】

混合淋巴细胞培养原理

混合淋巴细胞培养(MLC)是一种体外细胞培养技术,用于评估供体和受体之间的免疫细胞相互作用,特别是针对移植排斥反应的预测。其原理基于以下步骤:

1.淋巴细胞分离:

*从供体和受体个体中采集血液或组织样品。

*采用密度梯度离心或其他方法分离淋巴细胞。

2.混合:

*将供体和受体淋巴细胞以一定比例混合,通常是1:1。

3.培养:

*将混合的淋巴细胞培养在含有适当培养基(例如RPMI-1640)和生长因子的培养物中。

*培养时间通常为5-7天,具体取决于所研究的免疫反应。

4.刺激:

*在某些情况下,可能会添加促有丝分裂原(例如PHA)或抗原(例如HLA抗原)以刺激淋巴细胞增殖。

5.细胞增殖测量:

*培养结束后,通过测定胸苷掺入、细胞计数或流式细胞术分析来测量淋巴细胞增殖。

MLC反应背后的免疫机制:

MLC反应涉及以下免疫细胞相互作用:

*抗原呈递细胞(APC):单核细胞、树突状细胞和其他APC从供体淋巴细胞中摄取和加工HLA抗原(MHC抗原)。

*T细胞:受体淋巴细胞中存在的T细胞识别APC上呈递的同种异体HLA抗原。

*T细胞激活:T细胞与APC发生相互作用后被激活,导致增殖和分化成效应细胞。

*细胞毒T细胞:效应T细胞可以发展成细胞毒T细胞(CTL),从而杀伤表达同种异体HLA抗原的供体细胞。

MLC反应的应用:

*移植相容性测试:预测器官或组织移植后的排斥反应风险。

*免疫功能评估:评估T细胞介导的免疫反应,例如在免疫缺陷或自身免疫疾病中。

*研究同种异体免疫:了解同种异体移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)和自体免疫性疾病的免疫机制。第二部分效应细胞群体种类及特点关键词关键要点效应T细胞群

1.CD4+效应T细胞(Th细胞):辅助性T细胞,区分化成Th1、Th2、Th17、Treg等亚群,负责激活其他免疫细胞和调节免疫应答。

2.CD8+效应T细胞(Tc细胞):细胞毒性T细胞,识别表达抗原的细胞并直接将其杀死,在清除病毒感染和肿瘤细胞中发挥关键作用。

自然杀伤细胞群

1.具有先天细胞毒性能力,无需事先致敏即可识别和杀死感染细胞、肿瘤细胞和受损组织。

2.产生细胞因子,如IFN-γ和TNF-α,增强免疫应答。

B细胞群

1.产生抗体,特异性识别和中和病原体、毒素和其他抗原。

2.参与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)和补体结合,增强免疫防御功能。

树突状细胞群

1.专业抗原递呈细胞,吞噬、加工和呈递抗原给T细胞,引发免疫应答。

2.连接先天免疫和适应性免疫,调节免疫反应的强度和特异性。

单核细胞群

1.具有吞噬作用,清除病原体、细胞碎片和其他异物。

2.分化成巨噬细胞或树突状细胞,在免疫反应中发挥多功能作用。

调节性细胞群

1.Treg细胞:抑制免疫反应,防止自身免疫和过度炎症。

2.Breg细胞:调节B细胞反应,抑制抗体产生和免疫介导的损伤。效应细胞群体种类及特点

1.细胞毒性T细胞(CTLs)

*特点:

*表达CD8共受体,识别MHCI类分子呈递的抗原

*能够溶解靶细胞,释放穿孔素和颗粒酶

*参与细胞内病原体免疫应答

2.辅助T细胞(Th细胞)

*特点:

*表达CD4共受体,识别MHCII类分子呈递的抗原

*产生细胞因子,如白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10和干扰素(IFN)-γ

*激活B细胞、巨噬细胞和其它免疫细胞

3.B细胞

*特点:

*表达B细胞受体(BCR),识别抗原

*产生抗体,中和病原体并激活补体系统

*能够分化为浆细胞,大量产生抗体

4.自然杀伤(NK)细胞

*特点:

*表达CD16和CD56受体,识别缺乏MHCI类分子的靶细胞

*释放穿孔素和颗粒酶,溶解靶细胞

*参与抗病毒和抗肿瘤免疫应答

5.嗜酸性粒细胞

*特点:

*含有嗜酸性颗粒,释放抗寄生虫成分

*参与过敏和免疫调节反应

6.嗜碱性粒细胞

*特点:

*含有嗜碱性颗粒,释放组织胺等炎症介质

*参与过敏和免疫调节反应

7.中性粒细胞

*特点:

*吞噬和杀伤病原体

*释放溶菌酶、防御素和活性氧物质

8.巨噬细胞

*特点:

*大型吞噬细胞,清除病原体和细胞碎片

*产生细胞因子和抗菌物质

9.树突状细胞(DCs)

*特点:

*专业抗原呈递细胞,激活T细胞和B细胞

*介导免疫应答的启动和调节

10.肥大细胞

*特点:

*位于组织中,释放组织胺和其它炎症介质

*参与过敏和免疫反应第三部分调节性细胞群体的作用机制关键词关键要点调节性细胞群体的作用机制

Treg细胞

1.Treg细胞通过分泌免疫抑制性细胞因子白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)抑制免疫反应,从而维持免疫耐受。

2.Treg细胞表达细胞表面受体CTLA-4,与抗原呈递细胞上的B7分子结合,抑制T细胞活化。

3.Treg细胞可通过消耗局部环境中的IL-2来抑制效应T细胞的增殖和分化。

Breg细胞

调节性细胞群体的作用机制

调节性T细胞(Treg)

*抑制性细胞因子分泌:Treg通过分泌抑制性细胞因子IL-10和TGF-β,抑制效应性T细胞的增殖和细胞毒性功能。

*免疫检查点分子表达:Treg表达免疫检查点分子CTLA-4和PD-1,与效应性T细胞上的受体结合,抑制T细胞活化和细胞因子释放。

*共抑制分子表达:Treg表达共抑制分子LAG-3和TIGIT,与相应配体结合,抑制T细胞活化。

*细胞接触介导的抑制:Treg通过与效应性T细胞的直接接触抑制其功能。这种抑制涉及程序性死亡配体1(PD-L1)和2(PD-L2)等分子。

调节性B细胞(Breg)

*抗炎细胞因子的分泌:Breg分泌抗炎细胞因子IL-10和TGF-β,抑制效应性免疫反应。

*抗体介导的抑制:Breg产生抗炎抗体,如IL-10R和TGF-βR,中和促炎细胞因子和受体。

*共刺激分子的下调:Breg下调共刺激分子CD80和CD86,抑制T细胞的活化。

髓系抑制细胞(MDSC)

*抑制性细胞因子的分泌:MDSC分泌抑制性细胞因子IL-10、TGF-β和IL-4,抑制效应性T细胞的增殖和细胞毒性功能。

*免疫检查点分子表达:MDSC表达免疫检查点分子PD-L1和CTLA-4,抑制T细胞活化。

*抗原呈递受体缺失:MDSC缺乏成熟抗原呈递细胞所需的共刺激分子,抑制T细胞的活化。

*谷胱甘肽耗竭:MDSC产生谷胱甘肽,耗尽效应性T细胞中的谷胱甘肽,导致细胞凋亡。

自然杀伤细胞(NK)细胞

*细胞毒性:NK细胞释放穿孔素和颗粒酶,杀伤调节性细胞,如Treg。

*细胞因子释放:NK细胞释放抗调节性细胞因子IFN-γ,抑制Treg的活性和增殖。

其他调节性细胞群体

*树突状细胞(DC):某些DC亚型具有调节性功能,分化成tolerogenicDC,诱导Treg的生成和抑制效应性T细胞的活化。

*单核细胞:单核细胞可分化成调节性巨噬细胞,分泌抗炎细胞因子和抑制效应性免疫反应。

调节性细胞群体之间的相互作用

不同的调节性细胞群体之间存在复杂的相互作用,共同调节免疫反应。例如:

*Treg可诱导Breg的分化和抑制的产生。

*MDSC可抑制NK细胞的活性。

*DC可调节Treg和Breg的生成。

这些相互作用确保了免疫系统的平衡,防止免疫超反应和自身免疫。第四部分免疫细胞群体扩增机制混合淋巴细胞培养(MLC)中的免疫细胞群体扩增机制

在混合淋巴细胞培养中,来自不同个体的免疫细胞相互作用,导致特定免疫细胞群体的扩增。这些扩增机制涉及细胞表面分子识别、细胞因子的释放和细胞分裂信号通路。

细胞表面分子的识别

MLC中免疫细胞群体扩增的初始阶段涉及主要组织相容性复合体(MHC)分子的识别。MHCI和MHCII分子分别表达在所有细胞和抗原呈递细胞(APC)上,负责呈现内源性和外源性抗原片段。

当来自不同个体的免疫细胞相互作用时,T细胞的TCR与外来MHC分子上的肽-MHC复合物结合。这种相互作用称为异基因刺激,是MLC中免疫细胞扩增的触发因素。

细胞因子的释放

识别外来MHC分子后,T细胞释放细胞因子,如白细胞介素-2(IL-2)。IL-2是T细胞增殖和分化的必要生长因子。它与IL-2受体(IL-2R)结合,触发下游信号通路,导致细胞分裂和细胞因子产生。

除了IL-2,其他细胞因子,如IL-1、IL-6和IL-12,也在MLC中免疫细胞扩增中发挥作用。这些细胞因子通过激活T细胞和APC,促进免疫反应。

细胞分裂信号通路

T细胞识别外来MHC分子并释放细胞因子后,它们进入细胞分裂周期。细胞分裂信号通路涉及一系列激酶和转录因子的激活,最终导致DNA复制和细胞分裂。

关键信号通路包括:

*MAPK通路:受IL-2刺激后激活,促进细胞增殖和分化。

*PI3K/Akt通路:调节细胞存活和代谢,促进T细胞扩增。

*NF-κB通路:激活促炎细胞因子的转录,促进免疫反应。

细胞群体的选择性扩增

在MLC中,某些免疫细胞群体比其他群体更易于扩增。这主要是由于对不同细胞因子的依赖性以及细胞表面受体的差异。

例如,辅助性T细胞(Th细胞)对IL-2高度依赖,而细胞毒性T细胞(CTL)对IL-12高度依赖。此外,Th细胞表达CD4受体,与MHCII分子相互作用,而CTL表达CD8受体,与MHCI分子相互作用。

因此,MLC中特定的细胞因子释放模式和细胞表面受体的表达决定了免疫细胞群体的选择性扩增。

结论

混合淋巴细胞培养中免疫细胞群体扩增涉及复杂且协调的机制。细胞表面分子的识别、细胞因子的释放和细胞分裂信号通路在调节这一过程并导致不同免疫细胞群体的选择性扩增中起着至关重要的作用。了解这些机制对于调节免疫反应和开发针对自身免疫性疾病和癌症的新型疗法至关重要。第五部分细胞因子在免疫反应中的影响关键词关键要点细胞因子在免疫反应中的影响

主题名称:细胞因子产生的调节

1.细胞因子的产生受多种因素调控,包括抗原呈递细胞、T细胞和B细胞释放的信号分子。

2.细胞因子的产生可通过正反馈或负反馈回路进行调节,以确保免疫反应的适当强度和持续时间。

3.细胞因子网络的失调与自身免疫性疾病、过敏和慢性炎症等免疫相关疾病的发生有关。

主题名称:细胞因子受体的信号传导

细胞因子在免疫反应中的影响

细胞因子是免疫系统中介导细胞间通信的蛋白质。它们是一类调节性分子,由免疫细胞产生,影响各种免疫细胞的活性、分化和功能。在混合淋巴细胞培养(MLC)中,细胞因子在调节免疫反应中起着至关重要的作用。

促炎细胞因子

促炎细胞因子是激活和招募免疫细胞到感染或炎症部位的关键调节剂。在MLC中,它们负责诱发免疫反应。

*肿瘤坏死因子(TNF):TNF是由激活的巨噬细胞和T细胞产生的多效细胞因子。它激活多种免疫细胞,促进炎症反应,并诱导细胞死亡。在MLC中,TNF诱导血管内皮细胞表达粘附分子,促进淋巴细胞浸润。

*白介素-1(IL-1):IL-1由巨噬细胞、树突状细胞和T细胞产生。它激活T细胞和B细胞,促进巨噬细胞的吞噬和杀菌活性。在MLC中,IL-1刺激T细胞增殖和细胞因子产生。

*白介素-6(IL-6):IL-6由激活的T细胞和巨噬细胞产生。它刺激肝细胞合成急性期蛋白,促进B细胞分化和抗体产生。在MLC中,IL-6增强T细胞增殖和分化,并调节细胞因子网络。

抗炎细胞因子

抗炎细胞因子调节炎症反应,限制组织损伤和促进组织修复。在MLC中,它们有助于控制免疫反应,防止过度激活。

*白介素-10(IL-10):IL-10由T调节细胞和巨噬细胞产生。它抑制促炎细胞因子的产生,阻碍T细胞活化,并促进B细胞调节性抗体产生。在MLC中,IL-10调节Th1和Th2细胞平衡,抑制过度炎症。

*转化生长因子-β(TGF-β):TGF-β由巨噬细胞、树突状细胞和T细胞产生。它抑制T细胞增殖和分化,促进免疫耐受。在MLC中,TGF-β抑制T细胞激活和细胞因子产生,维持免疫稳态。

细胞因子网络

在MLC中,细胞因子形成复杂的网络,相互作用调控免疫反应。促炎和抗炎细胞因子之间的平衡对于保持免疫稳态至关重要。

*IL-12和IFN-γ环路:IL-12由树突状细胞产生,诱导Th1细胞分化并产生IFN-γ。IFN-γ进一步刺激树突状细胞产生更多的IL-12,形成正反馈环路。

*IL-4和IL-13环路:IL-4和IL-13由Th2细胞产生,促进B细胞分化并产生IgE抗体。IgE抗体与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合,导致组胺等炎症介质的释放。

*IL-10和TGF-β反馈环路:IL-10和TGF-β抑制促炎细胞因子,维持免疫稳态。它们通过抑制IL-12和IFN-γ以及诱导T调节细胞分化来实现此目的。

临床意义

细胞因子在免疫反应中的作用有着广泛的临床意义。了解免疫细胞群体和细胞因子如何相互作用可以帮助我们设计治疗策略,调节免疫反应,治疗免疫性疾病和感染。

例如,在自身免疫性疾病中,阻断促炎细胞因子或增强抗炎细胞因子可以抑制过度炎症。在传染病中,刺激免疫反应的细胞因子可以增强宿主防御能力,而抑制促炎细胞因子可以防止过度炎症和组织损伤。第六部分混合淋巴细胞培养的应用前景关键词关键要点主题名称:免疫疾病诊断

1.MLC检测可用于识别患者免疫细胞对特定抗原的反应,有助于诊断自身免疫性疾病,如多发性硬化症和类风湿性关节炎。

2.通过比较不同供体的细胞反应性,MLC可以帮助确定遗传易感性和特定HLA等位基因与疾病易感性之间的关联。

3.MLC检测可用于监测免疫抑制治疗的疗效,并评估疾病进展和预后。

主题名称:免疫兼容性匹配

混合淋巴细胞培养(MLC)的应用前景

MLC广泛应用于免疫学、移植学和肿瘤学领域,具有以下重要的应用前景:

移植医学

*供体-受体匹配:MLC可用于评估器官移植供体和受体之间的组织相容性,最大限度地降低移植排斥的风险。

*移植耐受的诱导:MLC可用于建立移植耐受模型,研究免疫抑制策略和诱导移植受体的免疫耐受机制。

免疫学研究

*免疫细胞功能研究:MLC可用于研究不同免疫细胞群体(如T细胞、B细胞、树突细胞等)的激活、增殖和效应功能。

*免疫调节机制探索:MLC可用于探索免疫调节细胞(如调节性T细胞、髓系抑制细胞等)在免疫反应中的作用。

*自身免疫疾病机制阐明:MLC可用于建立自身免疫疾病模型,研究自身免疫反应的发生、发展和治疗策略。

肿瘤免疫学

*肿瘤抗原识别:MLC可用于识别肿瘤抗原,为癌症免疫治疗靶点的开发提供信息。

*肿瘤免疫逃逸机制研究:MLC可用于研究肿瘤细胞免疫逃逸的机制,为免疫治疗的改进提供方向。

*癌症免疫治疗疗效评估:MLC可用于评估癌症免疫治疗疗法的有效性,预测患者对治疗的反应。

其他应用

*药物筛选:MLC可用于筛选免疫调节剂和免疫抑制剂,评估其对免疫细胞功能的影响。

*免疫毒性评价:MLC可用于评估新药的免疫毒性,确定潜在的免疫副作用。

*免疫监测:MLC可用于免疫监测,跟踪免疫系统对治疗或疾病进展的反应。

具体应用示例

*器官移植:MLC在器官移植中的应用已取得显著进展。例如,在肾移植中,MLC可用于评估供体和受体之间的组织相容性,降低急性排斥的风险。

*自身免疫疾病:MLC已用于探索自身免疫疾病的机制。例如,在多发性硬化症中,MLC研究发现髓鞘基本蛋白特异性T细胞在疾病发病中的关键作用。

*癌症免疫治疗:MLC在癌症免疫治疗中发挥着重要作用。例如,在黑色素瘤中,MLC可用于识别肿瘤抗原,并开发基于抗原的特异性免疫治疗。

展望

MLC作为一种经典的免疫学技术,在基础研究和临床应用中具有广泛的前景。随着技术的发展和对免疫机制的深入理解,MLC将继续在免疫学、移植学和肿瘤学领域发挥至关重要的作用。第七部分混合淋巴细胞培养中的实验技术关键词关键要点混合淋巴细胞培养原理

1.混合淋巴细胞培养技术是体外研究免疫细胞相互作用的有效手段,原理是将来自不同个体的淋巴细胞混合培养。

2.在混合淋巴细胞培养中,主要反应细胞为T淋巴细胞,它们识别不同个体之间的组织相容性抗原(MHC),进而诱发增殖和分化。

3.混合淋巴细胞培养结果的解读主要基于淋巴细胞增殖和细胞因子释放情况,增殖反应强度反映供体和受体之间的MHC差异程度。

混合淋巴细胞培养技术

1.混合淋巴细胞培养一般使用外周血单核细胞(PBMC)或分离的T淋巴细胞,并将其在含血清的培养基中培养。

2.为了评估T淋巴细胞对MHC抗原的反应性,通常在培养中设置阳性对照(来自不同个体的PBMC)和阴性对照(来自同一个体的PBMC)。

3.细胞增殖可以通过[3H]-胸苷掺入法或计算机辅助流式细胞术进行评估,细胞因子释放可通过ELISA或流式细胞术检测。

混合淋巴细胞培养中的调节细胞

1.混合淋巴细胞培养中存在多种调节细胞,如调节性T细胞(Treg)和树突状细胞(DC),它们能抑制或增强T细胞反应。

2.Treg细胞表达Foxp3转录因子,通过释放免疫抑制因子来抑制T细胞增殖和细胞因子释放。

3.DC介导抗原呈递并激活T细胞,同时也能通过分泌细胞因子调节T细胞反应的极化。

混合淋巴细胞培养中的细胞因子

1.混合淋巴细胞培养中释放的细胞因子决定了T细胞反应的性质,主要包括促炎细胞因子(如IFN-γ、TNF-α)和抗炎细胞因子(如IL-10)。

2.促炎细胞因子促进Th1细胞反应,导致细胞毒性T细胞的产生,而抗炎细胞因子抑制Th1细胞反应,促进Th2细胞反应。

3.细胞因子相互作用形成复杂的网络,调节混合淋巴细胞培养中免疫细胞的平衡。

混合淋巴细胞培养在移植免疫中的应用

1.混合淋巴细胞培养是评估移植供受者配型的重要手段,能预测移植后受者的免疫反应和排斥风险。

2.混合淋巴细胞培养结果与移植后存活率相关,阳性反应预示着较高的排斥风险,而阴性反应则提示较低的排斥风险。

3.混合淋巴细胞培养有助于指导移植决策,如供受者选择、免疫抑制剂的应用和移植后随访计划。

混合淋巴细胞培养在疾病研究中的应用

1.混合淋巴细胞培养可用于研究自身免疫性疾病的发病机制,如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮。

2.通过混合患者和健康个体的淋巴细胞,能检测患者淋巴细胞中针对自身抗原的反应性。

3.混合淋巴细胞培养有助于识别自身抗体和T细胞受体,为自身免疫性疾病的诊断和治疗提供线索。混合淋巴细胞培养中的实验技术

混合淋巴细胞培养(MLC)是一种体外实验技术,用于评估供体和受体之间的免疫兼容性。该技术通过将供体淋巴细胞与受体淋巴细胞共培养来实现,并监测免疫细胞群体的增殖和分化。

实验原理

MLC依赖于供体和受体淋巴细胞之间主要组织相容性复合体(MHC)分子差异的识别。当供体淋巴细胞遇到受体淋巴细胞时,它们识别受体的MHC分子为外来,并对其做出免疫反应。这种反应会导致供体淋巴细胞的增殖和分化成效应细胞,如细胞毒性T细胞和辅助T细胞。

实验步骤

MLC实验涉及以下步骤:

1.细胞分离:从供体和受体供体中分离淋巴细胞。

2.共培养:将供体和受体淋巴细胞以特定比例共培养在培养基中。

3.培养条件:将共培养物在37°C、5%CO2温育5-7天。

4.放射性胸苷掺入:在培养结束时,向共培养物中加入放射性胸苷,测量供体淋巴细胞的增殖。

5.流式细胞术分析:使用流式细胞术分析共培养物中不同免疫细胞群体的百分比和活化状态。

实验指标

MLC实验的指标包括:

1.增殖指数:放射性胸苷掺入的测量值,反映供体淋巴细胞增殖的程度。

2.细胞因子释放:共培养物中细胞因子(如白细胞介素-2、干扰素-γ)的释放,表明供体淋巴细胞的活化状态。

3.免疫细胞群体的百分比:使用流式细胞术分析的供体和受体淋巴细胞群体的百分比,包括CD3+T细胞、CD4+辅助T细胞、CD8+细胞毒性T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞。

4.细胞表面分子的表达:使用流式细胞术分析供体和受体淋巴细胞上细胞表面分子的表达,如MHC分子、活化受体和抑制性受体。

数据解释

MLC实验结果可用于评估供体和受体之间的免疫兼容性。强烈的MLC反应(高增殖指数、高细胞因子释放)表明供体和受体之间存在MHC差异,并可能导致移植排斥。相反,弱的MLC反应表明较低的免疫反应性,并可能与移植存活率较高相关。

临床应用

MLC技术广泛用于以下临床应用:

1.器官移植:评估供体和受体之间的免疫兼容性,以减少移植排斥的风险。

2.骨髓移植:评估骨髓供体和受体之间的免疫兼容性,以降低移植物抗宿主病的风险。

3.免疫缺陷:评估患者免疫功能,以确定是否需要免疫治疗。

研究应用

MLC技术还用于基础免疫学研究,包括:

1.T细胞活化机制:研究供体和受体淋巴细胞之间的相互作用,以及T细胞活化所需的信号通路。

2.免疫耐受:研究抑制MLC反应的机制,以更好地理解免疫耐受在移植和自身免疫疾病中的作用。

3.免疫疗法:评估免疫疗法,如抗CTLA-4和抗PD-1抗体,对MLC反应的影响。第八部分混合淋巴细胞培养的

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