第3章第2节第1课时目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建

第2节基因工程的基本操作程序第1课时目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建题组一目的基因的筛选与获取1．(2023·陕西西安高二调研)基因工程操作“四步曲”的正确顺序是()①目的基因的筛选与获取②将目的基因导入受体细胞③基因表达载体的构建④目的基因的检测与鉴定A．①②③④ B．④①③②C．①③②④ D．③①②④2．下列关于PCR技术的叙述，正确的是()A．PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B．该技术需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶C．该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的D．该技术应用DNA半保留复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件3．用PCR扩增下面的DNA片段：5′GACCTGTGGAAGC……CATACGGGATTG3′3′CTGGACACCTTCG……GTATGCCCTAAC5′供选择的引物有：①5′GACCTGTGGAAGC3′②5′CATACGGGATTG3′③5′GTATGCCCTAAC3′④5′CAATCCCGTATG3′共四种，应选择()A．①②B．②③C．③④D．①④4．(2023·河北邢台高二月考)用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，经四轮循环后产物中有五种不同的DNA分子。下列有关叙述错误的是()A．第一轮循环得到2个DNA分子，即①②各一个B．第二轮循环得到4个DNA分子，即①②③④各一个C．第三轮循环得到8个DNA分子，其中有2个是等长的，也就是有2个⑤D．第四轮循环得到16个DNA分子，其中有4个⑤题组二基因表达载体的构建5．基因工程的核心是构建基因表达载体，下列不属于载体作用的是()A．载体能防止目的基因被受体细胞限制酶“切割”B．载体能协助目的基因在受体细胞中复制C．载体含有启动子和终止子协助目的基因表达D．载体具有标记基因，便于筛选含目的基因的受体细胞6．下列关于基因表达载体的说法，不正确的是()A．基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤B．基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子、标记基因等C．终止子位于目的基因的下游，能够终止翻译过程D．不同的目的基因所需的启动子不一定相同7．(2023·银川高二阶段考)科学家利用质粒(如图)成功构建了蛛丝蛋白基因的重组质粒，并在家蚕丝腺细胞中获得大量蛛丝蛋白。下列有关说法错误的是()A．为防止目的基因自身环化，可以用限制酶XbaⅠ和SacⅠ来切割目的基因B．构建基因表达载体时选用蚕丝蛋白基因的启动子利于基因在家蚕丝腺细胞中表达C．启动子是DNA聚合酶的识别和结合部位，可以驱动遗传信息的转录D．基因表达载体中的标记基因可以用来鉴别与选择含有蛛丝蛋白基因的受体细胞8．(2023·江苏南通高二期中)如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列有关叙述正确的是()注：AmpR为氨苄青霉素抗性基因，TetR为四环素抗性基因。A．可选择的限制酶组合是酶E和酶GB．所选用的受体菌不能含有AmpR和TetR基因C．用含氨苄青霉素的培养基就能筛选出含重组质粒的受体菌D．同时用三种限制酶处理图中质粒，电泳后可得到3个条带9．RT－PCR是以提取的RNA为模板，经逆转录获得与之互补的DNA(cDNA)序列，再以cDNA序列为模板进行目的片段的扩增，具体过程如图所示。下列有关RT－PCR的叙述，正确的是()A．过程1需要使用耐高温的DNA聚合酶B．过程2中的引物B可与mRNA互补配对C．游离的脱氧核苷酸只能加到引物的5′端D．RT－PCR可用于对RNA病毒的检测与鉴定10．研究人员用如图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒(图中标注了相A．构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶B．使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组C．能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙11．(2023·哈尔滨高二期末)下列有关PCR的叙述，错误的是()A．PCR的原理是DNA半保留复制，解旋和复制不是同时进行的B．PCR的过程主要包括变性→延伸→复性，温度逐渐降低C．PCR技术扩增时，一个DNA分子经过n轮复制共需引物2n－1对D．常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物12．聚合酶链式反应(PCR)是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术。下列关于PCR引物的叙述，不正确的是()A．为保证模板链与引物结合的效率，两种引物之间尽量避免存在互补序列B．为了便于将扩增的DNA片段与载体连接，可在引物的3′端加上限制酶识别序列C．在两种引物上设计加入不同的限制酶识别序列，主要目的是使目的基因定向插入载体并可避免目的基因自身环化D．复性所需的温度、时长和延伸所需的温度、时长均与引物有关13．基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题：(1)生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是______________。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_______________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的______________________________。(2)目前在PCR反应中不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是______________________________________________________________________________________________________。(3)含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶对DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏细胞自身的DNA，其原因可能有：①___________________________________________________________________________________________________________________________________；②_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(90℃以上)、低温复性(50℃左右)、适温延伸(72℃左右)三个步骤构成一个循环，为使得DNA聚合酶能够重复利用，选用的酶应在_______处理后仍然具备催化活性。14．(2023·江苏镇江高二联考)某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图1所示，请回答下列问题：(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于____________。(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________，也不能______________________________________________。(3)在构建重组质粒时，应选用______________________两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。