农作物种子检验员专业知识总汇测试题含答案

农作物种子检验员专业知识总汇

重要内容:水分测定、重量测定、生活力的四哩测定、活力测定、品种真实性

及品种纯度的室内测定、品种纯度的电泳测定、转基因种子特定特性测定、种子健

康测定、田间检验、小区种植鉴定、发芽试验

水分测定

1、种子水分是指种子内自由水和束缚水的重量占种子原始重量的百分率。

2、种子水分测定方法:烘干减重法（低恒温烘干法、高恒温烘干法、高水分预

先烘干法）、快速测定法（电阻式水分测定法、电容式水分测定法、微波式水分测定

法）

3、水分测定最常用的是烘干减重法。烘干减重法是以湿重为基础，并按规程

规定的程序将种子样品在烘箱内烘干，用失去水分重量占供检样品原始重量的百分

率来表示种子水分。

4、高温烘干法适用于下列种类:芹菜、石刁柏、燕麦属、甜菜、西瓜、甜瓜

属、南瓜属、胡萝卜、甜养、苦养、大麦、葛苣、番茄、苜蓿属、草木樨属、烟

草、水稻、黍属、菜豆属、豌豆、鸦葱、黑麦、

2?[130-133]条件下，狗尾草属、高粱属、菠菜、小麦属、巢菜属、玉米。

高恒温烘干法是指130?

烘干1个小时。高温烘干法测定时，对检验室空气相对湿度没有特别要求。

5、低恒温烘干法适用于下列种类:葱属、花生、芸苔属、辣椒属、大豆、棉

属、向日葵、亚麻、萝卜、篦麻、芝麻、茄子。低恒温烘干法是指103?2?条件

下，烘干8个小时。低温烘干法必须在相对湿度较低（70,以下）的室内进行，否则

会影响其准确性。

6、高恒温烘干法和低恒温烘干法主要的区别:是烘干时的温度高低和时间长短

的不同（因为像油料作物如果温度太高，除水分外的其他成分也会变质或挥发，只

能用低恒温烘干法）。

7、当需磨碎的禾谷类作物种子水分超过18%,豆类和油料作物种子水分超过

16%,就必须采用高水分预先烘干法。

8、水分测定的标准程序为：（1.）铝盒恒重:烘干干净铝盒，130?烘1小时，

取出冷却称重，再继续烘30分钟冷却称重，直至两次烘干结果误差小于或等于

0.002g,取两次重量的平均值。（2）预调烘箱温度:低恒温烘干法103?2?,高恒温

烘干法130T33?。（3）3、样品制备:取样时先将密闭容器内的样品充分混合（不应

用手直接接触种子），从中分别取出两个独立的试验样品15,25g,放入磨口瓶中。

需磨碎的样品按表11-1要求进行处理后立即装入磨口瓶中备用，最好立即称样，

以减少样品水分变化。（切记:应该分别取两个样品，分别磨碎，并从两个磨碎样品

中各取一个独立的重复样品，而不是从一个磨碎样品中取两个重复样品。）剩余的

送验样品应继续存放在密闭容器内，以备复检。（4）称样烘干:将处理好的样品在磨

口瓶内充分混合，用感量0.001g的天平称取4.000,5.000g试样两份，分别放入经

过恒重的铝盒，记下盒号、盒重和样品的实际重量，摊平样品，应把盒盖打开，放

在铝盒基部，放入烘箱，铝盒距温度计水银球2,2.5cm。当箱内温度回升至规定温

度时开始计时（切记:计时应从烘箱温度回升至工作温度开始），烘干lh或8h

后，戴好纱线手套，打开箱门，迅速盖好盒盖，取出铝盒，放在干燥器中冷却到室

温（约需30,45分钟）后称重。（5）.结果计算和填报:根据烘后失去的重量计算种子

水分百分率，两次测定结果的容许差距不得超过0.2%,如超过必须重新测定，最

后填报结果保留一位小数。

9、高水分预先烘干法的测定程序为：第一次称取两份样品各25g（?0.02g精

度接近2mg）,置于直径大于8cm的样品盒中，在103?2?烘箱中预烘30min,油料

种子在70?预烘Ih,种子摊成一薄层（厚度不超过2mm）。干燥后的材料在室内冷却

2h,然后称重。第二次将已初步烘干的种子磨碎，从中称取5g试样两份，用低恒

温（103?8小时）或高恒温烘干法（130-133?1小时）烘干、冷却、称重、计算百分

率。

10、对于低恒温烘干法和高恒温烘干法，应根据烘后失去的重量计算种子水分

百分率，公式如下：

1

M2,M3

种子水分觥），X100

M2,Ml

式中:Ml一—样品盒和盖的重量,g;M2一一样品盒和盖及样品烘前重,g;M3-

一样品盒和盖及样品烘后重,g。

两次测定结果的容许差距不得超过0.2%,如超过必须重新测定，最后填报结果

保留一位小数。

11、高水分预先烘干法测定的结果计算

样品的原始水分的百分率可以用第一次和第二次所得结果并按下列公式计算：

S1S2X

种子水分（,），S1S2,,

100

式中:S1一—第一次整粒种子烘干后失去的水分，祝（计算时不带给

S2——第二次磨碎种子烘后失去的水分，%o

重量测定

1、种子千粒重的含义:是指测定一定数量种子的重量,通常是指测定1000粒种

子的重量，即千粒重。种子千粒重是指种子质量标准规定水分的1000粒种子的重量,

以克为单位。千粒重测定原则是从充分混合的净种子中随机数取一定数量的种子,

称其重量。

2、千粒重测定目的和意义：（L）种子千粒重反映种子的饱满程度,是种子质量

的指标之一。（2.）根据千粒重，可以做到精量播种，节约用种。（3）.千粒重是作物产

量构成的要素之一。

3、测定方法:分为百粒法、千粒法和全量法三种。

4、百粒法测定程序：（1）.数取试样:从净度分析后充分混合的净种子中，随机数

取试验样品8个重复,每个重复100粒。

（2.）试样称重:8个重复分别称重,小数位点保留位数与净度分析中的规定相

同。（3）.检查重复间的容许变异系数，计算实测千粒重。（4）.换算成规定水分下的

千粒重。（5.）结果报告。

5、千粒法测定程序：⑴.数取试样:从净度分析后充分混合的净种子中，随机数

取试验样品2个重复,大粒种子每个重复500粒,中小粒种子每个重复1000粒。（2）

试样称重：2个重复分别称重，小数位点保留位数与净度分析中的规定相同.⑶.检

查重复间的容许变异系数,计算实测千粒重，两份重量的差数与平均数之比不能超

过去5%,否则再做一份重复,直至达到要求.取差数最小的两份重复平均数来计算千

粒重。（4）.换算成规定水分下的千粒重。=实测千粒重*[1-实测水分如/（I-规定水

分%）（5）.结果报告。

6、全量变法测定程序：（1）.数取试样:数取净度分析后的全部净种子的种子总

粒数。（2.）试样称重:小数位点保留位数与净度分析中的规定相同。（3）.换算成规

定水分下的千粒重。（4）.结果报告。

生活力的四哩测定

1、四噤测定可以测定出休眠种子样品的生活力百分率。

2、四理测定方法于1942年由德国的G.Lakon教授发明，第2次世界大战期

间传入美国。随着四理测定技术的发展，ISTA（国际种子检验协会）于1950年成立

四哩测定技术委员会，致力于种子四哩测定技术的发展。

3、种子生活力（seedviability）是种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命

力。

4、种子生活力测定的意义：（1.）可以测定休眠种子的生活力；（2.快速预测种子

发芽能力;种子贸易中，常因时间紧迫，不可能采用正规的发芽试验来测定发芽

力，这是因为发芽试验所需的时间更长。林木种子可用生活力代替发芽力。

5、四噗染色测定的原理:在种子组织活细胞内脱氢酶的作用下，无色的氯化三

苯基四氮理，接收

2

活种子代谢过程中呼吸链上的氢，在活细胞里变成还原态的红色、稳定、不扩

散的三苯基甲月替（TriphenylFormazam）。可根据四哩染成的颜色和部位，区分

种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。2,3,5-氯化三苯基四氮哩（无色）

三苯基甲月替（红色）

6、四噤测定适用的范围：收获后需马上播种的种子;具有深休眠的种子;发芽缓

慢的种子;要求估测发芽潜力的种子。

另外，也适用于测定发芽末期个别种子的生活力，特别是怀疑有休眠时;测定

已萌发种子，或收获期间存在的不同类型和/或加工的损伤（热害、机械损伤或虫蛀

等）种子;解决发芽试验中存在的问题，如不清楚不正常幼苗产生的原因或怀疑杀菌

剂的处理效果等。

7、四哩测定方法的特点：四噗测定是一种世界公认、广泛应用、实用方便、省

时快速、结果可靠的种子生活力检验方法。具体地说具有以下几个特点：（1.原理可

靠，结果准确。如能正确使用四喋测定方法，四理测定结果与发芽率误差一般不会

超过3%5九（2.不受休眠限制。（3.方法简便、省时快速。（4.成本低廉。

四嘤测定也有其缺陷:如对种子检验员经验和技能要求较高;结果不能提供休眠

的程度;处理种子不会像发芽试验能反映药害情况。

四嗖测定程序

1、试验样品的来源数取

试验样品来源必须是净种子。净种子可以从净度分析后的净种子中随机数取，

也可以从送验样品中直接随机数取。一般随机数取100粒种子，2,4个重复或少于

100粒的若干副重复。如果是测定发芽末期休眠种子的生活力，则可单用试验末期

的休眠种子。委托检验可以直接从经充分混合的种子样品中随机数取种子。

2、种子预处理:在正式测定前，对所测种子样品需经过预处理（预措预湿），其

主要目的是使种子加快和充分吸湿，软化种皮，方便样品准备和促进活组织酶系统

的活化，以提高染色的均匀度、鉴定的可靠性和正确性。预措--是指在种子预湿

前除去种子的外部附属物和在种子非要害部位弄破种皮，如水稻种子需脱去内外移

壳，豆科硬实种子刺破种皮等，但须注意，预措不能损伤种子内部胚的主要构造。

绝大多数种子不须进行预措处理，但有一些种子在预湿前要进行预措处理。预湿是

四喋染色测定的必要步骤。预湿方法目前常用的有以下两种方法：（1）（缓慢润湿:缓

慢润湿是按种子发芽试验所采用方法，将种子放在纸床上或纸巾间，让其缓慢吸

湿。该法适用于那些直接浸在水中容易破裂和损伤的种子，以及已经劣变的种子或

过分干燥的种子。缓慢润湿可采用下面两种方法:？纸卷或纸间预湿;？纸床上预湿

（2）（水中浸渍:水中浸渍是将种子完全浸入水中，种子吸水快、均匀，并可缩

短预湿时间。该法适用于种子直接浸入水中不会造成组织破裂损伤，并不会影响鉴

定结果的种子种类，包括水稻、小麦、大麦、燕麦、黑麦草、黑麦、玉米等，详见

表14-1„浸种温度一般采用20,30?或30?水温。

3、染色前的样品准备

采用适当的方法使胚的主要构造和（或）活的营养组织暴露出来。（1（不须样品

准备，种皮渗水性良好的豆类种子，在四嗖溶液里染色时，就能随着四嘤溶液的渗

入而吸胀，并在染色后剥去种皮就可正确鉴定，这类种子不须样品准备。（2（沿胚

纵切；（3（近胚纵切；（4（上半粒纵切；（5（斜切种子；（6（剥去种皮；（7（横切胚轴和盾片

4、四哩染色：四口坐溶液必须完全淹没种子，溶液不能直接露光，因为光线可能

使四哩盐类还原而降低其浓度，影响染色效果。将经过样品准备或不须准备的规定

数量种子分别放入四嘤溶液里染色。小粒种子可用直径6cm培养皿，大、中粒种子

可用9cm培养皿或更大的容器，特别细小的种子可包在滤纸内，分别放入容器里。

然后加入适宜浓度的四喋溶液，移置一定温度的恒温箱内进行染色反应。

5、鉴定前处理:为了确保鉴定结果的正确性，还应将已染色的种子样品，加以

适当的处理，再进一步使胚的主要构造和活的营养组织明显地暴露出来，以便观察

鉴定。

6、观察鉴定:一般鉴定原则是，凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光

泽的鲜红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。凡是胚的主要构造局部不染色

或染成异常的颜色和光泽，并且活营养组织不染色部分已超过二分之一，或超过容

许范围，以及组织软化的，完全不染色或染成无光泽的淡红

3

色或灰白色，且组织已软化腐烂或异常、虫蛀、损伤的均为无生活力种子。

活力测定

1、种子活力是种子质量的重要指标之一,也是反映种用价值的主要组成部分，

与种子田间出苗质量密切相关。

“种子活力是指在广泛的环境条件下，决定可接受发芽率的种子批的活性和性

能那些特性的综合表现”。并作了进一步的阐述，种子活力不是一种简单的测定

概念，而是一种能表达如下有关种子批性能多种特性的综合概念：（1）种子发芽和幼

苗生长速率和整齐度；（2）种子在不利环境条件下的出苗能力；（3）贮藏后，特别是能

保持发芽力的性能。高活力种子批即使在不适宜的环境条件下，仍具有良好性能的

潜力。

2、（高活力种子的生产优越性:种子活力是种子重要的品质，高活力种子具有

明显的生长优势和生产潜力。（1）提高田间出苗率。（2）抵御不良环境条件。（3）增

强对病虫、杂草的竞争能力。（4）抗寒力强，适于早播。（5）节约播种费用。（6）增

加作物产量。（7）提高种子耐藏性。可见，高活力种子对农业生产具有十分重要的

意义。

3、活力、生活力和发芽力的区别及关系：（1（种子生活力是指种子发芽的潜在

能力或种胚具有的生命力，通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率表示。

（,（种子发芽力是指种子在适宜条什下（检验室控制条件下）长成正常植株的能力，

通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总数的百分率，即发芽率表示。

、《国际种子检验规程》指出，在下列6种情况下，如果鉴定正确，生活力测

定和发芽率测定的4

结果基本是一致：

?无休眠、无硬实或通过适宜的预处理破除了休眠和硬实;？没有感染或已经过

适宜的清洁处理;？在加工时未受到不利条件或贮藏期间未用有害化学药品处理;？尚

未发生萌芽;？在正常或延长的发芽试验中未发生劣变;？发芽试验是在适宜的条件下

进行的。

5、种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中，仍然表现出

活力的差异。通常高发芽率的种子具有较高活力，但两者不存在正相关。

6、种子活力测定方法，包括两种方法：电导率测定、加速老化测定。

加速老化试验

1、原理:加速老化试验，以下简称AA测定）是根据高温（40,45?）和高湿（100,

相对湿度）能导致种子快速劣变这一原理进行测定。高活力种子能忍受逆境条件处

理，劣变较慢;而低活力种子劣变较快，长成较多的不正常幼苗或者完全死亡。目

前AA测定主要用于两方面，一是预测田间出苗率;二是预测耐藏性。2、适用范围

与局限性：《国际种子检验规程》所规范的AA测定法适用于大豆种子；

2、电导率测定

1、高活力种子细胞膜完整性好，浸入水中后渗出的可溶性物质或电解质少，

浸泡液的电导率低。电导率与田间出苗率成显著的负相关，借此可用电导率的高低

判别种子活力的高低。大粒豆类种子的电导率结果提供比标准发芽与田间出苗率更

强的相关性。2、适用范围与局限性:适用于豌豆种子;ISTA活力手册指出该法也适

用于大粒豆科种子（特别是大豆、绿豆等）、棉花、玉米、番茄、洋葱等种子。

品种真实性及品种纯度的室内测定

1、品种真实性和品种纯度是构成种子质量的两个重要指标，是种子质量评价

的重要依据。这两个指标都与品种的遗传基础有关，因此都属于品种的遗传品质。

2、品种纯度检验应包括两方面内容，即品种真实性和品种纯度。品种真实性

是指一批种子所属品种、种或属与文件描述是否相符。如果品种真实性有问题，品

种纯度检验就毫无意义了。品种纯度是指品种个体与个体之间在特征特性方面典型

一致的程度，用本品种的种子数（或株、穗数）占供检验本作

4

物样品数的百分率表示。

3、品种纯度检验的方法很多，在实际应用中，理想的测定方法要达到4个要

求:测定结果在不同实验室或同一实验室能重演;方法应简单易行;省时快速;成本低

廉。

4、第一大类形态鉴定又分为籽粒形态测定、种苗形态测定和植株形态测定。

第二大类物理化学法鉴定，又分为物理的方法和化学方法。物理方法如荧光鉴

定法(fluorescencetest)等，难以满足品种纯度准确测定的要求。化学方法主要

依据化学反应所产生的颜色的差异区分不同品种，如苯酚染色法等。第三大类方法

生理生化方法，是利用生理生化反应和生理生化技术进行品种纯度测定。以生理生

化反应为基础的有愈伤木酚染色法，光周期反应鉴定法，除草剂敏感性鉴定法等。

这些方法鉴别品种的能力较低，因此，测定结果不太准确。以生理生化技术为基础

的方法有电泳法鉴定、色谱法鉴定、免疫技术鉴定等。电泳法相对技术较为简单，

依据蛋白质或同工酶电泳，可以相对较准确地测定品种纯度，是目前品种纯度测定

中较为快速准确的方法。

第四大类细胞学方法鉴定。第五大类分子生物学方法。

5、室内纯度测定的基本程序:从送验样品中随机数取一定数量的样品，测定异

品种种子或杂株数，再计算样品纯度。

品种纯度测定的送验样品的最小重量应符合表16-1的规定。样品纯度按下列

公式计算：有时需要将测定结果与规定值比较。测定的结果(x)是否符合国家种子

质量标准值或合同、标签值(a)要求可利用表16-2判别，如果,a-x,?容许差距，则

说明不符合国家种子质量标准值或合同、标签值要求。

品种纯度的形态测定

1、品种纯度的形态测定是纯度测定中最基本的方法，又可分为籽粒形态测

定、种苗形态测定和植株形态测定。

2、生长箱测定

生长箱测定可用于幼苗和植株形态测定。该方法可保证全部幼苗和植株都生长

在同样的条件下，其品种形态特征的差异是遗传基础的表达。

生长箱测定，可采用两种方法:第一种方法，给予幼苗加速生长发育的条件，

可以鉴定如田间植株一样的许多性状，而大大缩短测定时间。第二种方法，将种子

或植株种植在特殊逆境条件下，可对品种进行逆境反应差异的鉴定。

品种纯度的快速测定

1、在品种纯度的测定中通常把物理法鉴定、化学法鉴定等在短时间内测定品

种纯度的方法归为快速测定方法。

2、苯酚染色法

苯酸染色法的机理:苯酶染色法已作为ISTA和我国国家标准。苯酚染色法的机

理有两种观点，一种认为是酶促反应，另一种认为是化学反应。该反应受Fe++、

Cu++等双价离子催化，可加速反应进行。Na+离子（NaOH、Na2c03）等对该反应有抑

制作用。

苯酚染色的方法:麦类⑴国际标准法数取净种子400粒，每重复100粒。按

以下方法测定。将小麦、大麦、燕麦种子浸水18,24小时，用滤纸吸干表面水分，

放入垫有1%苯酚溶液湿润滤纸的培培养皿内（腹沟朝下），室温下小麦保持4小

时，燕麦2小时，大麦24小时后即可鉴定染色深浅。小麦观察颖果颜色，大麦、

燕麦观察内外移的颜色，一般染后的颜色可分为不染色、淡褐色、褐色、深褐色、

黑色五种，将与基本颜色不同的种子取出作为异品种。（2）快速法将小麦种子用

1.0%的苯酚浸15分钟，取出放在铺有1%苯酚湿润过的滤纸的培养皿中（腹沟朝

下），并盖上贴有同样滤纸的培养皿盖。置30,40?温箱内，染色0.5,1小时，观察

染色结果，区分本品种与异品种。

3、、愈伤木酚染色法

愈伤木酚是专门用于大豆品种鉴别的方法。根据大豆种皮内过氯化物酶活性的

高、低，把大豆品种分为两大类。其原理是:大豆种皮内的过氧化物酶，可催化过

氧化氢分解产生游离氧基，游氧基可使无色的愈伤木酚氧化产生红褐色的邻甲氧基

对苯醍，种皮内含有的过氧化物酶活性越高，单位时间内产生

5

的红褐色的邻甲氧基对苯醍越多，溶液的颜色越深。反之，颜色越浅。不同品

种由于遗传基础不同，过氧化物酶的活性不同，在一定条件下，溶液染色的深浅不

同，依此区分不同品种。4、荧光分析法:紫外光能量较高，当照射物体时，就会

产生光激发现象，被激发的电子很不稳定，由高能态转变为低能态时，便会发现一

种可见光一一荧光。因作物和品种不同，其种皮结构和化学组成不同，在紫外光照

射下发出荧光的波长不同，因而产生不同颜色。荧光分析可对种子或幼苗进行测

定。

品种纯度的电泳测定

一、品种纯度电泳测定的发展

电泳是指溶液中的带电粒子在电场中移动的现象。这一现象在19世纪就已发

现，并用于胶体化学的研究中。直到1937年Tiselius开发了蛋白质泳技术，并成

功地用这种方法分离了血清蛋白之后，才使这一技术在生物研究中得到广泛地应

用。电泳的种类繁多，有不用支持物电泳和用支持物的电泳两大类，在生物研究

中，支持物电泳用的最多，特别是聚丙稀酰胺凝胶电泳(PAGE)因其凝胶透明度高、

弹性好、无吸附性、浓度易控制，应用最为广泛。聚丙稀酰胺凝胶电泳又分为圆盘

电泳和平板电泳两种，在品种纯度测定中主要应用平板电泳。

品种纯度的电泳测定

目前鉴定品种的常用电泳方法：

(1)国际种子检验协会

鉴定小麦和大麦品种醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳标准程序、鉴定豌豆属和黑

麦草属的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准方法、超薄层等电聚焦电泳测定杂交玉米

种子纯度的标准方法列入国际种子检验规程，在全世界推广应用。

(2)国际植物新品种保护联盟于1994年制订有关电泳技术标准将分析小麦高分

子量麦谷蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法、分析大麦醇溶蛋白SDS-聚丙烯酰

胺凝胶电泳方法、分析大麦醇溶蛋白的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法、分析玉米同

工酶的淀粉凝胶电泳方法列入DUS检测应用。

(3)我国GB/T3543农作物种子检验规程已将ISTA规程的鉴定小麦和大麦品种

的聚丙烯酰胺凝胶电泳标准参照方法列入应用。2001年农业部颁布了“玉米种子

纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法”(NY/T449,2001)。

品种纯度的电泳测定

二、电泳法测定品种纯度的原理

(-)电泳法测定品种纯度的遗传基础

电泳法测定品种纯度主要利用电泳技术对品种的同工酶及蛋白质的组分进行分

析，找出品种间差异的生化和分子指标，以此区分不同品种。

目前品种鉴定主要以同工醐和蛋白质为电泳对象。同工酶是指同一生物体或同

一组织中催化相同化学反应，结构不同的一类醐。从遗传法则(DNA?RNA?蛋白质(或

酶))知道，蛋白质或酶组分的差异最终是由于品种遗传基础的差异造成的，因此分

析酶及蛋白质的差异从本质上说是分析遗传的差异，即品种差异，利用先进的电泳

技术可非常准确地分析种子蛋白质或同工酶的差异，进而区分不同品种，测定品种

纯度。

品种纯度的电泳测定

聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理:聚丙烯酰胺通过交联剂(甲叉双丙烯酰胺，Bis)在

催化剂的作用下聚合而成的高分子胶状聚合物。其凝胶透明，有弹性，机械强度

高，可操作性强;化学稳定性好，对pH、温度变化稳定；该凝胶属非离子型，没有

吸附和电渗现象;并通过改变丙烯酰胺和交联剂的浓度可有效控制凝胶孔径的大

小。因此，在品种纯度电泳分析中广泛应用。蛋白质(或酶)为两性电解质；分子筛

效应；电荷效应。

转基因种子特定特性测定

1、种子批中GMO含量测定的目的:一是检测，确定种子批中是否含有GMOs;二

是鉴定，如果检测的结果是阳性的，需要通过鉴定知道GMOs是否是经授权的，如

果未经授权，种子批将被拒绝。

6

如果是经授权，则进一步定量分析;三是定量，即通过定量分析，确定种子批

中的GMO是否超过极限值。

2、目前常用大田作物(玉米、大豆和棉花等)GM种子检测方法主要有：(1).PCR

定性和定量分析；

(2).酶联免疫检测(ELISA):(3).生物测定(表现型性状生化检测等)。

3、检测技术流程:基于PCR的种子样品分析流程如下：

(1).根据ISTA规程杆样。杆样前，杆样器等用具必须用吸尘器清扫干净。

(2)选择测定方法和测定方案。一般实验室的鉴定，已经知道目的基因，只针

对这一基因进行鉴定，方法有针对性。而商业鉴定，不知道是何种基因转入该作物

中，因此，需要制定测定方案。

(3)准备工作样品。至少1000粒种子重，如玉米可用1千克种子。

(4)磨粉并混匀。在测定时，种子样品应充分混和，磨碎应均匀。

(5)取粉样。

(6)DNA提取。

(7)DNA量化。

（8）PCR-定性或定量分析。

（9）评价和报告结果。

7

种子健康测定

1、种子健康测定的目的和重要性:种子健康测定主要是测定种子是否携带有病

原菌（如真菌、细菌及病毒），有害的动物（如线虫及害虫）等状况。

种子健康测定的目的和重要性主要有以下几点：（1）种子携带的病原物可以引起

田间病害，逐步蔓延，以致降低作物产量和商品价值。（2）种子的流通可以将病原

物携带到其他新的地区。（3.）了解种子的种用价值，通过种子样品的健康测定，可

推知种子批的健康状况，确定种子批是否需要进行处理以及

4）为了调查或研究目的而评估种传病害流行的情况。（5）探明种子发芽率低的

原因，处理后的效果。（

弥补发芽试验的不足。

2、未经培养检查包括直接检查、吸胀种子检查、洗涤检查、剖粒检查、染色

检查、比重检查和,，射线检查等。

培养后检查包括吸水纸法、砂床法、琼脂皿法，以及噬菌体法和血清学酶联免

疫吸附试验法等。

3、特点:种子健康测定的方法，一般要求该方法使病原体易于识别、结果有重

演性、样品间结果有可比性和简单快速等特点。但在实际检测过程中，检测结果经

常会受到一些因素的影响：

（1.其他病原菌存在可能与被测病原菌产生干扰；

2.室内检验结果通常高于田间或温室的检测结果；（

（3.有些病原菌对培养条件敏感；

4.种子已经处理；（

（5.种传病原菌生活力随着长时间的贮藏而衰退。

田间检验

一、品种的特征特性，是指品种的植物学形态特征和生物学特性。植物学形态

特征，如高矮、叶色、叶形、花色等;生物学特性，如作物的生育期、光周期、抗

逆性等。

作物性状分为质量性状和数量性状。质量性状是指由一对或几对基因控制，在

分离群体中表现为非连续分布的性状，如花色、水稻颖尖的颜色;数量性状是指由

微效多基因控制，在分离群体中表现为连续分布的性状，它可以用数量单位表示，

如株高、分麋、穗粒数，产量等。在田检过程中，应以质量性状为主，结合使用

数量性状。

变异分为可遗传变异与不遗传变异。可遗传变异是由于遗传物质发生变化（包

括基因突变、染色体畸变和重组）引起的，这种变异遗传给后代。不遗传变异也称

表型变异，是由于环境条件影响引起的变异。这里要分清楚不遗传变异与数量性状

的关系，两者都会受环境因素的影响，但数量性状是由遗传物质控制的，是可遗传

的。

杂株率是指检验样区内所有的杂株（穗）占检验样区内本作物的总株（穗）数的百

分率。散粉株率是指检验区内花药伸出颖壳并正在散粉的植株占供检样区内本作

物总株数的百分率。

淘汰值:在充分考虑种子生产者利益和较少可能判定失吴的基础上，将样区内

观察到的杂株与标准值进行比较，作出有风险接受或淘汰种子田决定的数值。

原种:用育种家种子繁殖的第一代至第三代，经确认达到规定质量要求的种

子。

大田用种：由常规原种繁殖的第一代至第三代，经确定达到规定质量要求的种

子，或杂交种子。

二、田间检验的目的与作用

1、目的:核查种子田的品种特征特性是否名副其实，以及影响收获种子质量的

各种情况，从而根据这些检查的质量信息，采取相应的措施，减少剩余遗传分离、

自然变异、外来花粉、机械混杂和其它不可预见的因素对种子质量产生的影响，以

确保收获时符合规定的要求。

2、作用：

?检查种子田的隔离情况，防止因外来花粉污染而造成的纯度降低。

?检查种子生产技术的落实情况，特别是去杂、去雄情况。

8

?检查田间生长情况，特别是花期相遇情况。

?检查品种的真实性和鉴定品种纯度，判断种子生产是否符合要求。

?通过田间检验，为种子质量谁认证提供依据。

三、田间检验的原则

1、田间检验员应识别可区分品种间的特征，熟悉种子生产方法和程序；

2、应建立品种间相互区别的特征特性描述（即品种描述）；

3、依据不同作物和有关信息（尤其是小区种植鉴定的前控结果），策划和实施

能覆盖种子田的、有代表性的、符合规定要求的取样程序和方法。

4、田间检验员应独立地对田间状况作出评价，出具检验结果报告。如果检验

时某些植株难以从特

征特性加以确认，在得出结论之前需要进行第二次或更多次的检验。

四、田间检验项目：种子生产田分为常规种子生产田和杂交种子生产田。

1、常规种子生产田检验项目；？前作、隔离条件；？品种真实性；？杂株百分

率；？其他植物株的百分率；？种子田的总体状况（倒伏、健康等情况）。

2、杂交种子生产田检验项目：？隔离条件；？花粉扩散的适宜条件；？雄性不育

程度；？串粉程度;？父母本的真实性、品种纯度；？适时先收获父本（或母本）。

五、田间检验时期

种子田在生长季节期间可以检查多次，但至少应在品种特征特性表现最充分、

最明显的时期检查一

次，以评价品种真实性和品种纯度。

常规种至少在成熟期检验一次，杂交种花期必须检验2~3次，蔬菜作物在商品

器官成熟期必须增加一次检验。

但对于大多数作物来说，花期是品种特征特性表现最充分最明显时期，所以说

花期是田间检验的最佳时期，但有时成熟期也是品种特征特性表现充分明显的时

期，所以常规品种应至少进行2次田检，杂交种应进行至少3次田检。蔬菜作物视

情况而定。

六、种子田生产质量要求

1、种子田不存在检疫性病虫害，是我国有关法规规定的强制要求。

2、前作不存在污染源。

?同种的其他品种的污染（主要是自生株的花粉污染）；

?其他类似植物种的污染（主要是收获时机械混杂而难以清除）；

?杂草种子的严重污染。

要求:种子生产者提供前作档案，证实种子田不存在自生株;油菜种子生产时、

要求种子田前作若为十字花科植物，则至少隔两年;西瓜种子田前作不应有自生

株，不允许重荐栽培。

3、隔离条件

要求:生产大田常规水稻种空间隔离20m;生产大田杂交水稻种空间隔离

200m（釉型）、500nl（粳型）；杂交玉米空间隔离300m。西瓜种子生产主要为杂交种,

基本实行套袋授粉，可以不需要隔离。

4、田间杂株率和散粉株率。（

七、田间检验程度

1、基本情况调查

?了解情况。被检单位地址;作物、品种、类别、面积等。

?隔离情况。围绕一圈检查有无污染源，是否达到隔离距离要求，自生株和杂

草的检查。

?品种真实性检查。标签的检查:生产者应保留种子批的两个标签，一个在田

间，一个自留;杂交种保留父母本的标签。真实性检查:至少检查100个穗或株，确

认品种的真实性与品种描述是否一致。

?种子生产田的生长状况。对于严重倒伏、杂草危害或另外一些原因引起生长

不良的种子田，不能进行品种纯度评价，而应该被淘汰。对于中间状态，应借助小

区种植的前控结果，作为补充信息进行评价。

9

2、取样

同一品种、同一来源、同一繁殖世代、耕作制度和栽培管理相同而又连在一起

的地块可划分为一个检验区。

样区大小、样区频率、样区分布为取样的三要素。

4N原则：如果规定的杂株标准为1/N,总样本的大小至少应为4N。例如:水稻恢

复系（R）品种纯度不低于99.5%,那么其杂株标准为1/200（即0.5阶，总样本的大

小应不少800株。总样本的大小=样区大小X样区频率，如一个样区取100株调

查，取了8个样区（样区频率），总样本的大小就是800株。要强调的是:4N原则应

是权衡观察样品的费用、时间和产生错误结论的风险，兼顾平衡了各种因素后的最

低要求。一般情况下，随着检验区面积增大，总样本的大小应大于4N;原因是检验

样本越小，误差就越大，检验结果出现错误的可能性就越大。

?样区频率；一般来说，样区的数目应随种子田大小成比例的增加，由于原

种、亲本种子的标准高，这些高纯度作物种子被检植株的数目比大田用种多。

?样区大小；样区的大小和模式取决于被检作物、田间大小、行播或撒播，自

交或异交、以及种子生长的地理位置等因素。大于10公倾的禾谷类常规种子的种

子田，取lmX20nl=20?,方向与播种方向成直角；小面积的每样区取500株（穗）。

杂交水稻和玉米，父、母本视为不同的田块分别检查和计数。水稻每样区取

500株，玉米样区内行内100株或相邻两行各50株。

?样区分布;应是随机的和广泛的。（

3、检验

主要性状通常是边设点边检验，直接在田间进行分析鉴定。在田间检验过程

中，田间检验员应采用来评定品种真实性和品种纯度，当采用主要性状难以得出结

论时结合使用次要性状。

田间检验员宜获得相应小区鉴定结果，以证实在前控中发现的杂株。杂株包括

与被检品种特征特性明显不同和不明显的植株。

利用雄性不育系进行杂交种子生产的田块（如杂交水稻生产），除记录父母本杂

株率外，还须记录检查母本雄性不育的质量。如利用显微镜检查不育系（A或s）花

粉败育程度，利用纸袋套穗自交检测结实程度。

?在检查时，如遇下列情况，可采用一些特殊的处理：

?如果种子田中有杂株，而小区种植鉴定中没有观察到，必须记录和考虑这些

杂株，以决定接受与拒绝该田块。委托检验的机构要对小区种植前控结果和田间检

验结果进行核实。如果小区鉴定和田间检验结果有较大的偏离，有必要在小区鉴定

和种子田进行进一步的检查，以获得正相关结果。样区内的杂株数杂株率

（%）,,100?种子田处于难以检查的状态。对于严重倒伏、杂草危害或另外一些原

因引起生长不良的种子田，样区内供检本作物株数不能进行品种纯度评价，而应该

被淘汰。对于中间状态，应借助小区种植的前控结果，作为补充信息进行评价。

?严重的品种混杂。如果有严重的品种混杂现象，田间检验员只需检查两个样

区，取其平均值，推算出群体，查出淘汰值。如果大于或等于淘汰值就淘汰种子

田，如果小于则继续检查。

?在某一样区发现杂株而其他样区并未发现杂株。出现这种情况表明正常的检

验程序不是很适宜。这种现象通常发生在杂株与被检品种非常相似的情况下，只能

通过非常接近的仔细检查穗部才行。4、结果计算与表示

?品种纯度

?淘汰值。对于品种纯度高于99.0%或每公顷低于1000000株或穗，需要采用淘

汰值。（P269表19—8）

,，对于行播作物（禾谷类等作物，通常采取数穗而不数株），可应用以下公式计

算每公顷植株（穗）数：

•P,1,000,000M/W式中：

•P一一每公顷植株（穰）总数；

10

•M一一每一样区内1H1行长的株（穗）数的平均值；

,W行宽（cm）。

•,，对于撒播作物，则计数0.5M2面积中的株数。撒播每公顷群体可应用以下

公式计算：

•P,20,000XN式中：

•P一一每公顷植株数;

•N一一每样区内0.5M2面积的株（穗）数的平均值。

?杂株率。对于品种纯度低于99.0%或每公顷超过1000000株或穗，用杂株率表

小O

样区内的杂株数杂株率觥），，100样区内供检本作物株数

5、检验报告

田间检验员田间检验完成后，应及时填写田间检验报告。报告应包括基本情

况、检验结果、检验意见。

田间检验员应根据检验结果，签署下列意见（三种）：

?如果田间检验的所有要求如隔离条件、品种纯度等都符合生产要求，建议被

检种子田符合要求。

?如果田间检验的所有要求如隔离条件、品种纯度等有一部分未符合生产要

求，而且通过整改措施（如去杂）可以达到生产要求，应签署整改建议。整改后，还

要通过复查，确认符合要求后才可建议被检种子田符合要求。

?如果田间检验的所有要求如隔离条件、品种纯度等有一部分或全部不符合生

产要求，而且通过整改措施仍不能达到生产要求，如隔离条件不符合要求、严重倒

伏等，应建议淘汰被检种子田。

小区种植鉴定

一、小区种植鉴定的目的

一是鉴定种子样品的真实性与品种描述是否相符，即通过对田间小区内种植的

被检样品的植株与标准样品的植株进行比较，并根据品种描述判断其品种真实性；

二是鉴定种子样品纯度是否符合国家规定标准或种子标签标注值的要求。

二、小区种植鉴定的作用

小区种植鉴定从作用来说可分为前控和后控两种。

1、前控：当种子批用于繁殖生产下一代种子时，该批种子的小区种植鉴定对下

一代种子来说就是前控，如同我国种子繁殖期间的亲本鉴定。

在种子生产，如果对生产种子的亲本种子进行小区种植鉴定，那么亲本种子的

小区种植鉴定对于种子生产来说就是前控。

2、后控:通过小区种植鉴定来检测生产种子的质量便是后控，比如对收获后的

种子进行小区种植鉴定就是后控。

我国每年在海南岛进行的异地小区种植鉴定就是后控。后控也是我国种子质量

监督抽查工作

前控可在种子生产的田间检验期间或之前进行，据此作为淘汰不符合要求的种

子田的依据之一。

3、小区种植鉴定的用途

•一是在种子认证过程中，作为种子繁殖过程的前控与后控，监控品种的真实

性和品种纯度是否符

合种子认证方案的要求。二是作为种子检验的目前鉴定品种真实性和测定品种

纯度最重要的方

法。因小区鉴定能充分展示品种的特征特性，所以该方法作为品种纯度检测的

最可靠、准确的方

法。但小区种植鉴定费工、费时。

我国实施的小区种植鉴定方式多种多样，可在？当地同季:如与大田生产同步种

植;？当地异季:如在温室或大棚内种植;？异地异季:如稻、玉米、棉花、西瓜等作物

冬季在海南省，油菜等作物夏季在青海省等进行种植鉴定。

三、标准样品

1、设置标准样品作对照的目的:是为栽培（鉴定）品种提供全面的、系统的品种

特征特性的现实

11

描述。

GB/T3543.5要求在鉴定品种真实性时，应在鉴定的各个阶段与标准样品进行

比较。

2、标准样品的分类:分标准核准样品和标准样品两类。

标准核准样品:是品种审定（登记）或品种保护管理机构掌握（保持和使用）的官

方标准样品，主要用于品种特异性、一致性和稳定性测定的对照样品。

标准样品：是种子认证机构和检验机构掌握（保持和使用）的官方标准样品，主

要作为前控和后

控，判定种子样品的品种真实性的对照样品。

标准样品的管理主要包括来源、保持和确认三个方面。

标准样品可采用育种家种子等级的种子，经确认的标准样品是提供该品种在检

测时期的真实描述，是判定检测样品的最可靠标准，它总是与官方的品种描述一起

使用，但必须记住，品种描述是有局限性，有时用于品种鉴定往往不是很准确。

?4N原则:一般来说,若品种纯度标准为X%=（N,1）X100%/N,种植株数4N即可

获得满意结果。

例：标准规定纯度为96.096,即N为25,种植4N=100株即可达到要求。

（N-l）X100%/N,96,,

96N,100N,100,N,25,即4N,100

同样计算得：98.0,纯度,种2同株;

99.9%纯度,种4000株。

如果是要测定品种纯度并与发布的质量标准进行比较（如实施种子质量监督抽

查的品种纯度小区种植鉴定），必须种植较多的株数。如果要求鉴定准确度提高，一

般实际操作种植鉴定株数比4N多。

如我国实施监督抽查的品种纯度小区种植鉴定，水稻杂交种大田用种（纯

度:96.0%）鉴定，一般种植500株。

3、小区管理

?小区种植的管理，要求保持品种的特征特性和品种的差异，做到在整个生长

阶段都能允许检查小区的植株状况。

?一般要求如同于大田生产粮食的管理工作。

?小区种植鉴定只要求观察品种的特征特性，不要求高产，土壤肥力中等即

可。对于易倒伏作物特别是禾谷类的小区鉴定，应尽量少施化肥，防倒伏。

?避免因使用除草剂和植物生长调节剂等影响植株的物征特性。

4、鉴定和记录

•?小区种植鉴定在整个生长季节都可观察，有些种在幼苗期就有可能鉴别出

品种真实性和纯度，

但成熟期（常规种）花期（杂交种）和食用器官成熟期（蔬菜种）是品种特征特性表

现最明显的

时期，必须进行鉴定。

•?记载的数据用于结果判别时，原则上要求花期和成熟期相结合，并通常以

花期为主。

•?小区鉴定记载也包括种纯度和种传病害的存在情况。

在鉴定变异株时.，田间检验员应掌握一个原则:在最后计数时.，忽略小的变

异，只计数那些非常明显的变异株，从而决定接受或淘汰种子批。

5、结果计算与容许差距

品种纯度结果表示有以变异株数目表示和以百分率表示两种方法。

?变异株数目表示：国家标种子质量标准规定纯度很高的种子，如育种家种、

原种，是否符合要求，可利用淘汰值。

淘汰值是在考虑种子生产者利益和有较少失误的基础上，把在一个样本内观察

到的变异株数与标准比较，作出符合要求的种子批或淘汰该种子批的决定。其可

靠程度与样本大小密切相关。淘汰值的推算是采用泊松(Poisson)分布，对于其他

标准计算可采用下式：

•其中R为淘汰值，X为标准所换算成的变异株数，计算的R结果舍去所有小

数位数，注意不采用

四舍五入或六入如计算纯度99.7%,种植2000株的淘汰值。1、计算标准所换

算成的变异株数

12

X,不考虑容许差距，纯度为99.7%变异株数为；X=2000X(100%-99.7%)=

6,

•2、计算淘汰值R,R=6+l.65+0.8+1=11.84,

•去掉所有小数，取其整数，得淘汰值为11。

?以百分率表示

将所鉴定的本品种、异品种(非典型株)、异作物和杂草等均以所鉴定植株的百

分率表示。小区种植鉴定的品种纯度结果可采用下式计算：

•我国现行种子质量标准和GB/T3543.5规定：

•品种纯度计数以株数为单位。

•品种纯度计算结果保留一位小数。

品种纯度是否达到国家种子质量标准、合同和标签的要求，可使用GB/T3543.5

容许差距表2进行判定。

如果种植的株数不是表中的定数时可用下式进行计算：

p,qT,1.65N

,式中:p品种纯度的数值;q100,p;N种植株数。

•例如:水稻杂交种大田用种二级，国家标准规定纯度96%,

种植500株，那么p为96,q为4,N为500,•

•求得其容许差距为T,1.5。

发芽试验

一、发芽试验的目的和意义:发芽试验的目的是测定种子批的最大发芽潜力，

据此可比较不同种子批的质量，也可估测田间播种价值。

二、有关术语

1、发芽:在实验室内幼苗出现和生长达到一定阶段，幼苗的主要构造表明在田

间的适宜条件下能否进一步生长成为正常的植株。

2、发芽率:在规定的条件和时间内（表4-1）长成的正常幼苗数占供检种子数的

百分率。

3、正常幼苗:在良好土壤及适宜水分、温度和光照条件下，具有继续生长发育

成为正常植株的幼苗。

4、不正常幼苗:生长在良好土壤及适宜水分、温度和光照条件下，不能继续生

长发育成为正常植株的幼苗。

6、未发芽的种子:在表4-1规定的条件下，试验末期仍不能发芽的种子，包括

硬实、新鲜不发芽种子、死种子（通常变软、变色、发霉，并没有幼苗生长的迹象）

和其他类型（如空的、无胚或虫蛀的种子）。

7、硬实种子:指那些种皮不能渗水的种子。如棉花种子，豆科的苜蓿、紫云英

种子等。

8、新鲜不发芽种子：由生理休眠所引起，试验期间保持清洁和一定硬度，有生

长成为正常幼苗潜力的种子。

9、幼苗的主要构造:因种而异，由根系、幼苗中轴（上胚轴、下胚轴或中胚

轴）、顶芽、子叶和芽鞘等构造组成。

10、感染:病原菌侵入活体（如幼苗主要构造）并蔓延，引起病症和腐烂。包括

初生感染（种子本身携带病原菌）和次生感染（其他种子或幼苗蔓延而被感染）

11、50%规则（50%rule）:如果整个子叶组织或初生叶有一半或一半以上的面积

具有功能，则这种幼苗可列为正常幼苗;如果一半以上的组织不具备功能，如缺

失、坏死、变色或腐烂，则为不正常幼苗。当从子叶着生点到下胚轴有损伤和腐烂

的迹象时，这时不能采用50%规则。当初生叶形状正常，只是叶片面积较小时，则

不能应用50%规则。

发芽设备

一、发芽箱和发芽室

13

?发芽箱:发芽箱可分为两类:一类是“干”型，只控制温度不控制湿度，其中

又可分为恒温和变温两种；另一类是“湿”型，既控制温度又控制湿度。我国目前

常用的发芽箱多数属于“干”型，如光照变温发芽箱。

发芽介质与发芽床

发芽床是供发芽测定的容器，由供给种子发芽水分和支撑幼苗生长的介质和盛

放介质的发芽器皿构成。

种子检验规程规定的发芽床主要有纸床、砂床以及土壤发芽床等种类。

各种发芽床都应具备保水、通气性好，无毒质，无病菌和具一定强度的基本要

求。

一、发芽介质及其要求

（纸：采用纸作为发芽介质是种子发芽试验中应用最多的一类发芽床。供作发

芽床用的纸有专用1

发芽纸、滤纸等。

一般来说，发芽纸应满足以下要求:？持水力强。吸水良好的纸，不但吸水要

快，而且持水力也要强，使发芽试验期间具有足够的保水能力，以保证对种子发芽

不断供应水分。？无毒质。纸张必须无酸碱、染料、油墨及其他对发芽有害的化学

物质。纸张的pH值应在6.0,7.5范围内。？无病菌。用纸张必须清洁干净，无病菌

污染。？纸质韧性好。纸张应具有多孔性和通气性，并具有一定强度，以免吸水时

糊化和破碎，并在操作时不致撕破和发芽时种子幼根不致穿入纸内，便于幼苗的正

确鉴定。

2（砂：采用砂作为发芽介质是种子发芽试验中较为常用的一类发芽床。砂床的

pH值应在6.0,

7.5范围内。

一般来说，用作发芽试验的砂粒应选用无任何化学药物污染的细砂，并在使用

前作如下处理:？洗涤;除去污物和有毒物质；？消毒;在130,170?高温下烘干约2

h,以杀死病菌和砂内的其他种子；？过筛;？加水拌匀，调配适宜含水量。一般加水

量为其饱和含水量的60%,80%水分。

3（土壤:土壤中应基本上不含混入的种子、细菌、真菌、线虫或有毒物质。使

用前，必须经过高温消毒。湿润发芽床的水质应纯净，不含有机杂质和无机杂

质，无毒无害，pH值在6.0,7.0范围内。

二、发芽床的种类和用法

1（纸床⑴纸上（简称TP）、（2）纸间（简称BP）、（3）褶桐纸（简称PP）。

2、砂床使用方法有两种:？砂上（简称TS）,适用于小、中粒种子。将拌好的湿

砂装入培养盒中至2,3cm厚，再将种子压入砂表层，即砂上发芽;？砂中（简称

S）,

3（土壤床：除了规程规定使用土壤床外，当纸床或砂床上的幼苗出现中毒症状

时或对幼苗鉴定发生怀疑时，或为了比较或研究目的，可采用土壤床。

4、发芽箱的温度在发芽期间应尽可能一致，温度变幅不应超过?2?。

—变温是模拟种子发芽的自然环境，一般来说，变温有利于种子渗入氧气，促

进酶活化，加速发芽。新收获的休眠种子对发芽温度要求特别严格，必须选用表

13-1中几种恒温中的较低温度或变温。如洋葱种子发芽温度有20?、15?,则应选

用15?发芽，又如西瓜种子，规定温度有20,30?、30?、25?,则应选用

20,30?或25?恒温。陈种子，也以选用其中的变温或较低恒温发芽为好。一当规

定用变温时，通常应保持低温16h及高温8h»对非休眠种子，可以在3h内完

成变温。如果是休眠种子，应在1h或更短时间内完成急剧变温或将试验移至另一

个设定低温的发芽箱内。

,四、光照

,光照因不同作物种而异，按种子发芽对光反应的不同可分为三类：

,?需光型种子。发芽时必须有红光或白炽光，促使光敏色素转变为活化型，

如茴蒿等。特别是这

类新收获的休眠种子发芽时.，必须给予光照；

,?需暗型种子。这类种子必须在黑暗条件下，其光敏色素才能达到萌发水

平，如黑种草种子；

,?光不敏感型种子。在光照或黑暗条件下均能良好发芽，这类种子包括大多

数大田作物和蔬菜种

子。

发芽试验程序

一、选用发芽床:一小、中粒种子可用纸上（TP）发芽床;一中粒种子可用纸间

（纸卷，）（BP）发芽床；

14

一大粒种子或对水分敏感的小、中粒种子宜用砂床⑸发芽。一活力较差的种

子，也以用砂床的效果为好。

在选好发芽床后，按不同作物种的种子和发芽床的特性，调节其适当的湿度。

二、数种置床

1（试样来源和数量

除委托检验外，试验样品来源必须是净种子，从充分混合的净种子中随机数

取，一般数量是400粒。

净种子可以从净度分析后的净种子中随机数取，也可以从送验样品中直接随机

数取。

一般小、中粒种子（如油菜、结球白菜、小麦、水稻等）以100粒为一重复，试

验为4次重复;大粒种子（如玉米、大豆、棉花等）以50粒为一副重复，试验为8个

副重复;特大粒的种子（如花生和蚕豆等）可以25粒为一副重复，试验为16个副重

复。复胚种子单位可视为单粒种子进行试验，不需弄破（分开），但芫荽例外。

三、在规定条件下培养

按表13-1规定的发芽条件，选择适宜的温度。一虽然各种温度均为有效，但

一般来说，新收获的有休眠种子和陈种子，以选用其中的变温或较低恒温发芽为

好。一关于光照条件，对需光型种子如茴蒿种子发芽时必须光照促进发芽。除需暗

型种子在发芽初期应放置黑暗条件下培养，由于光照利于抑制发芽过程中霉菌生长

繁殖和幼苗子叶、初生叶的光合作用，其他种子发芽时.，只要条件允许，最好在光

照下培养。

四、检查管理

种子发芽期间，应进行适当的检查管理，以保持适宜的发芽条件。（1、发芽床

应始终保持湿润，水分不能过多或过少。（2、温度应保持在所需温度的?2?范围

内，防止因控温部件失灵、断电、电器损坏等意外事故造成温度失控。如采用变温

发芽，则应按规定变换温度。（3、如发现霉菌滋生，应及时取出洗涤去霉。当发霉

种子超过5%时，应更换发芽床，以免霉菌传开。（4、如发现腐烂死亡种子，则应

及时将其除去并记载。（5、注意通气，避免因缺氧而使正常发芽受影响。

五、观察记载

1（试验持续时间

每个种的试验持续时间详见表13-lo试验前或试验间用于破除休眠处理所需时

间不作为发芽试验时间的一部分。

—如果样品在规定的试验时间内只有几粒种子开始发芽，则试验时间可延长7

d,或延长规定时间的一半。根据试验情况，可增加计数的次数。一如果在规定的

试验时间结束前，样品已达到最高发芽率，则该试验可提前结束。

2（鉴定幼苗和观察计数

,一在初次计数时，应把发育良好的正常幼苗从发芽床中拣出，对可疑的或损

伤、畸形或不均衡的

幼苗，通常到末次计数。

,一严重腐烂的幼苗或发霉的死种子应及时从发芽床中除去，并随时增加计

数。

,--末次计数时，按正常幼苗、不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种

子分类计数和记载。

,-一复胚种子单位作为单粒种子计数，试验结果用至少产生一个正常幼苗的

种子单位的百分率表

示。当送验者提出要求时，也可测定100个种子单位所产生的正常幼苗数，或

产生一株、两株及

两株以上正常幼苗的种子单位数。

总的来说,发芽试验鉴定时把握以下原则：

(1)如果有的幼苗发育很快，可以在初次计数进行鉴定；

(2)如果有的幼苗发育迟缓，可以在末次计数进行鉴定；

(3)如果在末次计数仍有较多的幼苗发育迟缓，可延长规定时间的一半，增加

计数的次数；

(4)如果有的幼苗发霉或腐烂，则应及时从发芽床中清除；

(5)对有损伤的幼苗，尽可能延长观察时间，通常到末次计数。

六、结果计算和表示

试验结果以粒数的百分率表示。

15

计算时，以100粒种子为一重复，如采用50粒或25粒的副重复，则应将相邻

副重复合并成100粒的重复。

一当一个试验的4次重复，其正常幼苗百分率都在最大容许差距范围内(表13-

2),则取其平均数表示发芽百分率。不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子

的百分率按4次重复平均数计算。

发芽试验结果修约：在发芽试验中，正常幼苗百分率修约至最接近的整数，

0.5则进位。计算其余成分百分率的整数，并获得其总和。如果总和为100,修约

程序到此结束。如果总和不是100,继续执行下列程序:在不正常幼苗、硬实、新

鲜不发芽种子和死种子中，首先找出其百分率中小数部分最大值者，修约此数至最

大整数，并作为最终结果;其次计算其余成分百分率的整数，获得其总和，如果总

和为100,修约程序到此结束，如果不是100,重复此程序;如果小数部分相同，优

先次序为不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子。

七、破除休眠和重新试验

1（破除休眠；当试验结束还存在硬实或新鲜不发芽种子时，可进行处理后（详

见表13-1）重新试验，如预知或怀疑种子有休眠，这些处理方法也可用于初次试

验。

2（重新试验:当试验出现下列情况时，应重新试验。

（1）怀疑种子有休眠（即有较多的新鲜不发芽种子）时，可采用上述休眠种子处

理方法重新试验，将得到的最佳结果填报，同时注明所用的方法。（2）由于真菌或

细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用砂床或土壤发芽床重新试验。如有

必要，应增加种子之间的距离。（3）当正确鉴定幼苗困难时，可采

-1中规定的一种或几种方法用砂床或土壤发芽床重新试验。（4）当发现实验条

件、幼苗鉴定或用表13

计数有差错时，应采用同样方法重新试验。（5）当100粒种子重复间的差距超

过表13-2最大容许差距时，应采用同样的方法重新试验。

［例2］现测得一发芽试验4次重复的发芽率分别为:76,、65