临床血液学和血液学检验实验指导

《临床血液学和血液学检验》

实验指导

（供医学检验专业五年制本科使用）

遵义医学院医学检验系组编

2005年12月

第一章血细胞形态(示教)

概念：是指血细胞经瑞氏染色后在光学显微镜下的形态特征。

第一节血细胞多媒体示教2学时

了解：初步认识各种血细胞外形及核的形态、胞浆着色情况、核染色质结构的不同点。

第二节正常血细胞形态(显微镜下示教)4学时

了解：初步认识粒细胞系、红细胞系、淋巴细胞系、单核细胞系、浆细胞系、巨核细胞系的

各阶段细胞形态学特征，并画出每一台显微镜下的细胞图像。

(-)粒细胞系统

1.原始粒细胞(myeloblast)：10~18um,胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或

略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色,

有透明感，无颗粒。

2.早幼粒细胞(promyelocyte)：12~20um,较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染

色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态

不一的紫红色颗粒(即非特异性颗粒)。

3.中幼粒细胞(myelocyte)

①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte)；10-18Hm,胞核椭圆形或一侧开始扁平，

可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2,核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；

胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒(致少有一个

区域)。

②嗜酸性中幼粒(eosinophilic)：15~20um：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而

均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。

③嗜碱性中幼粒(basphilic)：10~15um,核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色

质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。

4、晚幼粒细胞(metamyelocyte)

①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte)：10~16um,核明显凹陷呈肾形，马蹄形，

半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞

浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。

②嗜酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte)：10-16ym,核形及结构与中性晚幼

粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。

③嗜碱性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte)：10-14um,核固缩呈肾形，轮廓模糊;

胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。

5.杆状核粒细胞(stabgranulocyte)

①中性杆状核粒细胞(neutrophilicstabgranulocyte)：10~15um,核凹陷程度超过

假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，呈带状弯曲，核染色质粗糙呈块状；胞

浆充满中性颗粒。

②嗜酸性杆状核粒细胞(eosinophilicstabgranulocyte)：11~16Mm,核与中性杆

状相似；浆内充满嗜酸性颗粒。

③嗜碱性杆状核粒细胞(basophilicstabgranulocyte)：10-12um,核呈模糊杆

状；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性颗粒。

6.分叶核粒细胞(segmentedgranulocyte)

①中性分叶核粒细胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte)：10-14um,核呈分

叶状，叶与叶之间有细丝相连或全断开，常分2~5叶，核染色质已浓集呈粗的小块状，染深

紫红色；胞浆丰富，内含淡红色均匀细小颗粒。

②嗜酸性分叶核粒细胞((eosinophilicsegmentedgranulocyte)：11~16um,核

多分2叶,核染色质结构与中性分叶核相似:胞浆内充满粗大均匀一致的橘红色嗜酸性颗粒。

③嗜碱性分叶核粒细胞(basophilicsegmentedgranulocyte)：10-12um,核可分

3~4叶或分叶不明显；胞浆分布有少量大小不等的紫黑色嗜碱性颗粒。

(二)红细胞系统

①原始红细胞(pronormoblast)：15~20um,呈圆形或椭圆形，边缘常呈钝角状或瘤

状突起，核呈圆形，居中或偏位，约占细胞体的4/5左右，核染色质呈颗粒状较原粒细胞粗

而密集，核仁卜3个不等，且大小不、形状不规则，呈浅蓝色或暗蓝色；胞浆量少，染深

蓝色、不透明，有油画蓝感，无颗粒。

②早幼红细胞(earlynormoblast)：10~18um,核圆形或椭圆形，约占细胞的2/3以上，

核染色质颗粒有浓集现象，较原红细胞粗糙，核仁模糊或消失；胞浆量增多，染不透明蓝色

或深蓝色，边缘可见瘤状突起。

③中幼红细胞(polychromaticnormoblast)：8~15um,核圆形,约占细胞的1/2,

核染色质凝聚呈条索状或块状，中间有明显空隙，如压碎饼干样或打碎墨砚感，无核仁；胞

浆量相对较多，浆内由于已合成不等量的血红蛋白，可染呈不同程度的嗜多色性。

④晚幼红细胞(orthochromaticnormoblast)：7~10um,核圆形居中或偏位，占细

胞的1/2以下，核染色质致密聚集成结构不清的紫黑色团块状，无核仁；胞浆量较多，因已

合成大量血红蛋白，常染浅灰红色或浅红色。

⑤网织红细胞(reticulocyte)：7.2~7.5um,为晚幼红细胞刚脱核而成，是尚未完全成熟

的红细胞，瑞氏染色为多嗜性红细胞，用煌焦油蓝活体染色后在细胞内可见蓝色细颗粒或呈

线状或网状结构。

⑥红细胞(erythrocyte)：正常红细胞平均为7.2um,呈双面微凹之圆盘状，中央较薄，

染色浅，边缘较厚，染色深，呈粉红色，无核。

(三)单核细胞系统

①原始单核细胞(monoblast)：15~20um,胞体圆形或椭圆形，核较大圆形或类圆形，

核染色质纤细，呈疏松网状结构，核仁卜3个：胞浆量较其它原始细胞丰富，灰蓝色，不透

明，边缘不规则或有伪足状突起。

②幼稚单核细胞(promonocyte)：15~25um,核圆形或不规则形，易见扭曲、凹陷、

切迹等改变，核染色质较原始单核细胞粗糙疏松，核仁可有可无；胞浆浅灰蓝色，不透明，

可见细小颗粒。

③单核细胞(monocyte)：12-20Pm,核形态常不规则，有肾形，马蹄形，“S”形，分

叶状，笔架形等，核染色质疏松呈丝网状或条纹状结构，无核仁；胞浆量较多，染不透明的

灰蓝色，可见细小红色颗粒。

(四)淋巴细胞系统

1.原始淋巴细胞(lymphoblast)：10~18口m,胞体圆形或椭圆形，核呈圆形或椭圆形，核

染色质呈细颗粒状，核仁1~2个；胞浆量少，呈淡蓝色，透明，无颗粒。

2.幼稚淋巴细胞(prolymphocyte)：10~16口m,核圆形或椭圆形，核染色质仍较细致，核

仁可有可无；胞浆量较少，淡蓝色，偶见有少许红色颗粒。

3.淋巴细胞(lymphocyte)

①大淋巴细胞：12~15um,核圆形稍偏于一侧，核染色质排列紧密均匀，深紫红色；

胞浆量相对较多，染透明淡蓝色，可有少量大小不等的红色嗜天青颗粒。

②小淋巴细胞：6~9um,核相对较小，呈圆形，核染色质紧密呈大块状，结构不清楚,

染深紫红色：胞浆极少，似裸核样，如可见则呈淡蓝色，一般无颗粒。

(五)浆细胞系统

1.原始浆细胞(plasmablast)：14~18um,胞体圆形或椭圆形，核圆形，占细胞的2/3以上，

居中或偏位，核染色质呈粗颗粒网状，染紫红色，核仁2~5个；胞浆量多，染深蓝色，不透

明，无颗粒。

2.幼稚浆细胞(proplasmacyte)：12~16um,胞体多呈椭圆形，核圆形或椭圆形，占细胞

的1/2,居中或偏位，核染色质较原浆细胞粗糙紧密，开始聚集，染深紫红色，核仁模糊或

消失；胞浆量多，深蓝色或紫蓝色或呈蓝色火焰状，不透明，有时可有空泡及少数嗜天青颗

粒。

3.浆细胞(plasmacyte)：8~15nm,核明显缩小，圆形，占细胞的1/3以下，偏于一侧，

核染色质浓集成块状，常排列呈车轮状，无核仁；胞浆量丰富，染蓝色或紫蓝色，不透明，

有时有泡沫感，浆内可含有小空泡及/或少量嗜天青颗粒，偶见胞浆中有较大的红色或淡蓝

色透明的球状物，称Russell小体，是球蛋白聚集而成。

(六)巨核细胞系统

1.原始巨核细胞(megakaryoblast)：15~30um,胞体圆形或不规则形，核大，呈圆形或

不规则形，核染色质较其他原始细胞粗，呈粗网状或细条索状结构，染深紫红色，核仁2~3

个，淡蓝色，不清晰，不规则；胞浆量较少，不均匀，不规则，染深蓝色，无颗粒。

2.幼稚巨核细胞(promegkaryocyte)：30-50um,外形不规则，核亦不规则,有重叠,可

扭转呈肾形或分叶状，核染色质呈粗颗粒或粗网状或局部浓集呈小块状，排列紧密，核仁可

有可无；胞浆量增多，常有伪足状突出，染蓝色或浅蓝色，在近核处出现或多或少的很细小

红色嗜天青颗粒。

3.巨核细胞(megakarycyte)

①颗粒型巨核细胞：40~70*m,可达100口m,外形不规则，核较大，形态不规则，多

呈分叶状，核染色质较粗糙，排列紧密呈团块状，紫红色，无核仁；胞浆量丰富，染粉红色,

夹杂有蓝色，内含大量细小红色颗粒，常聚集呈簇，但无血小板形成。

②产板型巨核细胞：40-70um,可达100um,形态大致与颗粒型巨核细胞相似，唯有

不同的一点是胞浆内充满细小的红色颗粒及数量不等的血小板。

③裸核型巨核细胞：是产板型巨核细胞的胞浆解体后，释放出大量血小板，仅剩一个

细胞核，称之为裸核。

4.血小板(platelet)：胞体很小，2~4um,呈圆形、椭圆形，逗点状，不规则形，中心部

位有细小紫红色颗粒，无细胞核，涂片上血小板常三五成群堆集出现。

(七)其他细胞

1.组织嗜细胞(tissuebasophiliccell)；又称肥大细胞(mastcell),12-20ym,呈圆

形，椭圆形，梭形，三角形等，核小，呈圆形或椭圆形，居中或偏位，核染色质模糊，结构

不清；胞浆充满圆形、大小一致的深紫色嗜碱性颗粒。

2.内皮细胞(endothelialcell)；8~22Pm,形态极不规则，多呈梭形，核呈圆形或椭圆形，

核染色质呈网状，多无核仁；胞浆量少，染淡蓝色，边缘常模糊不清，常沿核长轴的两侧或

一端呈尾状伸出，可有细小紫红色颗粒。

3.纤维细胞(fibrocyte)：胞体较大，不规则，多为长尾形，核圆形或椭圆形(1~数个)，

核染色质呈或细或粗的网状结构，核仁1~2个，不清晰，成熟者无核仁；胞浆丰富，多在细

胞两端，染淡蓝色，边界模糊，内含纤维网状物及少许嗜天青颗粒。

4.成骨细胞(osteoblast)：胞体较大，20-40um,长椭圆形或不规则形，单个或多个成群

分布，核圆形或椭圆形，常偏于细胞一侧，核染色质排列呈粗网状，染深紫红色，核仁可有

1~3个；胞浆丰富，染深蓝色或灰蓝色，边缘常呈模糊云雾状。

5.破骨细胞(osteoclast)：胞体巨大，60-100um,形态不规则，颇象巨核细胞，核小、数

量较多，3~100个不等，圆形或椭圆形，大小大致相等，边缘清晰，彼此独立，无核丝相连,

随意排列，核染色质呈粗网状，几乎每个核都有一个蓝色核仁；胞浆丰富，染淡蓝色或浅红

色，含大小不等的紫红细小颗粒。

6.脂肪细胞(fattycell)：30-50um,胞体圆形或椭圆形，核较小，形状不规则，常被挤

压在一边，核染色质呈细致密网状，无核仁；胞浆内充满大量空泡。

7.组织细胞(histiocyte)：胞体较大，20~50um,形态多样，一般呈圆形或椭圆形及不规

则形，核可有圆形，椭圆形，肾形，核染色质呈疏松网状结构，核仁2~4个不等；胞浆多少

不一，染色也常不一致，有深蓝，淡蓝，灰蓝色等，边缘多不规则或不清楚，无颗粒或含有

少量或细或粗或粗细不•的嗜天青颗粒，可有空泡或含异物等。

8.吞噬细胞(phagocyte)：不是一种独立的细胞，而是胞浆内含有吞噬物质的一组细胞的

总称。具有吞噬功能的细胞有单核细胞、组织细胞、血管内皮细胞，纤维细胞等。吞噬细胞

的形态极不一致，由吞噬物的类型及吞噬物的多少而定。其胞核圆形、椭圆形或不规则形，

常一个核，有时为双核，核常被挤压至一侧，核染色质较疏松，核仁可有可无。胞浆多少不

一，淡蓝色或淡红色，常有空泡，并有数量不等的吞噬物，吞噬物有空泡、色素、颗粒、有

核细胞、红细胞、血小板、碳核、细菌等。有时吞噬细胞成堆存在。

第二节异常血细胞形态学(4学时)

了解：初步认识各种异常血细胞形态，并画出每一台显微镜下的细胞图像。

血细胞形态在病理情况下，可在胞体、胞核、胞浆等方面发生异常改变。

(-)粒细胞系统形态异常

1.白血病时粒细胞改变

①胞体：大小不等、畸形。

②胞浆：Auer小体，颗粒粗大、增多。

Auer小体：是在细胞浆内出现结构均匀一致的红色细棒状小体。产生原因是嗜天青颗粒

融合而成。常见于急性非淋巴细胞性白血病细胞浆内。

③胞核：畸形、切迹、折叠、凹陷、扭曲、分叶等。如急淋时核易破碎，核分裂象增多。

④核浆比：增大、发育不平衡（M2b）。

⑤核仁：大、数量增多、亦可不清楚。

2.巨大粒细胞：可见于中、晚、杆、分阶段。常见巨晚幼、巨杆状。

①形态特征：与同期相比，胞体大、核大、核染色质较同阶段细胞细致。

②形成原因：核酸代谢障碍。

③常见疾病：巨幼贫、M6、MDS、M2b、抗叶酸类药物治疗后。

3.中性粒细胞分叶过多：分5叶以上，常见于巨幼贫、严重感染恢复期。

4.粒细胞中毒变性改变

①中毒颗粒：胞浆颗粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫红色。见于严重感染、大面积

烧伤等。

②空泡：浆或核内空泡。见于严重感染。

③杜勒小体（Dohle）：蓝斑，在细胞浆内直径约l~2um的蓝色区域。见于严重感染，肝硬

化等。

④核变性：核固缩、核肿胀、核碎裂、核溶解。见于严重感染。

（-）红细胞系形态异常

1.巨幼红细胞

①形态特征：与同期细胞相比，胞体大、核大、核染色质细致、排列疏松“幼核老浆”。

②产生原因：核酸代谢障碍。

③常见疾病：巨幼贫、M6、MDS、抗叶酸治疗后等。

2.低色素性红细胞

①形态特征：与同期细胞相比，浆量少、嗜碱性、着色偏蓝，核染色质无明显异常改变“幼

浆老核”。成熟红细胞中心淡染区明显扩大。

②产生原因：Hb合成障碍（不能说缺铁）。

③常见疾病：IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。

3.红细胞大小不等、形态不整：见于各种增生性贫血。

4.球形红细胞：＜6.4um,中心淡染区明显缩小或消失。见于遗传性球形红细胞增多症。

5.椭圆形红细胞：横径/长径＜0.78。见于遗传性椭圆形红细胞增多症。

6.靶形红细胞：见于低色素性贫血、地贫等。

7.嗜多色性红细胞：成熟红细胞染灰蓝色或浅灰色。多表示骨髓造血功能活跃，多见于溶

贫、失血性贫血等。

8.嗜碱性点彩红细胞：瑞氏染色后在红细胞浆中有蓝黑色细小颗粒存在。表示骨髓再生加

速。铅中毒时多见。

9.裂红细胞：即红细胞碎片。可见于微血管病性溶贫、DIC及损伤性。

10.红细胞中出现异常结构

①豪-周小体(Howoll-Jolly,s)：属核残余物。可见于巨幼贫、溶贫、脾切除后、铅中毒等。

②卡波环(Cabot,sring)：可见于铅中毒、巨幼贫等。

(三)淋巴细胞形态异常

1.异型淋巴细胞：分浆细胞型、单核细胞、幼稚型。可见于出血热、传单及其它病毒感染。

2.原、幼淋巴细胞：淋巴细胞白血病、淋巴瘤等。

(四)单核-巨噬细胞系统形态异常

1.恶组：多形性、多核异组。

2.急单、类单核细胞白血病反应等。

3.戈谢细胞(Gaucher)：戈谢病。

4.尼曼-皮克细胞(Niemann-pick)：尼曼-皮克病。

(五)巨核细胞系统形态异常

1.幼巨产板：ITP。

2.小巨核：大小与成熟淋巴细胞相似，形态不规则，有伪足突起，核染色质浓集，无明核

仁。可见于白血病、MDS等。

3.巨大血小板：见于巨大血小板综合症。

第二章检验的基本方法

第一节制片方法(1学时)

掌握：制片及染色的基本方法。

了解：染液及缓冲液的配制方法。

一、骨髓制片

1.第次骨髓穿刺患者，骨髓涂片8张以上或将所抽骨髓液全部涂完，同时涂外周血

片4张。

2.复查病人，骨髓涂片4张，同时涂外周血片2张。

二、脱落细胞制片

1.一般包块穿刺，涂片1〜2张。

2.胸腹水及尿液标本，取50ml以上离心（30004分）10分钟，取沉淀物涂片2张。

3.脑脊液标本，将全部送检物离心（3000r/分）沉淀，取沉淀物涂片1张。

4.痰液标本，取可疑部分涂片3〜5张。

第二节血细胞及脱落细胞瑞氏-姬姆萨染色（1学时）

一、试剂

1.瑞氏染色液：称1克瑞氏染粉，加入1瓶甲醇（分析纯，约500ml）中混匀，室温放

置3个月后应用或每天混匀1次，放置室温连续7天后应用。

2.姬姆萨染色液：称0.5克姬姆萨（吉氏）染粉，加入33ml丙三醇（甘油，分析纯）中

混匀，放56℃水浴箱中3小时以上，中间混匀3〜5次，取出冷确至室

温，再加入33ml甲醉（分析纯）中，混匀即可应用。

3.磷酸盐缓冲液（PH=6.4〜6.8）：磷酸二氢钾（无水，分析纯）5克

磷酸氢二钠（含12.H2O,分析纯）5克

蒸镭水10000ml

溶解混匀备用

4.姬姆萨染色液一磷酸盐缓冲液混合比例：姬姆萨染色液约2〜3ml,加磷酸盐缓冲液约

30〜40ml混匀即可应用。每天上下午各新鲜配制1次。

二、染色方法

1.血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定5〜8秒钟。

2.放入姬姆萨染色液一磷酸盐缓冲液混合液中染色15〜20分钟，慢性粒细胞白血病患者

涂片染色30分钟，取出凉干或用滤纸吸干即作镜下观察。

第三、四节血象及骨髓象检验分析步骤（2学时）

掌握：血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值，正常骨髓象的正常形态特征。

熟悉：常见血液病的临床表现及血象、骨髓象的形态学改变特征。

了解：其他系细胞的正常形态及异常形态。

（一）血象检验

1.在做骨髓穿刺的同时须做血象检验

⑴BRC、RC、WBC、PIT计数。

⑵涂片染色观察。

①红细胞形态有无异常。

②白细胞形态有无异常。

③血小板形态及数量有无异常。

④有无寄生虫及其他异常细胞。

2、作用

⑴提供思路

①一系减少：HbI、WBC及PLT正常f单纯贫血。

WBC（、Hb及PLT正常•*粒细胞减少或缺乏。

PLTIHb及WBC正常一ITP。

②二系减少：Hb及PLTIWBC正常一ITP、急白、MDS、巨幼贫。

③三系减少：Hb、PET及WBC均，一AA、急白、巨幼贫。

⑵提供诊断依据

①骨髓象相似，血象有区别

如：球形RBCt症一骨髓红系t、血象有核红t、球形RBCf。

IDA--------------＞骨髓红系葭血象无有核红、RBC中心淡染区扩大。

②血象相似，骨髓象不同

如：AA--------------血象三系I、骨髓巨核细胞I及无白血病细胞。

非白血病性白血病►血象三系I、骨髓有白血病细胞。

MA---------------＞血象三系I,骨髓粒系、红系、巨核系均有巨幼变。

③血象有明显变化、骨髓无变化

如：传单象淋巴细胞t、异淋t（＞10%）、骨髓无变化。

传淋------------血象淋巴细胞t、异淋I、骨髓无变化。

④骨髓有变化、血象无明显变化

如：戈谢病--------骨髓有戈谢细胞、血象无明显变化。

尼曼-皮克病-----------骨髓有尼曼-皮克细胞、血象无明显变化。

（二）骨髓象检查

凡疑有血液系统或并发血液系统疾病均应作骨髓穿刺检查

1、适应症

①检查血常规有问题：血象增高、减少。

⑵临床体征有不明原因贫血、出血、发热、骨痛、肝脾淋巴结肿大。

2、禁忌症

①由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病，如血友病。

②晚期妊娠作骨穿检查要慎重。

③小儿及不合作患者不宜作胸骨穿刺术。

3、标本采集：一般由临床医生作。

⑴采集部位：胸骨、脊突、骼骨、胫骨粗隆（2岁以下小儿）。

⑵采集质量保证

①无菌、严防感染。

②死亡病例应在30分钟内完成。

③量不能多，一般不超过0.2ml,否则导致血稀（混血），影响判定诊断。

④对某些疾病采取多部位穿刺可提高诊断率。如转移癌、骨髓瘤等在病变或骨痛部位穿刺其

阳性率

较高；如AA多部位穿刺有利确诊。

⑶涂片质量保证

①推片时角度太大、太快都使涂片厚，反之则薄。

②先涂血片、后涂骨髓片。

③骨髓抽太多，制片人应将剩骨髓液的玻片斜立，用棉花在斜面的底部吸去部分血液，再行

涂片，底片不能丢。

④作好标识：姓名、血片（B）、骨髓（M）。

⑤涂片中前3张涂片，对估计PLT量较好。

⑷判定骨髓取材满意的几项指标

①抽吸骨髓时病人有特殊的痛感。

②骨髓液及涂片均可见骨髓小粒（骨髓渣）和脂肪滴。

③显微镜观察涂片可发现骨髓特有细胞。

④含有大量幼粒幼红细胞，粒细胞杆状核与分叶核的比值大于血片中的比值。

⑸干抽的概念：是指非技术错误或穿刺位置不当而抽不出骨髓液或只得到少量血液。其常见

疾病有：

①原发性或继发性骨髓纤维化。

②骨髓增生极度活跃，细胞过于浓集。如：白血病、真红。

③骨髓增生减低：AAo

④肿瘤骨髓浸润：恶淋、MM、转移癌等。

4、检验的方法及步骤

（1）低倍镜观察

①取材、涂片、染色情况：采用“良好”、“尚可”、“欠佳”等标准进行评价。

②判定骨髓有核细胞增生程度：有核细胞与成熟红细胞之比，分五级：

增生极度活跃：平均约1：1

增生明显活跃：平均约1：10

增生活跃：平均约1：20

增生减低：平均约1：50

增生极度减低：平均约1：200

③观察涂片尾部及边缘有无大的或成群（团）的异常细胞，同时计数全片巨核细胞。

（2）油镜观察

①选择部位：在涂片体、尾交界处，选择细胞分布比较均匀处。

②有核细胞分类计数：可根据增生程度确定分类总数

增生减低及极度减低：分100或200个细胞。

增生活跃：分200或500个细胞。

增生明显活跃及极度活跃：分500个细胞。

③观察细胞形态

粒系：中毒颗粒、空泡、有无巨幼变粒细胞、Aure小体等。

红系：幼红细胞及成熟红细胞有无异常变化。

巨核系：小巨核、幼巨产板、巨大血小板、估计血小板量。

④注意有无寄生虫。

⑤判定低倍镜下观察到的异常细胞性质。

（3）计算结果

①根据分类结果计算出各系统及各阶段细胞的百分率。

②计算粒红比值：粒细胞系总和/红细胞系总和。

（4）填写报告

①根据骨髓象分类结果，按报告单要求逐项进行填写。

②做好骨髓象所见的形态特征描述。

（5）骨髓报告分析及意见

①取材、涂片、染色情况：良好、尚可、欠佳。

②骨髓增生程度，粒：红=?：?。

③粒系：

④红系：

⑤淋巴系或单核系：

⑥全片巨核细胞数，根据血小板分布估计其量是多、正常、少。

⑦有无寄生虫。

⑧血片分类及所见进行描述。

⑨写出诊断意见：根据血象、骨髓象和细胞化学染色所见，结合临床资料•，提出具体诊断意

见或供参考的意见。诊断意见分为以下几种：

肯定性诊断：骨髓有特异性变化，临床表现又典型者，如各种白血病、MA、MM、转移癌、

戈谢病、尼曼-皮克病等。

支持性诊断：血象、骨髓象有形态改变，可解释临床表现，如IDA、AA、溶贫等。

可疑性诊断：骨髓象有部分变化或出现少量异常细胞，临床表现又不典型，可能为某种疾病

的早期或前期或不典型病例者，如难治性贫血等，要结合临床、作相应的检查，并动态观察

其变化。

排除性诊断：如临床上怀疑ITP的患者，其骨髓中血小板易见（不少），巨核细胞无成熟障

碍，即可排除ITP的可能性。

形态学描写：骨髓有些改变，但提不出上述性质诊断意见，可简述其形态学变化的主要特点，

并建议作动态观察，尽可能提出进•步检查的建议。

⑩填写报告日期并签名。

5、骨髓象检查的注意事项

①由于细胞形态变化多种多样，故观察细胞时不能根据某一、二个特点就轻易作出肯定性诊

断或否定性诊断，要全面观察细胞的形态变化，结合临床综合分析作出判断。

②同一病人的骨髓涂片，可因制作涂片不佳（太厚、太薄）、染色不好、选择分类或观察的

部位不当均易导致判断错误。

③观察细胞形态要认识到血细胞的发育是一个连续不断的过程，对各系细胞划分为若干阶段

是人为划分的，在实际观察中常会遇到些细胞既有上一阶段的某些特征，又有下一阶段

的某些特点，由于血细胞是向成熟方向发育，故一般遇此情况归入下一阶段。

④对于个别介于两系统之间的细胞难以判断时，可采用大数归类法（即将此类难以判断的细

胞归入细胞多的细胞系）。如在红系较多的骨髓片中，将介于浆细胞与幼红细胞之间的细

胞归入红系细胞；介于原粒细胞与原淋巴细胞之间的细胞，一般情况原粒细胞较原淋巴细

胞易见，故应归入原粒；如为急性淋巴细胞白血病的病人，应归入原淋巴细胞。切忌在急

性白血病骨髓象中分出多种原始细胞（如原粒、原单、原淋都有）的现象。

⑤急性白血病时，各系统原始细胞在理论上虽各有特征，但有时及为相似，很难鉴别，这时

应注意观察伴随出现的幼稚细胞、成熟细胞，并与其比较，同时要结合细胞化学染色、血

象细胞形态等综合考虑，推测原始细胞的归属。

⑥有时可见到难以识别的细胞，可参考涂片上其他细胞后作出判断,如仍不能确定可归入“分

类不明细胞”，但不宜太多，若有一定数量，则应通过细胞化学染色、集体阅片或会诊等

方法弄清类别。

⑦骨髓涂中巨核细胞减少或血小板减，而外周血象中血小板数正常时，则往往是山穿刺凝固

或涂片凝固所致。

⑧作骨髓细胞学检查时,应同时作血象细胞学检查,这有助于疾病的诊断及化疗后疗效判断。

（三）判定骨髓计数值的高低

根据骨髓各系统各阶段细胞的计数值与其相应的X+SD的离散程度进行判断。

计数值：在X±1SD以内视为正常

在X—1SD以下视为减低

在X+1SD~2SD之间视为增高

在X+2SD以上视为明显增高

从第五节起以下的实验课均让学生自己动手做，教师辅导。

第五节大致正常骨髓象（4学时）

掌握：血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值，骨髓各系统各阶段细胞的正常形态特征，

正常骨髓象报告的书写方法。

熟悉：其他系细胞的正常形态。

一般符合列情况者，可视为大致正常骨髓象。

1.骨髓有核细胞增生活跃。

2.粒红比值：2~4：2

3.各系统各阶段细胞比值在正常范围，形态无明显异常。

①粒系：约占40~60%,其中原粒＜2%,早幼粒＜5%,中性中幼粒中性晚幼粒

10%~15%,中性杆状核15%~20%,中性分叶核12%~20%,且杆状＞分叶，嗜酸＜5%,

嗜碱＜1%。

②红系：约占20%~25%,原红＜1%,早幼红＜5%,以中、晚幼红细胞为主、各约占10%,

形态无异常。

③淋巴细胞系：约占15~25%,均为成熟淋巴细胞，原幼淋巴细胞小儿偶见。

④单核及浆细胞系：各＜4%。无原幼单及原幼浆细胞。

⑤巨核系：通常在1.5X3cm的涂片膜上，可见7~35个巨核细胞。其中原巨0或罕见，幼巨

0-5%,颗粒巨10~27%,产板巨44%~60%,裸核0~30%。血小板易见，呈堆存在。

⑥其它细胞：可见少量非造血细胞，如组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、破骨细胞、成骨细

胞、脂肪细胞等。

⑦核分裂象少。

⑧无异常细胞及寄生虫。

⑨各系细胞形态正常。

第六节临床血液生化和血细胞化学

一、细胞化学染色（4学时）

掌握：NAP染色、铁粒染色、POX染色方法、结果判定、正常值及临床意义。

熟悉：NAP染色、铁粒染色、POX染色方法的试剂配制。

了解：NAP染色、铁粒染色、POX染色方法的。

（-）碱性磷酸酶染色（NAP）

------钙钻法

1.原理细胞内的碱性磷酸酶在PH9.2~9.8时，将底物B-甘油磷酸钠水解，产生磷酸根，

后者与其质液中的钙离子作用形成磷酸钙，再与硝酸钻起反应，形成磷酸钻，最后与硫化镂

作用形成硫化钻黑色沉淀定位于胞浆中。

2.试剂

（1）备用试剂：①95%乙醇②2%CaCb③2%硝酸钻④1%硫化钱⑤B-甘油磷酸钠⑥

Tris-HCl缓冲液（PH9.5）:Tris6g溶于400ml水中，加0.1MHC180ml,调PH9.5,加水至

500ml

（2）孵育液（每次必须新鲜配制）：Tris缓冲液20ml,2%CaCl2

20ml,B一甘油磷酸钠200mg。

3.方法

(1)新鲜血片用95%乙醇固定lOmin,取出，自然干燥。

(2)将孵育液放入45℃水浴箱中先预温5min后，再放入涂片孵育30min,取出涂片(不冲

洗)立即放入2%硝酸钻中5min,取出用自来水充分冲洗干净。

(3)放入1%硫化镀溶液(每次必须新鲜配制)中2min,用自来水冲洗干净，用核固红复

染30min。

4.结果

阳性：中性粒细胞胞浆内有棕黑色沉淀。

阴性：中性粒细胞胞浆内无棕黑色沉淀。

5.正常参考值

成人：积分80分左右。

儿童：因年龄而异。

6.临床意义

(1)细菌：积分球菌tt>GN杆菌，病毒减低或无变化。但NAP积分正常/I,不能除

外细菌感染。

(2)慢粒JI,类白t〜tt。

(3)ALLt,ANLLI»

(4)AAtt,PNH正常/I。

(5)恶组II,反应性组织细胞增多t〜tt。

(6)增性红细胞增多症t,继发性红细胞增多正常。

(7)激素治疗后NAPt。

(8)妊娠期NAPt。

7.质量保证

(1)孵育液、1%硫化钱每次实验必须新鲜配制。

(2)Tris-HCl缓冲液的PH应控制在9.2~9.8之间。

(3)温度应严格控制在45℃左右(上下不超过1℃)。

(4)涂片在孵育液中准确温育30分钟。

(5)涂片从孵育液中取出时不能冲洗，应直接放入硝酸钻，否则实验失败。

(6)涂片从硝酸钻中取出时应用自来水冲洗3分钟，否则涂片太脏，结果不好观察。

(7)每次染色必须作对照。

(-)铁染色

1.原理骨髓小粒中的含铁血黄素称细胞外铁，其中的三价铁与分子中的蛋白质结合不牢

固，经稀盐酸处理后而游离，并能在酸性亚铁氟化钾溶液中产生普鲁士蓝反应。细胞内铁也

可用此法显示。根据反应的强弱了解骨髓中铁的含量。

2.试剂

(1)酸性亚铁氟化钾溶液

200g/L亚铁氟化钾溶液5份

浓盐酸1份

取200g/L亚铁氟化钾溶液置于试管中，缓缓滴加浓盐酸，边滴边摇匀，至出现白色

沉淀，再滴加200g/L亚铁氟化钾溶液，亦边滴边摇匀，至白色沉淀消失为止，备用。

(2)2g/L核固红一硫酸铝溶液

取硫酸铝2g溶于100ml蒸镭水中，再加入核固红0.2g,置37℃水浴中1小时，并随

时振摇，使溶解，过滤后使用。

3.方法

(1)选髓粒丰富的骨髓片，用甲醇固定10分钟。

(2)髓片上滴满酸性亚铁氟化钾溶液，染色30分钟。

(3)用蒸储水冲洗后，用核固红复染20分钟。

4.结果判断

幼红细胞内出现蓝绿色颗粒为阳性。

5.正常参考值

正常：细胞内铁＞20%,细胞外铁+~++。

IDA：细胞内铁＜15%,细胞外铁阴性。

6.质量保证

(1)需观察外铁时玻片最好作去铁处理，取材涂片后应尽量减少污染铁，最好立即进行

染色。

(2)亚铁氟化钾溶液少量配制，如与盐酸混合后出现蓝色必须重配。

(3)酸性亚铁氟化钾溶液必须新鲜配制。

(4)选择髓粒丰富的骨髓涂片。

(5)胞外铁较规则，呈圆或椭圆，与细胞存在于同一平面，污染铁与细胞不在同一平面。

(6)瑞氏染色后的骨髓片，用甲醇脱色后仍可作铁染色。

(7)作阳性对照。

7.临床意义

(1)细胞内、外铁“I”、吞噬细胞内无贮存铁，可诊断为IDA。

(2)细胞内铁"I”、外铁“t”、吞噬细胞内有贮存铁，可诊断为ACD。

(3)细胞内铁"t”、外铁“t/N”、红细胞形态小、低色素，提示可能为Hb病。

(4)细胞内铁"t”、外铁“t/N”、环形铁粒幼红细胞＞15%,可考虑为环形铁粒幼细胞

性贫血(RAS)。

(5)MDS、AA：细胞内、外铁均“f

(三)过氧化物酶染色法(POX)

1.原理细胞内的过氧化物酶(peroxidase)能将底物的过氧化氢分解，产生新生态氧。

后者将试剂中的联苯胺氧化为联苯胺蓝，它是一种不稳定的中间产物，无需酶的作用进而变

成棕色化合物沉淀于酶的所在部位。

2.试剂

(1)第一液

联苯胺0.3g

360g/L亚硝基铁氧化钠饱和液1ml

95%乙醇加至100ml

贮存于棕色瓶中，可保存一年。小瓶分装备用。

(2)第二液(稀过氧化氢液，新鲜配制)

3%过氧化氢0.3ml

蒸储水25ml

3.方法

(1)于新鲜干燥血涂片或骨髓涂片上，滴加第一液5~8滴，使盖满整个血膜，作用1~2分

钟。

(2)滴加等量的第二液，混匀，染4~8分钟。

(3)勿倾去染液，直接用水冲洗。

(4)干燥后再用瑞氏染液复染。

4.结果

阴性：无蓝色或蓝棕色颗粒。

弱阳性：蓝色或蓝棕色颗粒小，分布较稀疏。

阳性：蓝色或蓝棕色颗粒略粗，分布较密集。

强阳性：蓝色或蓝棕色颗粒粗大。

5.质量保证

（1）联苯胺配制在85%~88%的乙醇溶液中染色效果较好，勿用90%~95%的乙醇，否则细

胞表面蛋白质很快凝固，妨碍试剂向内渗入而作用减弱。

（2）过氧化氢需新鲜配制，其浓度与加入量勿随意更改。

6.临床意义

（1）白血病类型：原始及幼稚细胞

”阳性强：AML

Y

①阳性率23%：ANLL-

弱阳性：AMOL

②阳性率＜3%：ALL

（2）成熟中性粒细胞过氧化物能变化

（3）活性t：ALL、CLL、感染、AA等。

活性I：AML、AMOL»

（4）恶组细胞：（一）

二、血液生化试验（选做4学时）

掌握：Coombs试验、蔗糖溶血试验、Hb电泳及HbF等试验的操作方法，结果判定，正常

值及临床意义。

熟悉：Coombs试验、蔗糖溶血试验、Hb电泳及HbF等试验的原理。

了解：Coombs试验、蔗糖溶血试验、Hb电泳等试验的试剂配制方法。

（一）抗人球蛋白试验（Coombs试验，直接法）

1.原理抗人球蛋白试验（Coombs试验）是用于检验不完全抗体的试验。用正常人血清、

血浆或血浆球蛋白注射免疫家兔，使兔体内产生抗人球蛋白抗体（温反应抗体）。其方法有

直接试验和间接试验两种。直接试验的目的是检查病人红细胞表面的不完全抗体、即经盐水

洗涤后的致敏红细胞悬液中加入抗人球蛋白血清，观察是否发生凝集，发生凝集者为Coombs

直接试验阳性。

2.试剂

抗人球蛋白血清，生理盐水。

3.方法

（1）取受检者脱纤维红细胞用生理盐水洗涤3次。然后配成20%幻:细胞生理盐水悬液。

（2）将抗人球蛋白血清按1:2、1:4、1:8、1:16的比例稀释。

（3）取一块白瓷板，将上述各稀释度抗血清各1滴，然后分别加20%红细胞1滴，混匀,

5分钟后观查结果。

4.结果

不凝集为阴性，凝集为阳性。按效价报告。

5.正常参考值

正常红细胞Coombs试验直接反应呈阴性。

6.质量保证

（1）标本应新鲜。当天进行试验，否则反应减弱甚至呈阴性。

（2）红细胞应充分冼涤，除去吸附的血浆球蛋白，以免中和抗人球蛋白而出现假阴性。

（3）冷凝集素很高的血标本，试验前应保持在37℃,并用温热盐水洗涤。

（4）抗凝剂对强抗体无明显影响，但可能对弱抗体或补体有影响。因此以脱纤维蛋白血为

好。

7.临床意义

（1）自身免疫性溶血性贫血时Coombs直接试验常为阳性。

（2）部分慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、传染性单核增多症、巨球蛋白血症、上重链病、

SLE、Evan综合征（ITP伴自免溶贫）可出现Coombs直接试验阳性。

（二）糖水试验

1.原理低离子浓度的庶糖溶液在37c温育条件下，可促进补体成分与红细胞膜的结合,

使补体敏感的红细胞形成小孔，庶糖水溶液进入红细胞内引起红细胞膜破裂，发生溶血现象。

2.试剂

1OOg/L蔗糖溶液，38g/L枸椽酸钠溶液。

3.方法

（1）取患者枸檬酸钠抗凝血0.5ml,放于4.5mll00g/L蔗糖溶液中。

（2）混合后置37℃水浴中30分钟。

（3）低速离心，观察上清液有无溶血

4.结果

阴性：无溶血；阳性：有溶血。

5.质量保证

器皿必须清洁干燥，以免溶血。每次实验时作正常对照。

6.临床意义

(1)PNH患者常呈阳性，AA-PNH综合征患者亦可阳性。

(2)部分自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、遗传性球形红细胞增多症患者可呈阳

性。

(3)健康人呈阴性反应。

(三)酸溶血试验(Ham，s试验)

1.原理阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)病人的红细胞由于膜有缺陷，对补体溶血效

应的敏感性增加，在酸化的正常血清中(PH6.6~6.8),经37℃孵育，易破坏溶血。

2.试剂

(1)25molHC1溶液。

(2)8.5g/LnaCl溶液。

3.方法

(1)取患者血4ml于有小玻璃珠的三角烧瓶内，轻摇使脱纤维，将此去纤维血用生理盐

水洗涤红细胞3次，配成50%红细胞悬液。

(2)取患者血.4ml(不抗凝)，待凝固后分离血清。

(3)按(1)、(2)方法取与患者同型或AB型正常对照的血制备红细胞悬液和血清。

(4)取2支小试管，按下表操作。

实验操作步骤

反应物待测管对照管

健康人血清(ml)0.50.5

患者50%RBC悬液(ml)0.025一

健康人50%RBC悬液(ml)—0.025

0.25molHCl(ml)0.5—

(5)两管均加塞，置37℃水浴中1小时。

(6)直接观察或低速离心后观察两管有无溶血现象。

4.结果判断

待测管溶血、对照管无溶血为阳性；两管均无溶血即为阴性。

5.质量保证

(1)本试验不用抗凝血，因抗凝剂会阻碍溶血，降低灵敏度。一般用脱纤维蛋白血或抽血

后立即注入生理盐水中洗涤。

(2)一切用具要干燥，针头要粗，红细胞悬液要直接滴入液体，不要沿管壁流下，以免溶

血。

(3)正常血清要新鲜，以免补体失活，造成假阴性。

(4)血清酸化后试管用塞盖好，避免因二氧化碳逸出降低了血清的酸度，以致溶血程度降

低。

6.临床意义结果阳性主要见于PNH。

(四)高铁血红蛋白还原试验(MHb-RT)

L原理高铁血红蛋白还原试验(methemogobinreductiontest,MHb-RT)是用亚硝酸钠

使血液中的亚铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白,当红细胞内的G6PD含量正常时，由磷酸戊糖

代谢途径生成的NADPH,可作为血液中高铁血红蛋白还原酶的辅酶，在递氢体美蓝的参与下,

使高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。如G6PD含量不足或缺乏时•，则高铁血红蛋白还原速

度减慢，甚至不能还原。通过测定高铁血红蛋白的还原速度来间接反应G6PD活性。

2.试剂：

(1)12.5g/L亚硝酸钠一葡萄糖溶液：亚硝酸钠1.25g,葡萄糖5g,加水至100mL棕色瓶

4℃可保存一个月。

(2)0.0004mol/L美蓝溶液：美蓝15mg放乳钵中，加少量蒸储水研磨后过滤，再加水至

100ml,室温可保存1~2个月。

(3)0.02M磷酸盐缓冲液(PBS,pH7.4)：Na2HPO4229.5mg,KH2PO452.2mg,加水至100mL

3.方法

(1)取静脉血3ml,加入已有0.3ml38g/L枸椽酸钠和30mg葡萄糖的抗凝管内。

(2)离心，使红细胞与血浆之比为1:1(去掉多余的血浆)。

(3)摇匀，取1.0ml全血，加亚硝酸钠一葡萄糖液和美蓝溶液各50uL颠倒混匀12次，

使与空气中的氧充分接触。加塞，37℃水中浴孵育3小时。剩余血未加试剂亦同时放

入37℃水浴中孵育3小时。

(4)取出孵育后摇匀的全血0.1ml加入含10ml0.02MPBS溶液的试管中，2min后于721

分光光度计635nm处比色，水调零，测其光密度为A。

(5)另取未加试剂的全血0.1ml,同(4)操作，测其光密度为B。再于此液中加亚硝酸钠

--葡萄糖液1滴，摇匀，放置5min后比色，测其光密度为S。

4.计算

高铁血红蛋白还原率%=（1-二8）xioo%

S-B

5.正常参考值

高铁血红蛋白还原率＞75%为正常，74%~31%为中间缺乏者（杂合子），＜30%为显著

缺陷（半合子或纯合子）。

6.质量保证

（1）红细胞比积对结果有一定影响，比积＜30%时，高铁血红蛋白还原率可明显降低。故

血浆与红细胞之比应严格控制在1：1（相当于红细胞比积35%~45%）。

（2）抗凝剂以38g/L的枸椽酸钠或ACD液为好。草酸盐不适于本法。

（3）血液保温后必须充分混匀，再吸取，否则结果可能稍大于100%。

（4）如果溶血液显示混浊，则不能直接比色，可能有不稳定血红蛋白存在，也可能因患者

有珠蛋白生成障碍性贫血以致红细胞脆性降低。前者可离心后用上清液比色，后者可

加入0.1%的皂素1滴，放置1075min,待红细胞溶解后再比色。

7.临床意义G6PD缺乏时，高铁血红蛋白还原率下降。蚕豆病和伯缄喳琳型药物溶血性贫

血等患者，均可出现下降结果。G6PD中间缺乏值（杂合子）还原率为31%~74%,脐血为

41%~76%；G6PD严重缺乏值（纯合子）还原率小于或等于30%,脐血小于40%。

（五）Hb电泳（HbA2定量）

1.原理血红蛋白电泳（hemoglobinelectrophresis）的目的是检出和确认正常和异常血

红蛋白。由于不同血红蛋白所带的电荷的差别，可将其分离和鉴别。正常人血红蛋白A、F、

M，在PH8.6缓冲液中电泳，它们均由负极端移向正极端。其移行速度以HbA最快、HbF

次之、HbA2速度最慢。以醋酸纤维素薄膜作支持物作血红蛋白电泳具有简便、快速的优点。

2.试剂

（1）电泳缓冲液（巴比妥缓冲液，离子强度0.06,PH8.6）

巴比妥钠6.38g（分子量206.18）

巴比妥0.83g（分子量184.19）

水加到500ml

（2）浸膜缓冲液（TEB缓冲液，PH9.0,0.12M）

Tris20.2g

EDTANa2•2H2O2g

硼酸1.5g

加蒸储水至1000ml

(3)染色液：氨基黑10B0.5g

甲醇50ml

冰醋酸25ml

水40ml

(4)漂洗液：无水乙醇45ml，冰醋酸5ml，水50m1。

(5)浸出液：0.4MNaOH

3.方法

(1)制备Hb液：新鲜抗凝血(枸椽酸钠抗凝)离心去血浆，用生理盐水洗涤红细胞3次,

然后加入与红细胞等体枳的蒸储水，剧烈震荡，使红细胞彻底溶解，加I1/2体积的四

氯化碳，震荡，用4000r/min离心20min,吸取上层血红蛋白液备用(此血红蛋白液

浓度为100g/L)»

(2)点样：取出醋纤膜(已用浸膜液浸泡至少20min)用滤纸吸去多余液体，在粗糙面距

阴极端1cm处点上血红蛋白液。同时平行点上正常血红蛋白液作对照。点样要求均

匀、直、细。将膜置于电泳槽支持板的滤纸桥上(点样面向下)。

(3)电泳：110V,40min»

(4)染色、漂洗：取出电泳后的醋纤膜放于氨基黑10B染液中染色5min,然后用漂洗液

漂洗数次至无血红蛋白区带处接近无染料色为止。

(5)定量：剪下HbA2和HbA带，分别放入3ml和12ml的0.4MNaOH溶液中，振摇，使

色带完全洗脱，620nm波长，用空白调零。

4.计算

HbA2OD

HbA=

2HbA2OD+HbAODx4

5.正常参考值：＜0.03o

6.质量保证

(1)点样过多，色带易脱落或染色不透(尤其是HbA带)，会造成HbA?相对增高，出现

假阳性结果。

(2)电泳后的HbA?和HbA要充分分开，否则影响测定结果。

(3)洗脱时要将Hb完全洗脱，否则影响测定结果。

(4)剪带时将HbF部份剪入HbA,HbA2带要严格控制。

7.临床意义

(1)通过与正常人的血红蛋白电泳图谱进行比较，可发现异常血红蛋白区带。如HbH、

HbE、HbBarts、HbS、HbD、HbC等血红蛋白异常疾病。

(2)HbAz增多时;见于p珠蛋白合成障碍性贫血，为P珠蛋白合成障碍性贫血杂合子的重

要实验室诊断指标。HbE病时也在HbA2区带位置处可使HbA2增浓，但含量较大，

在10%以上。HbA2轻度增加还可见于肝病、肿瘤和某些血液病。

(六)抗碱血红蛋白(HbF)测定

1.原理HbF对碱性物质有较大的抵抗力。当血红蛋白溶液中加入l/12mol/L氢氧化钾作

用1分钟，HbF不发生变性、而其它Hb在碱性溶液中可变性，被加入的酸性半饱硫酸镀沉

淀而终止反应，测定其滤液中Hb含量求抗碱血红蛋白百分含量。

6.试剂

(1)l/12mol/LKOH溶液：用lmol/LKOH溶液稀释后标定。

(2)酸性半饱和硫酸筱：取硫酸筱400g于500ml水中，置37℃水浴24小时，不断搅拌

使达到饱和，再冷却至25℃,搅拌一次，使过量的硫酸筱析出，上清液为饱和硫酸

镀溶液。取出此液400ml，加lmol/LHCL20ml,蒸储水加至800ml,混匀后室温保存。

7.方法

(1)取2支试管，1