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文档简介
课题1DNA的粗提取与鉴定
绘含硼缓,能力提升分基础/提技能/素养达成
[随堂巩固]
1.在DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤
(1)过滤用蒸储水稀释过的鸡血细胞液
(2)过滤含黏稠物的质量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液
(3)过滤溶解有DNA的质量浓度为2mol/L的NaCl溶液
以上三次过滤分别为了获得
A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
B.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA滤液
C.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNA
D.含较纯DNA滤液、纱布上黏稠物、含DNA滤液
解析过滤用蒸储水稀释过的鸡血细胞液,为了获得含核物质的滤液。过滤含黏稠物的
质量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液,获得纱布上的黏稠物。过滤溶解有DNA的质量浓度为
2mol/L的NaCl溶液,获得过滤溶解有DNA的质量浓度为2mol/L的NaCl溶液,A正确。
答案A
2.蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来。下列选项可达到上述同一目
的的是
A.蒸储水B.NaCl溶液
C.NaOH溶液D.盐酸
解析蛋白酶是利用酶的专一性将DNA和蛋白质分离,而NaCl溶液则是利用DNA和蛋
白质在该溶液中的溶解度不同将其分离。
答案B
3.在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是
A.用蒸储水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,滤去析出物
B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质
C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色
D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同
解析DNA的粗提取实验原理是0.14mol/LNaCl溶液中DNA溶解度最低,DNA不溶于
95%的冷酒精等,用蒸储水将2moi/LNaCl溶液浓度调至0.14mol/L,析出的是DNA,丢弃
的是滤液,A错误;DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同,DNA在2mol/LNaCl
溶液中溶解度最大,在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小,酶具有专一性,木瓜蛋白酶可
以水解DNA中的蛋白质类杂质,B正确;DNA丝状物溶解在2moi/LNaCl溶液中,加入二苯
胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色,C错误;植物细胞有细胞壁保护着,所以用菜花做实验
材料时,需要研磨,加入食盐和洗涤剂,D错误。
答案B
4.在混合物中提取DNA分子的基本思路是
A.根据各种大分子的理化性质的差异
B.根据各种大分子的理化性质的共性
C.根据各种大分子在细胞内的功能
D.根据各种大分子的结构和在细胞内的位置
解析在混合物中提取DNA分子的基本思路是根据各种大分子的理化性质的差异,A正
确。
答案A
5.关于DNA粗提取的实验材料的选择,研究者经过多次实验效果的比较,最终选择鸡
血做实验材料。请据图回答问题:
(1)在实验中,两次向烧杯中加入蒸储水的作用是。
A.稀释血液,冲洗样品
B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出
C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量
D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA。
(2)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若它们按实验要求完成实验步骤
后,结果是很难提取到DNA,原因是o
(3)不同的NaCl溶液中,DNA的溶解度不同,在NaCl溶液浓度是时,
DNA的溶解度最小。
(4)在DNA的析出和鉴定过程中析出DNA时应将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相
等的、冷却的(写出体积分数),静置后溶液中将析出DNA。鉴定时所用的试剂为
解析(1)在DNA粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸储水的作用分别是使血细
胞吸水涨破,释放DNA;降低NaCl浓度,使DNA析出。
(2)牛、羊和马属于哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核和细胞器,因此若
用它们的血液作为实验材料将很难提取到DNA,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利
进行,这是因为肝细胞有细胞核。
(3)不同的NaCl溶液中,DNA的溶解度不同,在NaCl溶液浓度是0.14mol/L时,DNA
的溶解度最小。
(4)在DNA的析出和鉴定过程中,析出DNA时应将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积
相等的、冷却的95%的酒精,静置后溶液中将析出DNA。鉴定时所用的试剂为二苯胺。
答案(DB
(2)牛羊马为哺乳动物,其成熟的红细胞中没有细胞核
(3)0.14mol/L(4)95%的酒精二苯胺
[限时检测]
[时间45分钟,满分80分]
一、选择题(每小题5分,共50分)
1.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正
确的是
甲乙
A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液,但两者浓度不同
B.图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝,另一支试管中的溶
液不变蓝
C.图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA析出,并缠绕在玻璃棒上
D.图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果
解析图甲烧杯中为酒精溶液,图乙试管中为NaCl溶液;图乙试管需要在沸水中加热
5min;图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,卷起丝状物;图乙操作中所用的二苯胺最好现
配现用,否则会影响鉴定的效果。
答案D
2.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方
法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同。下列有关叙述不正确的是
提取核物质时加去除杂质时加DNA鉴定时加入
组别实验材料
入的溶液入的溶液的试剂
95%的酒精
甲鸡血蒸储水二苯胺
50℃
95%的酒精(冷
乙菜花蒸储水双缩服试剂
却)
95%的酒精(冷
丙猪血蒸储水二苯胺
却)
95%的酒精(冷
T鸡血蒸播水二苯胺
却)
A.实验材料选择错误的组别是丙
B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁
C.甲组实验现象差的原因是50℃的酒精对DNA的凝集效果差
D.乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩胭试剂
解析猪血中的成熟红细胞中没有细胞核和细胞器,不能作为提取DNA的材料,A项正
确;乙组是植物材料,仅加入蒸储水无法提取DNA,需要先加入洗涤剂和食盐,丙组选材错
误,所以沸水浴后溶液颜色变蓝的组别只有甲、丁,B项正确;DNA在冷却的酒精中的溶解
度较低,50℃的酒精对DNA的凝集效果差,C项正确;乙组实验不成功不仅是因为在鉴定
时加入了双缩版试剂,还因为植物材料提取核物质时加入的溶液是蒸储水,起不到预期的效
果。
答案D
3.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述,错误的是
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随着溶液浓度的变化而变化
B.向鸡血细胞液中加入蒸储水的目的是使其吸水涨破,释放出其中的DNA
C.把DNA加入二苯胺溶液,在沸水浴中颜色不变,只有冷却后才能观察到蓝色
D.向滤液中加入冷却酒精的目的是除去DNA中的杂质,纯化DNA
解析DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低,高于或低于这个浓度,溶解度上
升,A项正确;鸡血细胞液中加入蒸储水的目的是使其吸水涨破,释放出其中的DNA,B项
正确;在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,C项错误;DNA不溶于酒精,因此向
滤液中加入冷却酒精的目的是除去DNA中的杂质,纯化DNA,D项正确。
答案C
4.下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂,错误的是
相关操作选用的试剂
A破碎鸡血细胞蒸储水
B溶解核内DNA0.14mol/L的NaCl溶液
C提取杂质较少的DNA冷却的95%的酒精
DDNA的鉴定现配的二苯胺试剂
解析在鸡血细胞液中加入蒸储水,使得血细胞吸水涨破,A正确;0.14mol/L的NaCl
溶液中DNA的溶解度最低,B错误;DNA不溶解于酒精,而其它杂质能溶解于酒精,则用体
积分数为95%的冷酒精能提取杂质较少的DNA,C正确;DNA用二苯胺鉴定呈蓝色,双缩版用
来检测蛋白质呈紫色,D正确。
答案B
5.DNA粗提取实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解。相关操作正确的是
A.以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解
B.向DNA溶液中迅速加入蒸储水,使DNA快速析出
C.将丝状物溶解到2mol-L-1NaCl溶液中后,加水析出
D.向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌
解析以菜花为材料进行研磨时,可以加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研
磨,过滤后收集研磨液,A项错误;为避免DNA断裂,加入蒸储水要缓慢,B项错误;将丝
状物溶解到2mol-r1NaCl溶液中后,加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为95%
的酒精溶液,静置2〜3min,以析出含杂质较少的DNA,C项错误;为避免DNA断裂和降解,
要向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌,D项正确。
答案D
6.在DNA的粗提取实验中,加入与滤液体积相等的、冷却的A溶液,静置2〜3min,
溶液中会出现白色丝状物。上面的A溶液是指
A.0.9%的NaCl溶液
B.0.14mol/L的NaCl溶液
C.质量分数为15%的HC1
D.体积分数为95%的酒精溶液
解析在DNA的粗提取实验中,加入与滤液体积相等的、冷却的A溶液,静置2〜3min,
溶液中会出现白色丝状物。上面的A溶液是指体积分数为95%的酒精溶液。所以D正确。A、
B、C不正确。
答案D
7.下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是
A.取材:鸡血细胞;原因:有细胞核,其他动物的血细胞都没有细胞核
B.粗提取:不同浓度的NaCl溶液;原因:DNA在其中的溶解度不同
C.提纯:95%的冷酒精;原因:DNA溶于酒精,蛋白质等杂质不溶于酒精
D.鉴定:二苯胺试剂;原因:DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色
解析除了哺乳动物成熟的红细胞,其他都有细胞核,A错误;不同浓度的NaCl溶液,
DNA在其中的溶解度不同,进而粗提取DNA,B正确;DNA不溶于酒精,而蛋白质等杂质溶于
酒精,进而提纯DNA,C错误;DNA溶液加入二苯胺试剂后沸水浴加热成蓝色,D错误。
答案B
8.在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度及其
名称分别是
①0.1g/mL的柠檬酸钠溶液
②物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液
③物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液
④体积分数为95%的酒精溶液
⑤物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液
⑥物质的量浓度为0.04mol/L的NaCl溶液
A.①③⑤B.③④
C.②④D.②③④
解析0.1g/ml的柠檬酸钠溶液是作为抗凝剂防止血液凝固的,不能用于DNA的初步
析出和提纯,①错误;DNA在2.00mol/L的NaCl溶液中溶解度较大,可以利用该溶液从血
细胞中提取DNA,但不能用于DNA的初步析出和提纯,②错误;DNA在0.14mol/L的NaCl
溶液中溶解度最低,此时DNA会从溶液中析出,可用于初步析出DNA,③正确,⑤⑥错误;
由于DNA不溶于酒精,而其它杂质可以溶于酒精,因此利用体积分数为95%的酒精溶液,可
提取较纯净的DNA,④正确。因此,B项正确,A、C、D项错误。
答案B
9.下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是
A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
C.常温下菜花浆中有些酶类会影响DNA的提取
D.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少
解析
选项正误判断理由
AX洗涤剂不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
BXDNA丝状物加入二苯胺后沸水浴加热后呈现蓝色,并不要冷却
CV常温下菜花研磨匀浆中含有一些酶会影响DNA的提取
DX玻璃棒搅拌滤液不会导致DNA含量的减小
答案C
10.若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状物、用二苯胺鉴定时
不显示颜色反应等,其可能的原因是
①植物细胞中DNA含量低②研磨不充分③过滤不充分④95%冷酒精的量过多
A.①②B.③③
C.①④D.②③
解析研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少;过滤不充分也
会导致提取的DNA量过少;若用于沉淀DNA的酒精量过少,会导致DNA的沉淀量少。这三种
情况都可能导致题中的实验效果。
答案D
二、非选择题(共3小题,共30分)
11.(10分)下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
⑴图中实验材料A可以是等,研磨前加入的B应该是
__________________________________________________________________O
⑵通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入2moL/L的NaCl溶液的目的是
________________________________________________________,
再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸储水的目的是
(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2
mL的4种溶液中,经搅拌后过滤,获得如表所示的4种滤液,含DNA最少的是滤液=
1研磨液搅拌后过滤滤液E
22moL/LNaCl溶液搅拌后过滤滤液F
30.14mol/LNaCl溶液搅拌后过滤滤液G
4冷却的95%的酒精溶液搅拌后过滤滤液H
(4)DNA鉴定的原理是____________________________________________
解析(1)选用洋葱、菜茎等植物材料提取DNA时,要在切碎的材料中加入一定量的洗
涤剂和食盐,进行充分搅拌和研磨。(2)DNA在2moi/L的NaCl溶液中的溶解度较高,而在
0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小。向溶液中加入2mol/L的NaCl溶液可以使DNA溶
解,过滤除去不溶的杂质,向溶液中加入蒸储水可降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出,除
去溶解在低盐溶液中的杂质。(3)DNA不溶于酒精,因此在4种滤液中H滤液含DNA最少。
(4)DNA鉴定的原理是在沸水的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
答案(1)洋葱洗涤剂和食盐
⑵使DNA溶解使DNA析出
(3)H
(4)在沸水条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色
12.(10分)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10go剪碎后分成两组,一组
置于20℃、另一组置于一20。。条件下保存24h„
DNA粗提取:
步骤一:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液(含洗涤剂和食盐),充分研
磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。
步骤二:先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒
精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。步骤三:取6
支试管,分别加入等量的(填溶液名称及浓度)溶液溶解上述絮状物。
步骤四:在上述试管中各加入4mL试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5min,
待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:
材料保存温度花菜辣椒
20℃++++++
-20℃+++++++++
(注:"十”越多表示蓝色越深)
分析上述实验过程,回答下列问题:
(1)该探究性实验课题名称是=
(2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是,食盐的作用是=
(3)步骤二中“缓缓地”搅拌,这是为了,
所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制的活性,可以防止DNA降解。
(4)上述实验中步骤三、步骤四的空缺依次分别为、。
(5)实验表明,获取的DNA量最多。
解析(1)表中信息显示,该实验有两个自变量:实验材料和温度,所以该探究性实验
课题名称是:探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。
(2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是溶解细胞膜,有利于细胞内DNA的释放。食盐的
作用是溶解DNAo
(3)步骤二中“缓缓地”搅拌,这是为了防止DNA断裂,所加酒精溶液需冷却的原因之
一是低温抑制DNA水解酶的活性,可以防止DNA降解。
(4)步骤二中得到的缠绕在玻璃棒上的絮状物是DNA»在鉴定DNA时,需将DNA溶解在2
mol/LNaCl溶液中,所用的鉴定试剂为二苯胺,所以上述实验中步骤三、步骤四的空缺依
次分别为2mol/LNaCK二苯胺。
(5)表中的“+”越多表示蓝色越深,而DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成蓝色,据此可知:
保存在一20°C的蒜黄获取的DNA量最多。
答案(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)溶解细胞膜溶解
DNA(3)减少(或防止)DNA断裂DNA水解酶(或核酸水解酶或DNA酶)
(4)2mol/LNaCl二苯胺(5)保存在一20℃的蒜黄
13.(10分)某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行DNA粗提取和鉴定的实验,实验
主要过程如下图,回答下列问题:
步骤一步骤二
将蛋白质与DNA分离并去
破碎细胞
除蛋白质
步骤三步骤四
沉淀DNA并进一步去除蛋白
DNA的鉴定
质和其他杂质
(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和对洋葱
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