干细胞的基础知识

干细胞的基础知识干细胞的基础知识干细胞的概念干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。它包括胚胎干细胞和成体干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已可胜利地在体外培育。最新探讨发觉，成体干细胞可以横向分化为其他类型的细胞和组织，为干细胞的广泛应用供应了基础。在胚胎的发生发育中，单个受精卵可以分裂发育为多细胞的组织或器官。在成动物中，正常的生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的，具有分化为几乎全部组织和器官的实力。而成组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织。然而，这个观点目前受到了挑战。最新的探讨表明，组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能，这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。干细胞具有自我更新实力（），能够产生高度分化的功能细胞。干细胞根据生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。1.1胚胎干细胞胚胎干细胞（,细胞）当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细胞团（）的细胞即为胚胎干细胞。胚胎干细胞具有全能性，可以自我更新并具有分化为体内全部组织的实力。早在1970已从小鼠中分别出胚胎干细胞并在体外进行培育。而人的胚胎干细胞的体外培育直到最近才获得胜利。进一步说，胚胎干细胞（细胞）是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的全部组织和器官，包括生殖细胞。探讨和利用细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。细胞的探讨可追溯到上世纪五十代，由于畸胎瘤干细胞（细胞）的发觉开始了细胞的生物学探讨历程。目前很多探讨工作都是以小鼠细胞为探讨对象绽开的，如：德美医学小组在去胜利的向试验鼠体内移植了由细胞培育出的神经胶质细胞。此后，密苏里的探讨人员通过鼠胚细胞移植技术，使瘫痪的猫复原了部分肢体活动实力。随着细胞的探讨日益深化，生命科学家对人类细胞的了解迈入了一个新的阶段。在98末，两个探讨小组胜利的培育出人类细胞，保持了细胞分化为各种体细胞的全能性。这样就使科学家利用人类细胞治疗各种疾病成为可能。然而，人类细胞的探讨工作引起了全世界范围内的很大争议，出于社会伦理学方面的缘由，有些国家甚至明令禁止进行人类细胞探讨。无论从基础探讨角度来讲还是从临床应用方面来看，人类细胞带给人类的好处远远大于在伦理方面可能造成的负面影响，因此要求绽开人类细胞探讨的呼声也一浪高似一浪。1.2成体干细胞成动物的很多组织和器官，比如表皮和造血系统，具有修复和再生的实力。成体干细胞在其中起着关键的作用。在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。过去认为成体干细胞主要包括上皮干细胞和造血干细胞。最近探讨表明，以往认为不能再生的神经组织仍旧包含神经干细胞,说明成体干细胞普遍存在，问题是如何找寻和分别各种组织特异性干细胞。成体干细胞常常位于特定的微环境中。微环境中的间质细胞能够产生一系列生长因子或配体，及干细胞相互作用，限制干细胞的更新和分化。1.3造血干细胞造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓,外周血,脐带血中。今初，协和医大血液学探讨所的庞文新又在肌肉组织中发觉了具有造血潜能的干细胞。造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病,先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。在临床治疗中，造血干细胞应用较早，在20世纪五十代，临床上就开始应用骨髓移植（）方法来治疗血液系统疾病。到八十代末，外周血干细胞移植（）技术渐渐推广开来，绝大多数为自体外周血干细胞移植（），在提高治疗有效率和缩短疗程方面优于常规治疗，且效果令人满足。及两者相比，脐血干细胞移植的特长在于无来源的限制，对配型要求不高，不易受病毒或肿瘤的污染。在今初，东北地区首例脐血干细胞移植胜利，又为中国造血干细胞移植技术注入新的活力。随着脐血干细胞移植技术的不断完善，它可能会代替目前的地位，为全世界更多的血液病及恶性肿瘤的患者带来福音1.4神经干细胞关于神经干细胞探讨起步较晚，由于分别神经干细胞所需的胎儿脑组织较难取材，加之胚胎细胞探讨的争议尚未平静，神经干细胞的探讨仍处于初级阶段。理论上讲，任何一种中枢神经系统疾病都可归结为神经干细胞功能的紊乱。脑和脊髓由于血脑屏障的存在使之在干细胞移植到中枢神经系统后不会产生免疫排斥反应，如：给帕金森氏综合症患者的脑内移植含有多巴胺生成细胞的神经干细胞，可治愈部分患者症状。除此之外，神经干细胞的功能还可延长到药物检测方面，对推断药物有效性,毒性有一定的作用。事实上，到目前为止，人们对干细胞的了解仍存在很多盲区。2000初美国探讨人员无意中发觉在胰腺中存有干细胞；加拿大探讨人员在人,鼠,牛的视网膜中发觉了始终处于“休眠状态的干细胞”；有些科学家证明骨髓干细胞可发育成肝细胞，脑干细胞可发育成血细胞。随着干细胞探讨领域向深度和广度不断扩展，人们对干细胞的了解也将更加全面。21世纪是生命科学的时代，也是为人类的健康长寿创建世界奇迹的时代，干细胞的应用将有广袤前景。干细胞应用的基础——调控干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增值和分化进行调控，使之向指定的方向发展。2.1内源性调控干细胞自身有很多调控因子可对外界信号起反应从而调整其增殖和分化，包括调整细胞不对称分裂的蛋白，限制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。（1）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控干细胞分裂可能产生新的干细胞或分化的功能细胞。这种分化的不对称是由于细胞本身成分的不均等安排和四周环境的作用造成的。细胞的结构蛋白，特殊是细胞骨架成分对细胞的发育特别重要。如在果蝇卵巢中，调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器，包含有很多调整蛋白，如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体及纺锤体的结合确定了干细胞分裂的部位，从而把维持干细胞性状所必需的成分保留在子代干细胞中。（2）转录因子的调控在脊椎动物中，转录因子对干细胞分化的调整特别重要。比如在胚胎干细胞的发生中，转录因子4是必需的。4是一种哺乳动物早期胚胎细胞表达的转录因子，它诱导表达的靶基因产物是4等生长因子，能够通过生长因子的旁分泌作用调整干细胞以及四周滋养层的进一步分化。4缺失突变的胚胎只能发育到囊胚期，其内部细胞不能发育成内层细胞团[1]。另外白血病抑制因子（）对培育的小鼠细胞的自我更新有促进作用，而对人的成体干细胞无作用，说明不同种属间的转录调控是不完全一样的。又如转录因子家族对上皮干细胞的分化特别重要。是信号通路的中间介质，当及β形成转录复合物后，促使角质细胞转化为多能状态并分化为毛囊。干细胞应用的基础——调控干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增值和分化进行调控，使之向指定的方向发展。2.2外源性调控除内源性调控外，干细胞的分化还可受到其四周组织及细胞外基质等外源性因素的影响。（1）分泌因子间质细胞能够分泌很多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。有两类因子在不同组织甚至不同种属中都发挥重要作用，它们是β家族和信号通路。比如家族中至少有两个成员能够调整神经嵴干细胞的分化。最近探讨发觉，胶质细胞衍生的神经养分因子（）不仅能够促进多种神经元的存活和分化，还对精原细胞的再生和分化有确定作用。缺失的小鼠表现为干细胞数量的削减，而的过度表达导致未分化的精原细胞的累积[3]。的作用机制是通过阻挡β分解从而激活介导的转录，促进干细胞的分化。比如在线虫卵裂球的分裂中，邻近细胞诱导的信号通路能够限制纺锤体的起始点和内胚层的分化。（2）膜蛋白介导的细胞间的相互作用有些信号是通过细胞-细胞的直接接触起作用的。β就是一种介导细胞粘附连接的结构成分。除此之外，穿膜蛋白及其配体或也对干细胞分化有重要影响。在果蝇的感觉器官前体细胞，脊椎动物的胚胎及成组织包括视网膜神经上皮,骨骼肌和血液系统中，信号都起着特别重要的作用。当及其配体结合时，干细胞进行非分化性增殖；当活性被抑制时，干细胞进入分化程序，发育为功能细胞[4]。（3）整合素（）及细胞外基质整合素家族是介导干细胞及细胞外基质粘附的最主要的分子。整合素及其配体的相互作用为干细胞的非分化增殖供应了适当的微环境。比如当β1整合素丢失功能时，上皮干细胞逃脱了微环境的制约，分化成角质细胞。此外细胞外基质通过调整β1整合素的表达和激活，从而影响干细胞的分布和分化方向。2.3干细胞的可塑性越来越多的证据表明，当成体干细胞被移植入受体中，它们表现出很强的可塑性。通常状况下，供体的干细胞在受体中分化为及其组织来源一样的细胞。而在某些状况下干细胞的分化并不遵循这种规律。1999等人分别出小鼠的肌肉干细胞，体外培育5天后，及少量的骨髓间质细胞一起移植入接受致死量辐射的小鼠中，结果发觉肌肉干细胞会分化为各种血细胞系。这种现象被称为干细胞的横向分化（）[5]。关于横向分化的调控机制目前还不清晰。大多数观点认为干细胞的分化及微环境亲密相关。可能的机制是，干细胞进入新的微环境后，对分化信号的反应受到四周正在进行分化的细胞的影响，从而对新的微环境中的调整信号做出反应。干细胞应用平台技术3.1技术原理在细胞的分化过程中，细胞往往由于高度分化而完全失去了再分裂的实力，最终苍老死亡。机体在发展适应过程中为了祢补这一不足，保留了一部分未分化的原始细胞，称之为干细胞（）。一旦生理须要，这些干细胞可根据发育途径通过分裂而产生分化细胞，也可以这样说，这些干细胞充当了分化细胞‘预备队’的角色。在动物体中，多数组织含有干细胞，甚至在进化的早期，最初级的后生动物-海绵也含有称之为`始祖母细胞`的干细胞。干细胞有以下特点：（1）干细胞本身不是处于分化途径的终端。（2）干