遗传学第六章 病毒的遗传分析课件

遗传学第六章病毒的遗传分析

第六章病毒的遗传分析一、病毒的形态结构与基因组P184二、噬菌体的增殖与突变型（一）噬菌体的增殖P186（二）噬菌体的突变型1、条件致死突变在某些条件下，导致某些突变型致死，而另外一些条件下仍能增殖。致死条件为限制条件（restrictivecondition)。增殖条件为许可条件（permissivecondition)。遗传学第六章病毒的遗传分析（1）温度敏感突变热敏感突变冷敏感突变（2）抑制因子敏感突变（sus突变）

sus突变

su+突变：宿主菌含有抑制基因su+，sus突变噬菌体感染此类菌时能产生后代。遗传学第六章病毒的遗传分析2、噬菌斑形态突变（1）T4噬菌体简介

T4噬菌体为T-偶列噬菌体之一，基因组为165Kb的双链DNA分子，包括160个基因，宿主为E.coli。形态特征环状遗传学图遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析（2）T4野生型和突变型侵染E.coliB

和E.coliK(λ）噬菌斑的变化◆快速裂解（rapidlysis，r）突变：r-，形成大噬菌斑；r+，缓慢裂解，形成小噬菌斑。

P191表8-4T4野生型和突变型的区别类型表型

BK(λ）

野生型小噬菌斑小噬菌斑

rⅡ大噬菌斑无噬菌斑遗传学第六章病毒的遗传分析3、宿主范围突变型◆宿主范围(hostrange，h)：h-表示可同时感染两种不同的E.coli菌株B，B-2，噬菌斑透明。h+表示只感染菌株B，噬菌斑半透明。遗传学第六章病毒的遗传分析三、噬菌体突变型的重组测验（一）Benzer的重组测验和基因的精细结构分析实验：T4rⅡ区两种突变型rⅡ63，rⅡ12同时侵

染E.coliB和E.coliK(λ），结果如下：遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析重组率=2×野生型噬菌斑数×100%

噬菌斑总数重组测验：确定突变基因间的空间关系。遗传学第六章病毒的遗传分析（二）T2突变型的两点测交与作图遗传学第六章病毒的遗传分析（三）λ噬菌体的基因重组与作图（四）T4突变型的三点测交与作图遗传学第六章病毒的遗传分析四、噬菌体突变型的互补测验（一）互补测验与顺反子互补测验：确定突变基因间的功能关系。判断两个突变是位于同一个基因内的突变，还是两个基因间的突变。互补：一种突变型能弥补另一种突变型不具有的功能。这两种突变就称为彼此互补。顺式排列，反式排列。遗传学第六章病毒的遗传分析斑点测试法（spottest)P196

用一种rⅡ突变型以0.1的感染比（噬菌体1:细菌10）感染大肠杆菌K(λ），噬菌体和细菌在温热的琼脂中混合，涂布在营养平板上，琼脂凝固后，在平板上划出一定位置，再在上面滴加含另一种rⅡ突变型的培养基。在这一滴培养基范围内，一些菌被两种噬菌体感染，如这范围内形成噬菌斑，就证明这两种突变型互补，相反则不互补。在一个培养基上可做6—8个斑点试验。遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析

在反式测验中，如两个突变之间能互补，则表明两个突变是位于两个基因（顺反子）内的突变。如两个突变之间不能互补，则表明两个突变是位于同一个基因内的突变。遗传学第六章病毒的遗传分析顺反子：一个不同突变之间没有互补的功能区称为顺反子（cistron)。遗传学第六章病毒的遗传分析（二）基因内互补例外情况。如：沙门氏杆菌甘油磷酸脱氢酶基因；大肠杆菌和脉孢菌色氨酸合成酶基因；脉孢菌谷氨酸脱氢酶基因。1、基因内互补和基因间互补的区别P2002、基因内互补的作用机制P202图8-14遗传学第六章病毒的遗传分析五、噬菌体T4rⅡ缺失突变与作图（一）缺失作图的原理

缺失突变（deletionmutation）：一个顺反子内缺失一段核苷酸的突变。

点突变（pointmutation）：一个顺反子内单个核苷酸发生的改变。

当同一顺反子内的缺失突变和点突变重叠时，不能产生基因内重组,因此无野生型噬菌体。遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析（二）缺失作图的方法

利用重叠缺失定位未知的rⅡ突变：

根据是否产生野生型噬菌体，系列Ⅰ将rⅡ突变定于A5片段；系列Ⅱ将rⅡ突变定于A5c区；系列Ⅲ将其定于A5c3区。

遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒的遗传分析rⅡ基因座A、B顺反子的部分突变图，每个正方形代表一个独立分离的突变遗传学第六章病毒的遗传分析六、λ噬菌体的基因组与位点专一性重组（一）λ噬菌体的基因组遗传学第六章病毒的遗传分析(二）位点专一性重组的分子机制遗传学第六章病毒的遗传分析遗传学第六章病毒