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文档简介

RNA电泳理想结果RNA电泳理想结果实验六PCR反应

PCR的过程：高温变性：将反应体系置于高温下变性，使双链DNA解链为两单链一、实验目的

了解PCR的基本原理，掌握PCR的基本操作技术。二、实验原理PCR技术是通过模拟体内DNA复制的方式，在体外选择性地将DNA的某个特殊区域扩增出来的技术。低温退火：引物与模板链结合，形成部分双链DNA中温延伸：TaqDNA聚合酶使引物从5′端向3′端延伸，4种dNTP掺入合成新的DNA互补链反复进行这种变性、退火和聚合反应循环，可使两端引物限定范围内的DNA序列以指数形式扩增。五、实验步骤1、PCR反应混合液的配制(50μl)10xPCRbuffer5μldNTPmixture4μl前向引物P12μl反向引物P22μl模板DNA0.1μlrTaq酶0.5μl

所有试剂按量仔细添加后，轻轻混匀，稍离心后即可，为了防止反应混合液蒸发，最后添加20μl矿物油。

去离子水36.4μl2、PCR仪的参数设置

94℃4min94℃30sec62℃30sec72℃20sec72℃5min3、琼脂糖凝胶电泳检测

40cycles

反应结束后，取5μlPCR产品，加入1μl6xloadingbuffer，混匀后点样，电泳15m

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