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文档简介
高中生物学选择性必修3期末复习知识清单①防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染②防止水分过快蒸发
II、常用的接种方法有几种?能否获得单菌落?能否计数?
第1章发酵工程①平板划线法、稀释涂布平板法②都可获得单菌落③稀释涂布平板法可计数
1、腐乳制作中利用了哪些微生物?主要的是什么微生物?原理是?12、如何判断培养基灭菌是否彻底?
①酵母菌、曲霉、毛霉②主要是毛霉③原理是蛋白质被蛋白酶分解为小分子肽和氨基酸将空白平板置于恒温培养箱中培养,观察是否有菌落长出
2、传统发酵主要什么类型的发酵?混合菌种的固体及半固体的发酵13、什么叫选择培养基?尿素分解细菌为什么可以利用尿素?如何筛选?
3、填表①允许特定微生物生长,同时阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基
果酒果醋腐乳泡菜②因为尿素分解细菌可以分泌服酶,将尿素分解产生NH3,为其提供氮源
发酵菌酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌③配置以尿素为唯一氮源的培养基,接种样品进行筛选
真核原核真核原核真核原核14、计数微生物的方法?两种方法的比较
代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型异养需氧型异养厌氧型①稀释涂布平板法(活菌计数法)、显微镜直接计数法(用血球计数板或细菌计数板)
②()稀释涂布平板法计数,能直接区分活细胞和死细胞,但是计数结果偏少
产物酒精+CO2醋酸乳酸1
()显微镜直接计数法,不能直接区分活细胞和死细胞,除非用染色剂,如台盼蓝
需氧情况先有氧后无氧有氧有氧无氧2
15、稀释涂布平板法计数的原理?结果偏小的原因是什么?
温度18-30°C30-35°C15〜18°C常温
①当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌
检测方法闻气味、品尝、酸性闻气味、品尝、闻气味、品尝、
②当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落
条件下的重铝酸钾pH试纸检测pH试纸检测
、稀释涂布平板法计数时为什么选择菌落数稳定时的记录作为结果?
(橙色一灰绿色)16
防止因培养时间不足,导致菌落遗漏
4、写出果酒酿制的反应式;果醋反应式(糖源不充足的)青况)酶
、发酵工程的基本环节是什么?发酵时要随时检测什么?要严格控制什么?
果酒:C6H12O6—雪2c2HQH+2c+能量,果醋:C2H5OH+O2与-CH3COOH+H2O+能量17
①发酵②随时检测培养液中微生物数量、产物浓度等③严格控制温度、pH、溶解氧等
5、果酒的制作中菌种来源?每隔12h排一次二氧化碳,如何操作?
18、发酵产品可以是什么?单细胞蛋白是什么?
①果皮表面附着的不同种类的野生型酵母菌②拧松瓶盖
①发酵产品可以是微生物细胞本身、微生物的代谢物
6、培养基的成分一般都含有什么?根据物理状态可分为?区别是什么成分?
②大量的微生物菌体
①培养基一般都含有水、无机盐、碳源、氮源②固体培养基和液体培养基
③区别是是否含有琼脂第2章细胞工程
7、无机碳源可以培养什么微生物?不加氮源可以培养什么生物?培养细菌一般培养基PH要呈?
植物细胞工程
①无机碳源可以培养自养型微生物②不加氮源可以培养固氮菌
1、植物组织培养的过程
③一般培养基PH要呈中性或弱碱性
8、消毒的原理,及常见方法及对应物品?外植体典鹫愈伤组织型&根、芽等器官生长雪完整植株
消毒是用较温和的物理、化学、生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物
2、植物组织培养中生长素和细胞分裂素比值对诱导结果的影响?
巴氏消毒法牛奶等不耐高温的液体(能杀死牛奶中绝大多数微生物,并且基本不会破会牛奶
①比值高有利于根的分化②比值低有利于芽的分化③比值适中促进形成愈伤组织
的营养成分)
3、植物组织培养的过程哪个阶段不需要光照?
煮沸消毒法家庭餐具等
脱分化,即形成愈伤组织的阶段
紫外线消毒接种室、超净工作台等
4、植物体细胞杂交技术中,去除细胞细胞壁用什么?诱导原生质体融合的方法有哪些?体细胞杂交
化学药剂消毒皮肤、伤口等
的原理是什么?植物体细胞杂交技术的优点?
9、灭菌的原理,及常用的方法及对应物品?
①去除植物细胞壁用纤维素酶和果胶酶
灭菌是用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽抱和狗子
②诱导原生质体融合的方法有:离心、电融合、PEG、高Ca?+-高pH.
灼烧灭菌接种环、涂布器、试管口及金属用具
③体细胞杂交的原理是:细胞膜的流动性和植物细胞全能性
干热灭菌耐高温的、需要保持干燥的物品如玻璃器皿、金属用具等
④植物体细胞杂交技术的优点是打破生殖隔离,实现远缘杂交育种
湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)培养基
5、培养脱毒苗的原理?
10、倒平板后为什么要倒置?
植物顶端分生区附近的病毒极少,甚至无病毒
6、单倍体育种的步骤和原理及优点?证明了已经分化的动物细胞的细胞核具有全能性
①步骤:先花药离体培养,再用秋水仙素加倍12、受精的准备包括什么?受精的场所?人工配置的精子获能液的有效成分?
②原理:植物细胞的全能性和染色体变异①包括精子的获能和卵子的成熟(MII期)②受精的场所是输卵管③肝素和Ca?+载体
③优点:明显缩短育种年限;一般培育出的是稳定遗传的纯合子14、防止多个精子进入卵细胞的两个反应分别是?
7、细胞产物的工厂化生产中,一般培养到哪个阶段?透明带发生生理反应、卵细胞膜发生生理反应
一般将外植体脱分化形成愈伤组织,再将愈伤组织制成细胞悬液进行培养,提取产物15、受精的标志?受精完成的标志?
动物细胞工程受精的标志:观察到2个极体或者雌、雄原核
1、动物细胞培养的条件有哪些?受精完成的标志:雌雄原核融合
(1)营养条件:除各种营养物质外还要加血清等天然成分16、早期胚胎发育的特点?什么时期开始分化?
(2)无菌无毒:培养液和用具无菌处理,定期更换培养液,以便清除代谢废物,防止细胞代谢物积细胞数量不断增加,胚胎总体积并不增加。囊胚期开始分化
累对细胞造成危害17、囊胚的结构?
(3)温度、pH和渗透压:温度:36.5pH7.2-7.4滋养层(发育为胎盘和胎膜)、内细胞团
(4)气体环境:95%空加5%CO2,CO2主要维持培养液的pH。18、什么叫孵化?
2、动物细胞培养过程中,细胞的两种生长方式是?哪一种是常见类型?囊胚从透明带中伸展出来
悬浮生长和贴壁生长;贴壁生长19、胚胎移植前要对供体和受体进行什么处理?为什么?如何处理?
3、动物细胞培养过程中,悬浮生长和贴壁生长的细胞分裂受阻的原因分别是?①进行同期发情处理②保证供体与受体的生理状态一致③用性激素处理
悬浮生长:细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏20、供体母牛还要进行什么处理?如何处理?
贴壁生长:细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏、接触抑制①超数排卵②用促性腺激素
4、悬浮生长和贴壁生长的细胞分裂受阻后进行分瓶培养,怎么收集细胞?分瓶后的培养叫什么?21、胚胎移植的优势?
①悬浮生长:离心法收集贴壁生长:先用胰蛋白酶处理,再离心法收集②分瓶后叫传代培养充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
5、干细胞的种类?干细胞的来源?诱导iPS的方法有?22、胚胎分割可选择什么阶段的胚胎?需要注意的问题是?
胚胎干细胞和成体干细胞等①发育良好的桑甚胚或囊胚②选择囊胚阶段的胚胎时,要注意将内细胞团均等分割
胚胎干细胞来源于早期胚胎,成体干细胞中的造血干细胞来源于骨髓和脐带血、外周血等23、通过胚胎分割产生的胚胎是什么繁殖方式?若进行性别鉴定,选择什么细胞?
借助载体将特定基因导入细胞;直接将特定蛋白导入细胞;用小分子化合物诱导①属于无性繁殖或者克隆②选择滋养层细胞
6、传统方法如何生产抗体?生产抗体的缺点是?
从动物血清中分离产量低、纯度低、特异性差
7、单克隆抗体的制备中第一次、第二次筛选分别用什么方法?
①第一次筛选:用特定的选择培养基,只有融合的杂交瘤细胞才能生长第3章基因工程
②第二次筛选:克隆化培养和抗体检测,获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。技术:抗原一抗体
1、基因工程的操作原理、操作对象、操作水平、优点分别是什么?
杂交技术
操作原理一基因重组;操作对象一基因;操作水平一分子水平;
8、单克隆抗体的优点?
优点:定向改造生物的性状,打破生殖隔离
①能准确地识别抗原的细微差异②与特定抗原发生特异性结合③可大量制备
2、基因工程的三种工具分别是什么?
9、单克隆抗体的应用?
限制酶、DNA连接酶、载体
①作为诊断试剂盒②运载药物,如ADC③治疗疾病
3、限制酶的来源?作用的结果是什么?为什么不切割原核细胞中的DNA?
10、诱导动物细胞融合的方法有?
来源主要来自原核生物;结果是产生黏性末端或平末端;
PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法
含某种限制酶的细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列,或者甲基化酶将甲基转移到了限制
10.1、核移植技术中,受体细胞选择Mil期卵母细胞的原因?
酶所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开
细胞体积大,易操作;卵母细胞中含有激活细胞全能性表达所需的物质
4、DNA连接酶的作用和种类?
10.2激活重构胚的方法?
电刺激、Ca"载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂①作用:将两个DNA片段连接起来,恢复被限制酶切开的两个核昔酸之间的磷酸二酯键。
11、动物克隆的成功证明了?②种类:E.coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来
T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,既可以连接黏性末端,又可以连接平末端,但连接③延伸:当温度上升到72℃左右时,4种脱氧核昔酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下合
平末端的效率相对较低成新的DNA链
(2)鉴定:常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物
5、能做用于磷酸二酯键的酶有哪些?作用于氢键的酶有哪些?13、基因表达载体构建的目的是什么?
DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶、DNA水解酶、逆转录酶;氢键的酶是DNA解旋酶让目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用
6、载体的种类有哪些?14、基因表达载体的组成包括什么?
质粒、噬菌体、动植物病毒等
目的基因
7、常用载体一质粒的本质是什么?
「位置:位于基因的醺
质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,并具有自我启动子《功能:是典塞食迷识别和结合的部
复制能力的环状双链DNA分子位,痴基因转录出
复制原点IjmRNA
8、质粒作为载体所具备的条件及原因
.位置:位于基因的下游
终止子
条件原因功能:终止转录
稳定存在并能自我复制或整合到受体DNA上能使目的基因稳定存在且数量可扩增标记基因:便于重组DNA分子的筛选
有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因
15、基因表达载体的构建过程是什么?
具有特殊的标记基因便于重组DNA分子的筛选
(1)首先用一定的限制酶切割载体
对受体细胞无毒害作用,避免受体细胞
无毒害作用(2)然后用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段
受到损伤
(3)再利用DNA连接酶将含目的基因的DNA片段拼接到载体的切口处
16、用不同的限制酶切割质粒和目的基因的优点是什么?
9、基因工程的基本操作程序是?
可以防止质粒和目的基因的自身环化;以及目的基因与载体的反向连接
(1)目的基因的筛选与获取
17、将目的基因导入动物细胞的方法和常用的受体细胞?
(2)基因表达载体的构建
①方法:显微注射技术
(3)将目的基因导入受体细胞
②受体细胞:受精卵
(4)目的基因的检测与鉴定
18、将目的基因导入微生物细胞的方法和常用的受体细胞
10、获取目的基因的方法有什么?
①常以大肠杆菌作为受体细胞
(1)人工合成目的基因
②一般先用Ca2+处理大肠杆菌细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状
⑵常用PCR特异性地快速扩增目的基因
态,然后再将重组的基因表达载体导入其中。
⑶通过构建基因文库来获取目的基因
19、将目的基因导入植物细胞的方法有哪些?
11、PCR的原理和需要的基本条件分别是什么?
①花粉管通道法(我国科学家独创)
(1)DNA半保留复制。
②农杆菌转化法(主要适用于双子叶和裸子植物)
(2)基本条件
a.转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
①场所:一定的缓冲溶液中,一般要添加Mg?+
b.原理:农杆菌细胞内含有Ti质粒,当它侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA(可转
②模板:DNA母链
移的DNA)转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上
③原料:4种脱氧核甘酸
④酶:耐高温的DNA聚合酶
⑤引物:2种
12、PCR的过程和产物的鉴定分别是?
20、目的基因的检测与鉴定如何进行?
(1)过程
(1)分子水平的检测
①变性:当温度超过90℃时,双链DNA解聚为单链
①通过PCR等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因
②复性:当温度下降到50℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
②利用PCR技术检测目的基因是否转录出了mRNA
③用相应抗体进行抗原一抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质等
(2)个体生物学水平的鉴定;抗虫、抗病接种实验等⑴生殖性克隆:通过克隆技术产生独立生存的新个体
19、乳腺生物反应器的构建,受体细胞是什么?有什么限制?⑵治疗性克隆:利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官,用它们来修复或替代受损的细胞、
受体细胞是受精卵;发育出的个体必须是雌性个体
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