DB13-T 5861-2023 疾病预防控制机构病原微生物核酸检测质量管理技术规范

13I本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利本文件由河北省卫生健康标准化技术委员会（HeB/TC21疾病预防控制机构病原微生物核酸检测质量管理技术规范本文件规定了疾病预防控制机构病原微生物核酸检测质量管理的基本要求、质量保证、污染控本文件适用于疾病预防控制机构病原微生物核酸检测质下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用WS233-2017病原微生物实验室生物安全通用准则GB19489-2008、JJF1874-2020、JJG646-2003.1实时荧光定量PCR仪quantitativereal-time基于聚合酶链式反应原理，通过温度变化循环程序进行靶互酸片段的体外扩增，同时对循环过程中荧光信号进行实施采集和处理，定量或定性分析靶核酸片段的仪3.23.3为满足核酸检测质量要求提供充分可信性所必要的有计划的系4基本要求4.1.1疾病预防控制机构核酸检测实验室，应独立设置，配备高压灭菌区。区。各区域在物理空间上应是完全相互独立的，无论是在空间上还是在使用中，应始终处于完全分2采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分负压工作区，气压由走廊向缓冲间、核心工作间方向递减，形成定向气流趋势；各区之间气压应由4.2设施设备4.2.1基本配置4.2.1.1试剂储存和准备区应配备：a)2℃~8℃和-20℃冰箱；b)超净工作台或生物安全柜；a)2℃~8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱；j)专用个人防护装备（依操作的病原微生c)消耗品：一次性手套、加样器吸头（带）；注：本区配置视产物分析方法不同而定。实验室宜根据自己使4.2.2试剂与耗材使用部门根据核酸检测需求，提出申购计划，对试剂的关键性能参数如精密度、符合率和检出3试剂储存应按照试剂盒存储要求进行，超出有效期的试剂与耗材应与有效期内的试剂耗材分开暂存。暂存期限不应超过本单位与医疗废物处置机构签订的处理周期，并分别按照化学4.2.3质控品检测过程中需使用试剂盒自带的质控品和可溯源至有证标准物质的第三方质控品。使用需遵守a)严格按质控品说明书操作；b)冻干质控品的复溶要确保所用溶剂的质量；c)冻干质控品复溶时所加的量要准确，并尽量保持每次加入量的一致；d)冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内溶物完全溶解，切忌剧烈震摇；核酸检测涉及的检测设备应开展周期检定，校准周期由实验室根据设备的实际使用情况，选择校准周期由实验室根据设备使用情况确定。也可参考校准证书建议的有效时长，并在使用前对4.2.5期间核查a)检测/校准方法要求；4.3人员4.3.1实验室负责人核酸检测实验室应指定专职或兼职负责人，应具有中级以上专业技术职称或同等能力。实验室4.3.2检测人员培训，并通过理论考核。上岗前应由实验室负责人进行能力确认，并由熟悉检测目的、程序、方法4.3.2.2检测人员健康和培训管理应符合WS233-4.3.3特种作业人员从事压力容器的操作人员应按照国家有关规定经特种设备安全监督管理部门培训，取得国家特44.3.4档案管理员4,4样本检测人员应根据样本特点，对样本的接收、流转、保管、处理及样本的识别等各个环节制定管a)上呼吸道样本，包括鼻咽拭子、咽拭子等；b)下呼吸道样本，深咳痰液、肺泡灌洗d)血清样本，应使用无抗凝剂的真空釆血应置于-80℃或以下保存（如无-80℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。应设立专库或专柜单独保存样本。种类样本（如全血、血浆、血清、疱疹液、脑脊液、痰、灌洗液、疱疹液、尿、便等）和不同病原时间、存取次数等）、销毁等的规定。样本处理过程应按照核酸检测试剂盒说明书要求进行。选择磁珠法、膜吸附法等进行核酸提取，可根据核酸提取试剂及扩增体系的要求选择配套的样5.4聚合酶链反应5.5产物分析符合弱阳性质控品能够被检出，阴性样本对照、水、反应液对照阴性，阳性对照阳性，阴性对5.6结果报告5检测机构应按照RB/T214-2017要求出具检测报告，有CMA资质可加盖C5.7室内质控1～3份阴性对照，分别是阴性样本对照（可采用本实验室证实为阴性的标本）、水与反应液对照和仅反应液对照。阴性对照和阳性对照随机放5.8外部质控消毒剂擦拭或喷洒消毒，然后用拖布蘸清水擦拭残余消毒剂实验结束后，生物安全柜应以含有有效氯1000mg/L含氯消毒剂擦拭消毒作用30分钟，然后，用湿巾擦拭残余消毒剂。或用75%酒精（75%酒精湿巾）擦拭消毒，继续通风10分钟后，开启紫外线消医疗废物的处置应按照《医疗废物管理条例》和《医疗卫生机构医疗核酸检测实验室应按以下要求收集检测过程中产生的a)工作液配制过程产生的医疗废物应规范使用双层黄色医疗废物收集袋封装，转移至高压灭b)核酸提取过程产生的废物规范使用双层黄色医疗废物收集袋封装，用含有效氯1000mg/L~c)扩增完成后，反应管不可开盖，应规范使用双层黄色医疗废物收集袋封装，转移至高压灭核酸检测实验室应与临时集中存放处管理部门进行医疗废物交接，填写《实验室废物交接登记6.4个人防护6实验室应配备二级以上个人防护用品。实验室对个人防护用品的选择、使用、维护应有明确的程序和使用指导，可根据病原微生物危害等级分类，采取相应防护措施。检测人