高中生物 2 微生物的培养与应用达标测试 新人教版选修1

专题2微生物的培养与应用

甥题游樨蒯镌

（本试卷满分100分，时间60分钟）

一、选择题（共15小题，每小题4分，共60分）

1.鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物

质是

A.指示剂或化学药品

B.青霉素或琼脂

C.高浓度食盐

D.维生素或指示剂

解析在培养基中加入青霉素或高浓度食盐的目的是抑制某些微生物的生长，而加维生

素，一般是为微生物提供生长因子，起不到选择和鉴别的作用，只有加入某种指示剂或化学

药品后，某些微生物与特定的化学物质发生特定的化学反应，而表现出特有的菌落特征，可

根据这些特征去判断属于哪种生物。

答案A

2.下列有关微生物的培养叙述错误的是

A.微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种

B.培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径

C.纯化大肠杆菌的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法

D.分离自养型微生物的方法是提供纤维素为唯一碳源的培养基

解析微生物培养前应对培养基先灭菌再接种，以防培养基被污染，A正确；酵母菌既

能进行有氧呼吸也能进行无氧呼吸，在有氧呼吸条件下大量繁殖，故溶氧量的变化会影响酵

母菌的繁殖和代谢途径，B正确：筛选分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布

平板法，C正确；用纤维素作为唯一碳源的培养基是用来分离纤维素分解菌的，分离自养型

微生物要用不加有机碳源的培养基，D错误。

答案D

3.下列操作不正确的是

A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双手

B.接种前用火焰灼烧接种环

C.培养基倒入培养皿后应立即将平板倒置

D.在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作

解析接种前用酒精擦拭双手属于消毒，A正确；接种前用火焰灼烧杀死接种环上的微

生物，B正确；培养基倒入培养皿后，待平板冷却凝固约5〜10min后，再将平板倒过来放

置，C错误；接种在酒精灯的火焰旁完成属于灭菌，防止杂菌污染，D错误。

答案C

4.关于微生物的相关说法正确的是

A.微生物既包含无细胞结构的生物、又包含有细胞结构的生物，既包含原核生物、又

包含真核生物，既包含单细胞生物、又包含多细胞生物

B.微生物就是形体微小、肉眼无法看见的生物

C.微生物都进行无性繁殖

D.煮沸消毒法不能杀死芽抱

解析微生物是指一切肉眼看不到或看不清楚，因而需要借助显微镜观察的微小生物，

包含无细胞结构的生物、又包含有细胞结构的生物，既包含原核生物、又包含真核生物，既

包含单细胞生物、又包含多细胞生物，A正确，B错误；微生物的繁殖方式有两种：无性生

殖和有性生殖，C错误；煮沸消毒法能杀死部分芽抱，D错误。

答案A

5.下列有关微生物培养的叙述，正确的是

A.测定土壤样品中的细菌数目，常用平板划线法进行计数

B.在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌

C.酵母菌发酹过程产生的酒精，对其生长没有影响

D.鉴定能分解纤维素的细菌时，需要在培养基中加入刚果红染料

解析平板划线法只能用于微生物的分离，不能用于微生物的计数，微生物的计数可以

用稀释涂布平板法，A错误；在对微生物进行培养前，需要对培养基进行灭菌，但是微生物

不能被灭菌，B错误；酵母菌发酵过程产生的酒精，对其生长有影响，当酒精浓度达到一定

值时，会对自身造成毒害，C错误；鉴定能分解纤维素的细菌时，需要在培养基中加入刚果

红染料，D正确。

答案D

6.下列不属于选择培养基的是

A.培养金黄色葡萄球菌所用的加高浓度食盐的培养基

B.分离自养型细菌所用的不含含碳有机物的培养基

C.加入伊红-美蓝用于检测大肠杆菌的培养基

D.抑制乳酸菌而不抑制酵母菌的含抗生素的培养基

解析培养金黄色葡萄球菌培养基中加高浓度食盐，只有金黄色葡萄球菌能够耐盐生

存，其他微生物的生存受抑制，所以属于选择培养基，A正确；不含含碳有机物的培养基只

有自养型细菌能够生存，其他微生物的生存受抑制，所以属于选择培养基，B正确；检测大

肠杆菌的培养基中加入伊红一美蓝试剂，这样的培养基属于鉴别培养基，C错误；含抗生素

的培养基，可以抑制乳酸菌的生长，而不能抑制酵母菌的生长，所以该培养基属于选择培养

基，D正确。

答案C

7.将细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落（如下图）•某实验小组想检验

两种抗生素的杀菌作用，下列哪个实验方案最合适

营养物体

、菌落

（抗生素抗生素）

［抗生彳根生素'

1加细菌加细菌}{n细菌加细内，

AB

有细或

抗生》根生素

抗生素抗生素

喻菌加胡吟/1）

“猛菌加w

CD

解析根据题意分析本实验的目的是检验两种抗生素的杀菌作用，该实验应遵循对照原

则，即设计只有细菌的空白对照组，实验组是含有A抗生素和含有B抗生素，然后进行对比

分析，符合分析的图示只有C,故C正确。

答案C

8.下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是

成分含量成分含量

NaN023gFeSOi0.01g

K2HPO41g葡萄糖30g

琼脂15gH2O1000mL

MgSO4•7H2O0.5g耳毒系0.1万单位

A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基

B.由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以

是酵母菌或毛霉

C.本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求

D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO”并应加入尿素

解析从培养基成分看，配方中含有有琼脂等凝固剂，属于固体培养基；依用途划分，

该培养基中加入青霉素，因此属于选择培养基，A正确；由培养基的原料可知，葡萄糖属于

有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉,

B正确；本培养基中青霉素的添加是为了筛选能够抗青霉素的微生物，C错误；若用该培养

基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaN（h,并应加入尿素，D正确。

答案C

9.培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，下列有关微生物培养及培养基的描

述错误的是

A.微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼

脂

B.不论何种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽

灭菌

C.接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法

I）.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴定分解尿素的细菌

解析微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，有的还需要生长因

子等特殊的营养，固体和半固体培养基需要琼脂，液体培养基不需要琼脂，A错误；不论何

种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌，B正确；

筛选和分离微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，C正确；以尿素为唯一

氮源的培养基中加入酚红指示剂可以出现红色的环带的菌落，说明其为分解尿素的细菌，D

正确。

答案A

10.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，错误的是

A.该实验所用培养基是尿素为唯一氮源的选择培养基

B.一般选用10'、IO'、IO"倍的稀释液进行平板培养

C.每隔2d统计一次菌落数，选取菌落数目稳定时的记录作为结果

D.称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板都要在火焰旁进行

解析为了能分离出分解尿素的细菌，培养基中只能含有尿素一种氮源，目的是淘汰不

能分解尿素的其他微生物，A正确；样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少，

一般选用10'、10'、106倍的稀释液进行平板培养，B正确；每隔24h统计一次菌落数，选

取菌落数目稳定时的记录作为结果，C错误；为了减少被杂菌感染的机会，在称取土壤、稀

释土壤溶液、涂布平板都要在火焰旁进行，D正确。

答案C

11.在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是

A,分解尿素的细菌B.硝化细菌

C.分解纤维素的细菌D.乳酸菌

解析纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖，刚果红可以与纤维素结

合形成红色的复合物，而在纤维素分解菌的菌落周围，由于缺少纤维素所以会出现透明圈，

故C项正确，A、B、D项错误。

考点：本题考查微生物的分离和培养的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，

把握知识间的内在联系的能力。

答案C

12.在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应

直接对纤维素分解菌进行筛选。某同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位

于

A.①@B.(3)

C.②③D.①②③

解析在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法。刚果红与纤维素形成的红

色复合物，在纤维素被分解后将不再存在，因此在培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的

透明圈，据此可判断图示中的纤维素分解菌位于③。

答案B

13.从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是

A.土壤取样一梯度稀释一稀释涂布平板一发酵培养

B.土壤取样一选择培养一稀释涂布平板一挑选菌落

C.土壤取样一梯度稀释一选择培养一挑选菌落

D.土壤取样一梯度稀释一稀释涂布平板一选择培养一挑选菌落

解析从土壤中筛选纤维素分解菌的正确的流程是:土壤取样一选择培养一稀释涂布平

板一挑选菌落，其中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，因此需要在稀释涂布平板

之前进行，最后根据菌落的特征挑选纤维素分解菌。综上分析，B项正确，A、C、D三项均

错误。

答案B

14.下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，错误的是

A.纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵

B.对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验

C.纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量测定

D.纤维素酶是一种复合酶

解析纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种，A项正确；初步筛选只是分离

纯化的第一步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产生纤维素酶的实验，B项

错误；纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定

量的测定，C项正确；纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即G酶、Cx

酶和葡萄糖昔酶，D项正确。

答案B

15.有关纤维素分解菌选择培养基正确的叙述是

A.可以增加纤维素分解菌的浓度

B.可以减少纤维素分解菌的浓度

C.所用培养基是固体培养基

D.所用培养基是平板培养基

解析使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基可以增加纤维素分解菌的浓度，A正确、

B错误：所用培养基是液体培养基，鉴定时需要使用固体培养基，C错误；所用培养基是液

体培养基，鉴定时需要使用固体培养基，D错误。

答案A

二、非选择题（共4小题，共40分）

16.（10分）（2019•全国卷III）回答下列与细菌培养相关的问题。

（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白

陈”“葡萄糖”或“NaNO」）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基

的pH,其原因是。

硝化细菌在没有碳源的培养基上________（填“能够”或“不能”）生长，原因是

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

（2）用平板培养细菌时一般需要将平板（填“倒置”或“正置”）。

（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特

征来初步区分不同种的微生物，原因是

（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理，这种处理可以杀死丢弃

物中所有的微生物。

解析（1）蛋白陈富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类，能够为微生物提供碳

源和氮源，不同细菌的生长环境不同，要为不同细菌提供不同的pH环境：硝化细菌属于化

能自养型细菌，可以利用空气中的C02作碳源，所以硝化细菌在没有碳源的培养基上能够生

长。

（2）为防止平板培养基皿盖上的冷凝水倒流污染培养基，因而将平板倒置。

（3）一定培养条件下，不同细菌形成的菌落的特征不同，这是区分菌种的重要判断依据。

（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过灭菌过理，这种处理可以杀死丢弃物中所有

的微生物。

答案（1）蛋白陈不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用

空气中的CO?作为碳源

⑵倒置

（3）在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征

（4）灭菌

17.（10分）（2018•课标全国I）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马

铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。

回答下列问题：

（DM培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制的生长，加

入了链霉素的培养基属于培养基。

（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮

源外还有（答出两点即可）。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有

（答也两点即可）。

（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过

加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉

酶微生物的原理是

（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释

倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133：

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是

解析本题主要考查微生物的培养与应用。（1）链霉素可抑制细菌生长，从功能上看，

添加链霉素的培养基属于选择培养基。（2）微生物正常生长需要的营养物质有无机盐、氮源、

碳源等。氮源进入细胞后，可以用于合成含氮大分子物质，如核酸、蛋白质等。（3）淀粉遇

碘液显蓝色，若淀粉被水解，则产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水解，形成以菌落为中心的透

明圈。（4）用稀释涂布平板法统计菌落数目时，为保证统计结果的准确性，一般选择菌落数

在30〜300的平板进行计数，取结果差别不大组别的平均值，进而得出计数结果。而乙同学

的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，即乙同学的结果可信度低。

答案（1）细菌选择（2）碳源、无机盐蛋白质、核酸（3）碘液淀粉遇碘液显蓝

色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈（4）乙同学的结果中，1个平板的计数

结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差

18.（10分）如图表示，研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌技术的相关实验，请据图

回答下列问题：

（1）进行过程①和②的目的分别是和；图中弧线箭头

上“？”的具体操作是。

（2）进行培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是。倒

平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并用记号笔在皿底上标明培养微生物的

名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及等信息。

纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是和

（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入。

培养后，若出现_______色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。

（4）研究者可以通过观察培养形成的菌落的、隆起程度等特

征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。在实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数

目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止________o

解析分析过程图：从土壤中分离尿素分解菌的流程是土壤取样、样品稀释、培养与观

察、细菌计数。进行过程①是利用尿素为唯一氮源进行初步选择培养，进行过程②选取①过

程培养的菌种再次用尿素为氮源进行扩大培养，目的是增加分解尿素的细菌的数量，过程③

是稀释涂布平板法接种培养，以鉴定并挑选所需的分解尿素的菌落；最后通过测定版酶的活

性进一步确定分离菌种类型。

（1）结合分析可知，进行过程①和②的目的分别是选择培养和增加分解尿素的细菌的数

量。图中弧线箭头上“？”的具体操作是挑出菌落。

（2）进行培养基配制和灭菌时，为了防止调节PH过程中培养基被杂菌感染的机会，应先

调节pH后灭菌。倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并用记号笔在皿底

上标明培养微生物的名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类

等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

（3）根据尿素的分解细菌将尿素分解后产生碱性物质氨，氨与酚红指示剂相遇变红的原

理，需要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若出现红色就可以鉴定

其含有能够分解尿素的细菌。

（4）根据不同细菌形成的菌落特征不同，研究者可以通过观察培养形成的菌落的形状、

大小、颜色、隆起程度等特征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。研究者每隔24小时

统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足

导致遗漏细菌数目。

答案（1）选择培养增加分解尿素的细菌的数量挑出菌落（2）先调节pH后灭菌

培养基种类平板划线法稀释涂布平板法（后两空位置可颠倒）（3）酚红指示剂红（4）

形状、大小、颜色因培养时间不足导致遗漏细菌数目

19.（10分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：

（D分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其

中的葡萄糖昔酶可将分解成o

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成_______色复合物。

用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为