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文档简介

α-氨基酸含量的测定（非水滴定法）064黄磊α-氨基酸的α位碳原子上连有氨基和羧基，为两性物质，在水溶液中的Ka和Kb很小，溶液的酸碱性均不明显（羧基Ka＝2.5×10－10，氨基Kb＝2.2×10－12），而且会互相干扰，在水溶液中无法被准确滴定，设计一个滴定α-氨基酸含量的方法。α-氨基酸在水中的形式为：

方法一：

在无水冰醋酸中用HClO4滴定α-氨基酸中的氨基:冰醋酸酸性比水和氨基酸上的羧基都强，给出质子的能力强，相当于α-氨基酸中的氨基碱性增强：在水中：在HAc中：醋酸的酸性比水强，易给出质子使弱碱质子化，滴定终点突跃较大。测定过程：（1）HClO4－HAc滴定剂的配制：冷至25°C的冰醋酸中缓慢加入72％的HClO4溶液，摇匀，再滴加一定量的醋酸酐，摇匀，冷至室温，可用冰醋酸稀释。（2）HClO4－HAc滴定剂的标定：准确称取定量的基准物KHC8H4O4，溶于冰醋酸中，以0.2%结晶紫的冰醋酸溶液为指示剂，从紫色滴定至蓝色。取同样量的同一溶剂作空白滴定。（3）α-氨基酸的滴定：将试样溶于冰醋酸、醋酸酐中，以结晶紫为指示剂，用上述标定好的滴定剂滴定至出现稳定的蓝色。取同样量的同一溶剂作空白滴定。氨基酸的含量＝方法二：在苯－甲醇混合液中用甲醇钠滴定α-氨基酸中的羧基：在水中：

在苯－甲醇中：

CH3O－碱性比OH－强，和－NH3＋反应比OH－完全，平衡常数大，滴定较完全，滴定突跃明显。

测定过程：（1）CH3ONa的苯－甲醇标准液的配制：称取定量的纯金属钠，切片用无水甲醇洗净，分别多次加入冷却的无水甲醇中，溶解后，加入苯稀释。（2）CH3ONa的苯－甲醇标准液的标定：准确称取苯甲酸基准物，溶于二甲基甲酰铵中，用百里酚蓝为指示剂从黄色滴定至蓝色。（3）α-氨基酸的滴定：试样溶于苯－甲醇中，用百里酚蓝为指示剂，用标准液滴定至黄色变为蓝色。氨基酸含量＝参考书目：杭州大学化学系分析化学教研室，分析化学手册（第二版）:第二分册：分

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