黑龙江省哈尔滨市阿城区第二中学2025届高三最后一模生物试题含解析

黑龙江省哈尔滨市阿城区第二中学2025届高三最后一模生物试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于细胞内蛋白质和核酸的叙述，错误的是（）A．两者都有可能降低活化能 B．两者都可能转运氨基酸C．两者具有相同的空间结构 D．两者的合成都需要能量2．避蚊胺是良好的驱蚊剂，能有效地使昆虫失去对人类或动物发出特殊气味的感觉。科学家利用人体散发的气味分子、气味分子+避蚊胺、避蚊胺分别刺激蚊子，三组实验均在触角上检测到了神经元电响应，且发现蚊子对避蚊胺的敏感性高于对气味分子的敏感性。下列叙述错误的是（）A．避蚊胺破坏了蚊子触角上的气味分子感受器细胞B．神经递质与突触后膜上的受体结合不需要消耗能量C．蚊子对气味分子和避蚊胺的敏感性差异可能与受体不同有关D．避蚊胺可能通过破坏蚊子嗅觉受体来发挥驱蚊效果3．研究人员利用不同浓度的秋水仙素溶液处理处理蚕豆和玉米根尖，实验结果如下表。有关叙述不正确的是（）秋水仙素质量分数（%）蚕豆染色体变异率（%）玉米染色体变异率（%）1．113．333．341．174．773．711．117．714．741．176．337．731．3111．377．77A．染色体变异包括结构变异和数目变异B．秋水仙素通过抑制纺锤体的形成使细胞染色体数目加倍C．蚕豆根尖细胞染色体变异率随秋水仙素浓度增大而增大D．玉米比蚕豆对秋水仙素的反应更敏感4．下列各项特征中与多细胞生物统一完成生命活动无关的是（）A．细胞的分化 B．细胞的调亡C．细胞成分稳定不变 D．细胞间的信息交流5．下列关于种群和群落的叙述，错误的是（）A．种群是生物进化的基本单位，种群内出现个体变异是普遍现象B．退耕还林，退塘还湖、布设人工鱼礁后均发生群落的次生演替C．习性相似物种的生活区域重叠得越多，对资源的利用就越充分D．雄孔雀为吸引异性争相开屏，说明行为信息能够影响种间关系6．下列有关生物进化的叙述正确的是（）A．基因型为Rr的圆粒豌豆逐代自交，纯合圆粒逐渐增加，但豌豆并未发生进化B．某森林中黑色桦尺蠖与灰色桦尺蠖是自然选择作用下由一个物种进化成的两个种群C．在自然选择作用下生物间形成生殖隔离是生物进化的标志D．有害基因在自然选择的作用下基因频率会逐渐降为零二、综合题：本大题共4小题7．（9分）最新研究发现，烟草燃烧产生的烟碱（尼古丁）通过与突触前膜上的烟碱接受器结合，引起钙离子由通道流入突触小体，释放神经递质，引起人体暂时兴奋。此外，吸烟者患Ⅱ型糖尿病的风险较高。请分析回答：（1）尼古丁接受器的化学本质是_________________，突触后膜兴奋时神经细胞膜外的电位变化是__________________________。（2）烟草中的烟碱会增加细胞微粒体酶活性，从而加速甲状腺激素的降解。吸烟会导致甲状腺肿大的发生，请解释原因____________________________________________________。（3）Ⅱ型糖尿病唐者体内的胰岛素浓度比正常人多，但胰岛素的作用效果较差。请推测Ⅱ型糖尿病患病机理__________________________。Ⅱ型糖尿病患者体内抗利尿激素的分泌量与正常人相比会___________，判断依据是________________________________。8．（10分）在异彩纷呈的生物世界中，微生物似乎有些沉寂，但它们无处不在，与我们的生活息息相关。请回答下列问题：(1)处理由无机物引起的水体富营养化的过程中，好氧异养菌、厌氧异养菌和自养菌这三种类型微生物发挥作用的先后顺序是_____________________________________________。(2)菌落对微生物研究工作有很大作用，可用于____________________(答出两项即可)等工作中。(3)营养缺陷型菌株因丧失合成某些生活必需物质的能力___________（填“能”或“不能”）在基本培养基上生长。进行NH3→HNO2→HNO3的过程的微生物是____________(填“自养型”或“异养型”)。(4)在腐乳制作过程中必须有能产生________的微生物参与，后期加入香辛料既能调节风味，还具有______________的作用。(5)果酒发酵装置内要留1/3空间，在发酵期的用途是初期______________，耗尽O2后进行______________。9．（10分）果蝇的有眼和无眼受一对等位基因A、a控制，棒眼和圆眼受另一对等位基因B、b控制。现让亲本无眼雌果蝇与圆眼雄果蝇杂交，获得的F1全为棒眼果蝇，让F1相互交配，F2表现型及比例为棒眼雌果蝇∶棒眼雄果蝇∶圆眼雄果蝇∶无眼雌果蝇∶无眼雄果蝇=6∶3∶3∶2∶2。回答下列问题：（l）有眼和无眼中显性性状是____，B．b基因位于________（填“常”或“X”）染色体上。（2）亲本的基因型为____；让F2中的棒眼果蝇自由交配，理论上F3中无眼雄果蝇所占的比例是____。（3）已知染色体缺失会导致基因丢失，若同源染色体均不携带控制眼形的基因时，胚胎致死。某实验小组发现F2中出现一只圆眼雌果蝇，现要探究该雌果蝇产生的可能原因，请以实验中所出现的个体为材料设计最简杂交实验，并得出实验结论。（不考虑环境因素的影响）实验思路：__________________________；实验结论：________________________。10．（10分）将人IL-12基因表达载体导入T细胞，可促进T细胞的增殖分化，促进淋巴因子分泌，增强效应T细胞的杀瘤活性。回答下列问题：（l）体外采用PCR技术扩增IL-12基因时，依据的原理是____，该技术使用Taq酶而不使用细胞DNA聚合酶的主要原因是____。（2）构建的IL-12基因表达载体的组成有IL-12基因、复制原点_____（至少答2点）等，将其导入T细胞常采用的方法是____。（3）检测IL-12基因在T细胞中是否翻译出IL-12蛋白，可采用____，若出现____，则成功翻译。（4）研究表明：正常机体T细胞导入IL-12基因表达载体后，抗体的数量明显增多。原因是________11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

蛋白质和核酸是细胞内的两种生物大分子有机物，其中蛋白质的基本单位是氨基酸，氨基酸有20种，主要由C、H、O、N元素组成；核酸分DNA和RNA，DNA分子的碱基有A、G、C、T四种，RNA分子的碱基有A、G、C、U四种，由C、H、O、N、P元素组成；DNA的多样性决定了蛋白质的多样性。【详解】A、酶具有催化作用的原理是降低化学反应所需的活化能，大多数的酶是蛋白质，少部分是RNA，A正确；B、细胞膜上的载体蛋白可以转运氨基酸，翻译过程中tRNA转运氨基酸，B正确；C、蛋白质具有空间结构，RNA一般是单链，DNA一般是双螺旋结构，C错误；D、氨基酸脱水缩合形成蛋白质需要能量，核苷酸脱水聚合形成核酸需要能量，D正确。故选C。2、A【解析】

1、神经调节的基本方式：反射。2、反射的结构基础：反射弧，组成：感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器。【详解】A、避蚊胺能有效地使昆虫失去对人类或动物发出特殊气味的感觉，从三组实验均在触角上检测到了神经元电响应来看，感受器细胞能产生兴奋，说明不是破坏了蚊子触角上的气味分子感受器细胞，A错误；B、神经递质通过扩散作用到达突触后膜，与突触后膜上的特异性受体结合，不需要消耗能量，B正确；C、气味分子和避蚊胺可能与不同的受体结合，从而导致蚊子对两者的敏感性差异，C正确；D、避蚊胺可能通过破坏蚊子嗅觉受体来发挥驱蚊的效果，D正确。故选A。3、D【解析】

分析题表可知：随秋水仙素浓度的增加，蚕豆和玉米的变异率均增加，秋水仙素的作用机理是抑制纺锤体的形成而诱导染色体数目加倍。【详解】AB、染色体变异包括结构变异和数目变异，其中秋水仙素和低温均可通过抑制抑制纺锤体的形成使细胞染色体数目加倍，A、B正确；CD、据图表实验结果可知：蚕豆和玉米根尖细胞染色体变异率均随秋水仙素浓度增大而增大，且相同秋水仙素浓度下，蚕豆细胞变异率更高，即蚕豆对秋水仙素反应更敏感，C正确，D错误。故选D。【点睛】读懂图表蚕豆和玉米的数据信息是解题关键。4、C【解析】

细胞是生物体结构和功能的基本单位。单细胞的生物，单个细胞就能完成各种生命活动。多细胞的动物植物，他们依赖各种分化的细胞密切合作，共同完成一系列复杂的生命活动。【详解】A、大部分多细胞生物依赖各种分化的细胞密切合作，共同完成一系列复杂的生命活动，A正确；B、在生命延续过程中，死亡的细胞要及时更新，细胞凋亡需要以细胞为单位而有条不紊的进行，对多细胞生物的生命稳定性起重要作用，B正确；C、组成生物体的细胞不是一成不变的，它们在完成各项生命活动的同时，其内在成分不断发生变化，C错误；D、细胞间的信息交流依赖于不同的细胞分工合作，实现生物体功能上的协调，与多细胞生物统一完成生命活动密切相关，D正确。故选C。5、D【解析】

种群指在一定时间内占据一定空间的同种生物的所有个体，种群是生物进化和繁殖的基本单位；群落指生活在一定的自然区域内，相互之间具有直接或间接关系的各种生物的总和，群落中会发生演替与信息传递，其中信息传递的作用包括三个方面：（1）个体：生命活动的正常进行，离不开信息的传递。（2）种群：生物种群的繁衍，离不开信息的传递。（3）群落和生态系统：能调节生物的种间关系，以维持生态系统的稳定。【详解】A、种群是生物进化与繁殖的基本单位，自然状态下由于存在突变与基因重组，因此种群内出现个体变异是普遍现象，A正确；B、初生演替是指一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被，但是被彻底消灭了的地方发生的演替；次生演替是指原来有的植被虽然已经不存在，但是原来有的土壤基本保留，甚至还保留有植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替；退耕还林、退塘还湖、布设人工鱼礁后原来的生存环境没有被破坏，其发生的群落演替属于次生演替，B正确；C、习性相近的物种的生活区域在一定范围内重叠的越多，对资源的利用越充分，但超过一定范围，会影响资源的再生能力，C正确；D、两只雄性孔雀为吸引异性争相开屏，说明生物种群的繁衍，离不开信息的传递作用，D错误。故选D。6、A【解析】

种群是生物进化的基本单位，生物进化的实质是种群基因频率的改变。突变和基因重组，自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节，通过它们的综合作用，种群产生分化，最终导致新物种形成。在这个过程中，突变和基因重组产生生物进化的原材料，自然选择使种群的基因频率定向改变并决定生物进化的方向，隔离是新物种形成的必要条件。【详解】A、基因型为Rr的圆粒豌豆逐代自交的过程中，基因型频率改变了，但是基因频率不变，说明豌豆未发生进化，A正确；B、一片森林中黑色桦尺蠖与灰色桦尺蠖属于同一个物种，B错误；C、生殖隔离是新物种形成的标志，生物进化的标志是种群基因频率的改变，C错误；D、有害基因在自然选择的作用下不一定会降为零，D错误。故选A。【点睛】现代生物进化理论的主要内容是学习的重点知识。本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力。要注意辨析，种群基因频率改变意味着生物进化了，但不一定产生新的物种。新物种的产生必须要经过生殖隔离。生殖隔离的产生不一定要经过长期的地理隔离，如多倍体的形成。二、综合题：本大题共4小题7、糖蛋白(蛋白质)由正变负甲状腺激素偏低，机体通过负反馈调节下丘脑和垂体的分泌，促甲状腺激素浓度增加，促使甲状腺增生肿大胰岛素受体被破坏或者被占据，导致胰岛素不能与胰岛素受体结合，机体血糖浓度升高，胰岛素分泌增加增加Ⅱ型糖尿病患者血液中含有较多葡萄糖，导致细胞外液渗透压增高，抗利尿激素的合成与分泌量增加【解析】

根据题干信息分析，烟碱（尼古丁）通过与突触前膜上的烟碱接受器结合，引起钙离子由通道流入突触小体，释放神经递质，神经递质释放到突触间隙后，与突触后膜上的特异性受体结合，导致人体暂时兴奋。Ⅱ型糖尿病患者的胰岛素水平较高，但是不能作用于胰岛素受体，导致胰岛素不能发挥作用而患糖尿病。【详解】（1）尼古丁接受器在突触前膜上，其本质是糖蛋白；动作电位表现为外负内正，静息电位表现为外正内负，因此突触后膜兴奋时神经细胞膜外的电位变化是由正变负。（2）烟草中的烟碱会增加细胞微粒体酶活性，从而加速甲状腺激素的降解，导致吸烟者的甲状腺激素偏低，机体通过负反馈调节下丘脑和垂体的分泌，促甲状腺激素浓度增加，促使甲状腺增生肿大。（3）根据题意分析，Ⅱ型糖尿病唐者体内的胰岛素浓度比正常人多，但胰岛素的作用效果较差，说明其胰岛素不能正常发挥作用，可能的原因是胰岛素受体被破坏或者被占据，导致胰岛素不能与胰岛素受体结合，机体血糖浓度升高，胰岛素分泌增加。Ⅱ型糖尿病患者血液中含有较多葡萄糖，导致细胞外液渗透压增高，因此其抗利尿激素的合成与分泌量会增加。【点睛】解答本题的关键是掌握兴奋的产生与传递、血糖平衡的调节等知识点，了解兴奋时发生的电位变化以及甲状腺激素的分级调节和负反馈调节的过程，弄清楚糖尿病的发病机理等，进而结合题干要求分析答题。8、自养菌—好氧异养菌—厌氧异养菌分离菌种、鉴定菌种、细菌计数、选种育种(答出两项即可)能自养型蛋白酶防腐杀菌供菌种有氧呼吸大量繁殖酒精发酵【解析】

1、营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株。2、果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，因此酒精发酵的条件是无氧且温度控制在18～25℃，酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，因此可以用酸性重铬酸钾溶液检测发酵过程是否产生酒精；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或酒精转化成醋酸，醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是30-35℃，因此醋酸发酵时应该持续通入氧气并将温度控制在30-35℃；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸；泡菜中亚硝酸盐含量的测定原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐形成玫瑰红色染料。【详解】(1)处理由无机物引起的水体富营养化，由于缺少有机物，所以早期是自养菌，之后好氧异养菌，最后厌氧异养菌，三种类型微生物按照这样的先后顺序发挥作用。(2)菌落对微生物学工作有很大作用，可用于科研等很多方面，如分离菌种、鉴定菌种、细菌计数、选种育种等。(3)基本培养基中含有碳源、氮源、生长因子、水和无机盐等营养，营养缺陷型菌株能生长。进行的过程的微生物是硝化细菌，是自养型生物。(4)在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与蛋白质的水解，后期加入香辛料既能调节风味，使口感良好。还具有防腐和杀菌的作用，提高产品质量。(5)果酒发酵装置内要留1/3空间，在发酵期的用途是初期菌种有氧呼吸产生大量能量，使菌种大量繁殖，耗尽O2后进行酒精发酵。【点睛】对于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的过程、原理、菌种及发酵条件的比较记忆是本题考查的重点。9、有眼XaaXBXB、AAXbY1/18实验思路：让该圆眼雌果蝇与无眼雄果蝇多次杂交，统计子代的性别比例实验结论：若子代雌果蝇：雄果蝇=1:1，则该圆眼雌果蝇是基因突变所致若子代雌果蝇：雄果蝇=2:1，则该圆眼雌果蝇是X染色体缺失导致B基因丢失所致【解析】

从题干信息可以看出，果蝇要表现出圆眼和棒眼的前提是必须要有眼，亲本无眼雌果蝇与圆眼雄果蝇杂交，获得的F1全为棒眼果蝇（有眼），说明有眼为显性性状，F1相互交配，F2表现型及比例为棒眼雌果蝇∶棒眼雄果蝇∶圆眼雄果蝇∶无眼雌果蝇∶无眼雄果蝇=6∶3∶3∶2∶2。雌性中有眼（棒眼）∶无眼=3∶1，雄性中有眼∶无眼=3∶1，雄性中有眼既有棒眼和圆眼，说明Aa在常染色体上，Bb在X染色体上，且棒眼对圆眼为显性。【详解】（1）根据分析亲本无眼雌果蝇与圆眼雄果蝇杂交，获得的F1全为棒眼果蝇（有眼），说明有眼为显性性状；F2代中雌性全为棒眼，雄性既有棒眼又有圆眼，说明Bb位于X染色体上。（2）由于F2代子代比例总数为16=42，说明F1代为双杂合个体，即基因型是AaXBXb和AaXBY，亲代基因型是aaXBXB和AAXbY；F2中雌性棒眼基因型及比例为1AAXBXb，2AaXBXb，1AAXBXB，2AaXBXB，雄性棒眼基因型及比例为1AAXBY，2AaXBY，而无眼雄果蝇的基因型是aaXY，所以二者随机交配无眼雄果蝇的比例为。（3）F1基因型是AaXBXb和AaXBY，产生了圆眼雌性果蝇，其产生的原因可能是基因突变，其基因型是A_XbXb，或染色体缺失会导致基因丢失，其基因型A_XXb；所以设计实验思路：让该圆眼雌果蝇与无眼雄果蝇（aaX-Y）多次杂交，统计子代的性别比例；结论：若子代雌果蝇∶雄果蝇=1∶1，则该圆眼雌果蝇是基因突变所致；若子代雌果蝇∶雄果蝇=2∶1，则该圆眼雌果蝇是X染色体缺失导致B基因丢失所致。【点睛】本题关键是根据子代中出现的数据分析出有眼、无眼、棒眼、圆眼在染色体上的位置及显隐性，在结合自由组合定律进行解答。10、DNA（双链）复制Taq酶热稳定性高，而细胞DNA聚合酶在高温下会失活启动子、终止子、标记基因显微注射法抗原一抗体杂交杂交带正常机体T细胞导入IL–12基因表达载体后，T细胞分泌淋巴因子增多，促进B细胞增殖、分化为浆细胞的能力增强，从而产生更多的抗体【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）PCR扩增目的基因利用的是DNA双链复制的原理，该过程利用的Taq酶热稳定性高，而细胞DNA聚合酶在高温下会失活。（2）基因表达载体的组成有lL–12基因、复制原点、启动子、终止子、标记基因等，将其导入T细胞等动物细胞常采用的方法是显微注射法。（3）检测IL–12基因是否导入、转录和翻译分别用DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术，若出现杂交带，则说明翻译成功。（4）正常机体T细胞导入IL–12基因表达载体后，促进T细胞分泌淋巴因子，而淋巴因子分泌增加，促进B细胞增殖、分化为浆细胞的能力增强，从而产生更多的抗体。【点睛】本题考查基因工程和PCR过程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次