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15I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC1技有限责任公司,内蒙古金草原生态科技集团有限公司,内蒙古杜美牧业生物科技有限公1规模化羊场绵羊支原体肺炎诊断及免疫技术规程本文件规定了规模化羊场绵羊支原体肺炎诊断及免NY/T2835奶山羊饲养管理技术规范NY/T3052舍饲肉羊饲养管理技术规范绵羊肺炎支原体mycoplasmaovi约125nm~500nm,无细胞壁。Mo合成能力差,聚合酶链式反应polymerasechain一种级联反复循环的DNA合成反应过程。一般由三个步骤组成:模板的热变性,寡核苷酸引物复性23无菌条件下取样,在肺组织病变与正常组织交界处,取3cm3~5cm3大小的组织样本,冷藏条在表层消毒后,在病变和正常组织交界处取米粒至绿豆大小深层肺组织置于玻璃匀浆器中,加入3),体变为橙红色,取1mL培养产物转入10mL培养基中,传代培养,盲传三代后,取3mL培养液提取基因4PCR仪,电炉,离心机,混匀器,微量可调移液器,1.5mL离心管,PCR反应管,核酸电泳仪,凝5对照设置:对照模板为绵羊肺炎支原体Y98标准株基因体,1M硫酸溶液。除另有规定,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682分离鉴定并经测序确定为绵羊肺炎支原体的菌液制备全菌灭活抗原,并用其免疫3月龄羔羊制备标绵羊肺炎支原体菌液100mL,4℃12000rpm离心30min,弃上清,取沉淀。将菌体沉淀用0.1MpH7.4的PBS缓冲液洗涤3次,用5mLPBS重悬。菌体重悬液超声裂解,4℃集上清,即为绵羊肺炎支原体全菌抗原。用BCA法测定蛋白质浓度,将抗原冻存于-20℃备用。孔加入至酶联反应板,置4℃冰箱过夜,次日弃6DB15/T3439—20247A.3TAE电泳缓冲液:Tris4.84g/L,冰乙酸1.142入容器中;未溶解的酚红继续加1MNaOH溶液2mL,重复上述步骤(NaOH溶液总量不8B.1绵羊肺炎支原体菌落形态(10×40)见图B.1。B.2绵羊肺炎支原体瑞士染色(10×100)见图B.2。9标引序号说明:1——鼻拭子样本;2——气管分离培养MO;3——肺组织分离培养MO;4——Y98阳性对照; 管分泌物样
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