《Beacon®兔单抗技术如何加速抗体开发》

Beacon@兔单抗技术如何加速抗体开发任为抗体研发总监北京义翘神州科技股份有限公司义翘神州CONTENTB细胞抗体开发技术平台概述1义翘神州Beacon@光导平台相关介绍2兔抗的优势及筛选技术路线3Beacon@兔单抗开发应用案例分享4B细胞抗体开发技术平台概述01义翘神州单B细胞技术平台种属适用范围广天然抗体对抗体多样性高开发周期短抗体亲和力高操作复杂

依赖大型设备LaserbeamVHDJHCY1VKJKCK义翘神州Beacon@光导平台相关介绍02义翘神州义翘神州①Beacon设备②芯片③微流控Beacon简介

01细胞分离02细胞导入03验证实验04导出05ImmunizationandASCEnrichmentNanopenLoadOEPGravityIn-ChannelFluorescent”Bloom”AssayOEPNanopenExportVH/VLrecovery,cloning,expression30-60minutes30-60minutes3-4minutesperNanopenImportExport义翘神州Beacon操作流程细胞分离细胞导入验证实验导出样本细胞孵育抗体磁性微粒目的细胞免疫磁性捕获义翘神州浆细胞分离细胞分离细胞导入验证实验导出义翘神州细胞导入细胞分离细胞导入验证实验导出antigenantibodySecondaryantibodyAvidinbeadscell义翘神州验证实验义翘神州YYYY磁珠亲和素生物素抗原配体YYY磁珠亲和素生物素抗原荧光配体B荧光二抗细胞分离细胞导入验证实验导出验证实验义翘神州细胞分离细胞导入验证实验导出细胞导出兔抗的优势及筛选技术路线03义翘神州义翘神州D.K.Lanning•K.L.Knight，Springer2015,DOI10.1007/978-3-319-20819-0_12兔抗多样化机制义翘神州JustusWeber,etal,Experimental&MolecularMedicine(2017)49,e305;DOI:10.1038/emm.2017.23

B细胞数量更多：与小鼠比，脾脏是小鼠50倍

免疫反应更强：非近交品系繁殖

抗体结构更稳定：

轻链存在链内二硫键

多样化的分子机制：

基因转换（SGC）和体细胞突变（SHM）兔单抗的特点和优势义翘神州更多阳性抗体更好的多样性识别更多表位开发人鼠蛋白抗体结构更稳定亲和力更高特异性更好灵敏度更高兔单抗的特点和优势义翘神州PBMC免疫Beacon筛选兔单B细胞磁珠富集IgG阳性记忆B细胞IgG+B浆细胞Beacon培养单细胞裂解表达评价RT-PCR构建6天义翘神州优势：周期短、天然配对、可介入、多样性好局限：抗原需要标记、培养效率应用：小分子、功能基团的特殊表位抗体开发优势：种属多样、可介入、筛选方式灵活局限：周期长、非天然配对、特异性一般应用：大分子抗原、纳米抗体、突变改造噬菌体流式分选Beacon优势：周期短、效率高、天然配对局限：成本高应用：成药性抗体开发兔单抗筛选平台比较Beacon@兔单抗开发应用案例分享04义翘神州义翘神州富集培养增殖上机IgG+Ag+导出配对序列特异ELISA（OD>1.0）106IgG+记忆B细胞6*1053*1041.4*10470%~1.0*104400180174；97%155；89%72；~50%Beacon上机前后数据义翘神州ELISA阳性抗体序列多样性分析VHVLVH-CDR3VL-CDR3CDR3氨基酸长度CDR3氨基酸长度阳性抗体数阳性抗体数

义翘神州

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mockrabbit-FITC.fcs

Daudi-R0098-0.5ug.fcs

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Daudi-R0124-0.5ug.fcs

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NCI-929-R0098-0.5ug.fcs

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R0142-0.5ug.fcs

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R0145-0.5ug.fcs阳性抗体流式结果

义翘神州IDkon(1/Ms)kdis(1/s)KD(M)FullR^2R00985.05E+052.58E-045.11E-100.9995R01145.06E+054.61E-049.11E-100.9991R01243.55E+051.19E-033.37E-090.9985R01302.45E+055.88E-042.40E-090.9995R01421.43E+051.05E-037.36E-090.998R01455.05E+057.34E-041.46E-090.999R0098R0114R0124R0130R0142R0145亲和力检测最多

万个浆细胞导入

义翘神州

天完成Beacon上机筛选

种B细胞的组织来源：血、脾

种常规检测：结合、交叉、竞争不超过

块板的B细胞导出最多

次检测反应

天筛出兔阳性B细胞不低于

0%PCR配对率123456718功能活性的抗体Beacon开发兔单抗总结12345678关于“北京义翘神州”坚持自主研发生产打造中国生命科学研究“一站式”试剂与服务支撑平台人才与设施荣誉资质设施：---25,000+平米研发中心

---7,000平米洁净车间

团队：900+---硕士以上学历占1/3---10+欧美深造经历14,000+

精品抗体6,500+

重组蛋白47,000+基因