高中三年级上学期物理《动物细胞培养的条件和过程》教学课件

动物细胞培养的条件和过程动物细胞培养：是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。原理：细胞增殖动物细胞培养所需的基本条件营养条件糖类、氨基酸、无机盐、维生素等等无菌、无毒的环境适宜的温度、PH和渗透压适宜的气体的环境其他条件一、动物细胞培养的条件

将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按种类和所需量严格配制的培养基。1.营养（1）培养基构成：合成培养基血清等一些天然成分＋合成培养基：血清等一些天然成分：含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质（2）培养基类型：液体培养基（培养液）2.无菌、无毒的环境①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。②在无菌环境下进行操作。③培养液需要定期更换：

清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。3.温度、pH和渗透压（1）适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；36.5±0.5℃（2）适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________7.2-7.4（3）适宜的渗透压：目的________________________。维持细胞正常的形态和功能4.气体环境（1）气体组成及作用：O2：CO2：细胞代谢所必需维持培养液的pH（2）具体操作：通常采用培养皿或松盖培养瓶。

置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。三、动物细胞培养的过程取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养分瓶进行传代培养取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养放入CO2培养箱中培养传代培养放入CO2培养箱中培养细胞贴壁接触抑制1.取动物组织（1）取材:一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。（2）取材原因:细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养2.制成细胞悬液（1）将组织分散成单个细胞①方法:机械法用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间②原因:Ⅰ.从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；Ⅱ.能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。（2）用培养液将细胞制成细胞悬液。

当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。3.原代培养（1）操作方法：将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中培养。（2）体外培养的动物细胞类型①悬浮生长类：能够悬浮在培养液中生长增殖。

会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。②贴壁生长类：

需要贴附于某些基质表面才能生长增殖（细胞贴壁），大多数细胞属于此类。

除受密度、有害代谢物、营养物质影响外，还会发生接触抑制现象。接触抑制：4.分瓶、进行传代培养（1）需分瓶进行传代培养的原因：

悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质等因素而分裂受阻，贴壁细胞在生长增殖时，除受上述因素影响外，还会发生接触抑制现象（2）方法：①收集细胞a.悬浮生长类：直接用离心法收集b.贴壁生长类：

重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集②将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养重要名词解释①原代培养：

通常将________的细胞培养，即动物组织经_____后的________称为原代培养；分瓶之前处理初次培养②传代培养：将______的细胞培养称为传代培养；分瓶后③细胞贴壁：______体外培养的细胞需要___________________才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的____上，这种现象称为细胞贴壁；大多数贴附于某些基质表面瓶壁④接触抑制：

当_____细胞生长到_____________时，细胞通常会_____________；贴壁表面相互接触停止分裂增殖进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？

用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。

胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养分瓶进行传代培养动物胚胎、幼龄动物机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理将组织