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文档简介
第一节植物细胞工程1.概述植物组织培养的原理和过程。2.概述植物体细胞杂交的原理和过程。学习目标1.生命观念:从生命的物质性的角度理解植物组织培养
需要人工提供适宜的营养基质。2.科学思维:结合具体实例,构建植物组织培养流程简图。3.科学探究:根据实验的原理和步骤,完成天竺葵的组
织培养。素养要求内容索引网络构建课时对点练一、植物组织培养技术二、植物体细胞杂交技术一、植物组织培养技术1.概念教材梳理预习新知
夯实基础细胞全能性离体无菌完整植株2.具体步骤原生质体次氯酸钠溶液无菌水生长、分化无菌氮源植物激素发育途径分化分生薄壁分裂诱导分化胚状体根芽愈伤组织pH成活3.流程图接种愈伤组织生芽生根4.天竺葵的组织培养(1)实验目的①学会配制植物组织培养的培养基(如MS培养基),学会外植体的制备、_____、消毒、灭菌等多项技术。②掌握
在愈伤组织再分化等过程中的作用,学会合理使用植物激素。③尝试进行植物组织培养,关注植物组织培养技术在生产中的应用。接种植物激素(2)实验原理①植物体的每个体细胞都携带了来自受精卵的完整的_______。当其处于_____状态时,经过适当处理后,在适宜的培养基上,经过脱分化、再分化,可发育成完整的植株。②组织培养得到的试管苗是非常幼嫩的植株,其表面蜡质和角质层等保护组织
,气孔
,有叶绿体但光合作用
。这样的试管苗一般要经过
,以逐渐适应自然环境下的生长条件。(3)实验器材和试剂(见课本P49)
基因组离体不发达数目少能力差炼苗(4)实验步骤母液瓶口或瓶壁上高压蒸汽灭菌锅彻底灭菌幼嫩70%氯化汞叶脉外植体6~8灼烧交叉污染生芽生根蛭石或珍珠岩(5)结果与分析(1)脱分化和再分化是植物组织培养的重要过程(
)(2)植物体的任何细胞都具有全能性,也都能表现出全能性(
)(3)诱导生芽的培养基和诱导生根的培养基完全一样(
)(4)脱分化过程一般不需要光照,再分化过程需要光照(
)判断正误√××√核心探讨1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性,那植物细胞具有全能性的原因是什么?突破重难强化素养提示植物体的每个体细胞都携带了来自受精卵的完整的基因组,即植物细胞内含有生物生长发育所需的全套遗传物质。2.来自同一植物体的分化程度不同的体细胞所含遗传信息是否相同?全能性大小是否相同?提示遗传信息相同;全能性大小一般不相同,分化程度低的细胞全能性大于分化程度高的细胞。3.以下是植物组织培养的过程,试回答相关问题:提示脱分化、再分化。(1)①②分别是什么过程?提示避免杂菌在培养基上迅速生长消耗营养,且有些杂菌会危害培养物的生长。(2)在植物组织培养过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作?提示诱导愈伤组织、诱导生芽和诱导生根的培养基不同,它们之间最大的差别是生长素和细胞分裂素的相对浓度的不同。(3)在植物组织培养过程中,需要两次“转接”,一是将愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上,二是长出芽后再转接到诱导生根的培养基上,请问“转接”的原因是什么?核心归纳1.不同细胞全能性的大小(1)体细胞全能性:分化程度低的>分化程度高的,细胞分裂能力强的>细胞分裂能力弱的。(2)不同细胞的全能性:受精卵>生殖细胞>体细胞。(3)不同生物的细胞全能性:植物细胞>动物细胞。2.全能性与细胞分化的关系:随着细胞分化程度的不断提高,细胞的全能性逐渐降低。3.体现细胞全能性的条件材料离体的植物器官、组织、细胞或原生质体培养基种类齐全、比例合适的营养物质及一定比例的植物激素外界条件①无菌操作;②光照:诱导愈伤组织时一般不需要光照,再分化时需要光照4.生长素和细胞分裂素用量的比例对植物细胞发育方向的影响生长素用量与细胞分裂素用量的比值结果比值高有利于根的分化,抑制芽的形成比值低有利于芽的分化,抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成典题应用1.不同细胞的全能性高低不同,下列有关细胞全能性大小的比较,正确的是A.一般细胞分裂能力越弱,细胞全能性越高B.一般情况下,干细胞的全能性高于体细胞C.韧皮部细胞的全能性高于形成层细胞D.衰老细胞的全能性高于幼嫩细胞及时反馈知识落实√解析一般细胞分裂能力越强,其全能性越高,A错误;韧皮部细胞属于成熟细胞,形成层细胞为幼嫩细胞,因此,韧皮部细胞的全能性低于形成层细胞,C错误;一般情况下,干细胞的全能性高于体细胞,幼嫩细胞的全能性高于衰老细胞,B正确、D错误。2.(2021·合肥检测)植物组织培养依据的原理、培养基本过程的顺序及诱导的植物激素分别包括①植物细胞的全能性②离体的植物器官、组织或细胞③根、芽④生长素和细胞分裂素⑤生长素和乙烯⑥愈伤组织⑦再分化⑧脱分化⑨完整植株A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④ B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤ D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤√二、植物体细胞杂交技术1.概念:植物体细胞杂交技术主要是指将自发或人工融合的________培育成新品种
的技术。2.过程(1)去壁:用
去除植物细胞壁,获得原生质体。教材梳理预习新知
夯实基础杂种细胞植物体纤维素酶和果胶酶细胞壁细胞壁杂种细胞AB(2)原生质体的融合①自发融合缺点:效率比较
。②诱导融合a.优点:效率
且对原生质体伤害
。低高小3.植物体细胞杂交的原理(1)原生质体融合的过程利用了细胞质膜的
性。(2)杂种细胞发育成杂种植株利用了植物细胞的
。4.意义:可以克服不同种植物之间杂交的
障碍,打破
,实现远缘物种之间的
,再通过培养便可获得新品种植株。5.问题:杂种后代遗传性状
、再生植株
。流动全能性不亲和生殖隔离核质融合不够稳定寿命较短(1)植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞(
)(2)植物体细胞杂交过程利用了植物组织培养技术(
)(3)植物原生质体融合的原理是植物细胞的全能性(
)(4)若原生质体均为两两融合,则融合后的细胞有3种类型(
)判断正误×√×√核心探讨1.植物体细胞杂交过程去除细胞壁用的是什么酶?利用了酶的什么特点?突破重难强化素养提示用的是纤维素酶和果胶酶;利用了酶的专一性。2.植物体细胞杂交培养基中往往加入蔗糖且浓度略大于原生质体内的浓度,试分析其原因是什么?提示一方面为原生质体提供营养,另一方面保持一定的渗透压,使原生质体保持正常的形态。3.原生质体A与原生质体B融合后,有哪几种类型(只考虑两两融合)?而我们需要的是哪种类型?所以原生质体融合后,我们要进行怎样的处理?提示有3种类型:AA、BB、AB;我们需要的是AB;因此要对融合后的原生质体进行筛选。4.若A细胞具有2x条染色体,2个染色体组,基因型为Aabb。B细胞含有2y条染色体,2个染色体组,基因型为ccDd,则通过植物体细胞杂交技术获得的新植株的染色体条数:
;染色体组数:
;基因型:__________;属于可遗传变异类型中的
。2x+2y4个AabbccDd染色体数目变异核心归纳1.植物体细胞杂交过程步骤图解技术原生质体的获取
酶解法:纤维素酶和果胶酶去除细胞壁原生质体的融合原理:细胞质膜的流动性杂种植株的形成植物组织培养2.植物体细胞杂交技术与植物组织培养技术的比较(1)原理①植物体细胞杂交技术的原理:a.细胞质膜的流动性;b.植物细胞的全能性。②植物组织培养技术的原理:植物细胞的全能性。(2)过程植物体细胞杂交技术包括植物细胞融合和植物组织培养等过程。(3)繁殖方式植物组织培养和植物体细胞杂交都属于无性繁殖;并且后者还能打破生殖隔离,实现远缘杂交。3.杂种植株遗传物质的变化(1)细胞融合属于染色体变异,杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和。(2)染色体组数通常也是两亲本细胞染色体组数之和,形成异源多倍体。4.特别提醒(1)原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁。(2)植物体细胞杂交的结果是获得杂种植株。(3)植物体细胞杂交的培养基中要添加蔗糖溶液且浓度略大于原生质体内的浓度,不仅能为原生质体提供营养,而且还能维持一定的渗透压,使原生质体保持正常的形态。典题应用3.下图为“番茄—马铃薯”的培育过程示意图,下列有关叙述正确的是及时反馈知识落实A.获得a、b细胞需要用胰蛋白酶和果胶酶处理B.诱导a、b细胞融合的化学试剂一般为秋水仙素C.a、b细胞融合为c细胞的原理是细胞质膜具有流动性D.d、e、f过程表示植物的组织培养过程,e、f分别为脱分化和再分化√解析植物体细胞在杂交之前,必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,获得原生质体;诱导a、b细胞融合的化学试剂一般为聚乙二醇;d、e分别为脱分化和再分化过程。4.下图为甲种植物细胞和乙种植物细胞的结构(仅显示细胞核),下列有关叙述错误的是A.乙植物能产生4种不同类型的花粉B.将甲、乙两种植物杂交得到的植物
为二倍体,可育C.用纤维素酶和果胶酶可以去除植物细胞的细胞壁D.经植物体细胞杂交得到的植物为四倍体,基因型为DdYyRr√解析甲、乙是2个不同物种的植物,杂交得到的植物为异源二倍体,减数分裂时由于染色体联会紊乱,不能产生可育精子和卵细胞,因此不可育。网络构建课时对点练题组一细胞的全能性1.下列有关植物细胞全能性的说法,错误的是A.体细胞具有发育成完整个体所必需的全套基因B.高度分化的细胞只有处于离体状态时才有可能表现出全能性C.植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础之一D.从一粒玉米种子长成一棵植株体现了细胞具有全能性√12345678910对点训练1112131415161718解析植物的体细胞具有发育成完整个体所必需的全套基因,即植物细胞的全能性,也是植物组织培养的理论基础之一,A、C正确;高度分化的细胞只有处于离体状态且有适宜的生长条件时才有可能表现出全能性,B正确;从一粒玉米种子长成一棵植株是自然生长过程,不能体现植物细胞的全能性,D错误。1234567891011121314151617182.利用植物的花瓣就能培育出完整的植株,下列相关叙述不正确的是A.组成花瓣的细胞具有全能性B.花瓣细胞中有个体发育所需的全套遗传物质C.利用花瓣培育出完整的植株涉及细胞分裂和细胞分化D.在生物的生长发育过程中,细胞都能表现出全能性√123456789101112131415161718解析花瓣细胞属于植物的体细胞,因其细胞中具有个体发育所需的全套遗传物质,所以,花瓣细胞具有全能性,A、B正确;生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现出全能性,而是分化为各种组织和器官,由花瓣培育出完整植株,其前提是花瓣必须离体培养,且处于适宜的培养条件,在培养过程中涉及细胞分裂和细胞分化,C正确,D错误。123456789101112131415161718题组二植物组织培养技术3.下列关于影响植物组织培养的因素的叙述,错误的是A.幼嫩组织较成熟组织易培养成功B.给离体幼茎消毒需要用到氯化汞溶液C.植物组织培养需要适宜的温度环境D.生长素与细胞分裂素的含量比值较高时,有利于芽的形成1234567891011121314151617√18123456789101112131415161718解析幼嫩组织细胞的分化程度较成熟组织细胞的低,因此幼嫩组织较成熟组织易培养成功,A正确;植物组织培养时需要用体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液对离体幼茎进行消毒,B正确;生长素与细胞分裂素的含量比值较高时,有利于根的形成,D错误。4.下列有关植物组织培养过程中形成的愈伤组织的说法,错误的是A.愈伤组织是离体植物细胞经过脱分化和再分化形成的B.培养基中生长素和细胞分裂素的比值不同,愈伤组织分化的结果不同C.愈伤组织为一团没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞D.愈伤组织在一定条件下培养可以形成完整的植株√解析愈伤组织是离体植物细胞经过脱分化形成的,A错误。1234567891011121314151617185.如图为植物组织培养过程,下列有关说法正确的是A.实验中②试管中细胞全能
性最高B.④试管中培育出的个体都
是纯合子C.①→②过程需要光照D.①→④过程培养基保持不变1234567891011121314151617√18解析④试管中培育出的个体不一定是纯合子,如果外植体取自纯合子,培育出的个体一定是纯合子,如果外植体取自杂合子,培育出的个体一定是杂合子,B错误;①→②过程为脱分化过程,一般不需要光照,C错误;①→②过程为脱分化过程,②→③过程为再分化过程,脱分化和再分化过程中所用的培养基成分不同,D错误。1234567891011121314151617186.天竺葵的组织培养过程中体现无菌操作的有①用体积分数为70%的酒精擦拭超净工作台台面②自来水冲洗天竺葵幼嫩叶片③无菌水冲洗外植体④将外植体在氯化汞溶液中处理5min
⑤无菌滤纸处理⑥培养基灭菌⑦不经灭菌的培养基A.①②③④⑤⑥ B.①③④⑤⑥C.①②④⑤⑥
D.①②④⑤⑦√123456789101112131415161718解析用体积分数为70%的酒精擦拭超净工作台台面,避免接种过程中感染杂菌;自来水冲洗是为了冲掉天竺葵幼嫩叶片上的灰尘、泥土等,而自来水中含有杂菌;无菌水清洗是为了洗去外植体上的酒精等,不用自来水是为了防止自来水中的杂菌污染外植体;在氯化汞溶液中处理5min是为了给外植体消毒;使用无菌滤纸的目的是在吸干外植体表面水分的同时防止杂菌污染;培养基灭菌是为了防止培养基上长出杂菌。123456789101112131415161718题组三植物体细胞杂交技术7.(2021·山东济宁质检)植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是A.细胞壁阻碍了原生质体的融合B.细胞壁使原生质体失去活力C.植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁D.细胞壁不是原生质体的组成部分√123456789101112131415161718解析植物细胞质膜外有细胞壁,具有支持和保护的作用,细胞壁阻碍了原生质体的融合,因此在进行植物体细胞杂交之前,需去除细胞壁,A正确;细胞壁对原生质体有保护作用,不影响原生质体的活力,B错误;植物体细胞具有细胞壁这个结构,C错误;细胞壁不是原生质体的组成部分,但不是植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因,D错误。1234567891011121314151617188.实验人员利用矮牵牛(二倍体,2n=14)的红色花瓣细胞(液泡呈红色)与枸杞(四倍体,4n=48)的叶肉细胞,制备了相应的原生质体,并诱导其融合,经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是A.获得该杂种植株克服了远缘杂交不亲和的障碍B.可利用电融合法、聚乙二醇法等诱导原生质体融合C.可利用光学显微镜观察,筛选出杂种原生质体D.若原生质体均为两两融合,则融合后的细胞中染色体数目均为62条√123456789101112131415161718解析获得该杂种植株的方法是植物体细胞杂交技术,其最大的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍,A正确;诱导植物原生质体融合时,可以采用物理融合法(电融合法)和化学融合法(聚乙二醇法),B正确;杂种原生质体的染色体数目是两种细胞染色体数目之和,可通过显微镜观察到染色体数目的变化,所以可利用显微镜筛选得到融合后的杂种原生质体,C正确;若原生质体均为两两融合,则会形成3种细胞,即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞、杂种细胞,所以融合后的细胞中染色体数目为28条或96条或62条,D错误。1234567891011121314151617189.设计植物体细胞杂交实验是为获得性状优良的新品种作物,通常不需要考虑的是A.选择具有优良性状的亲本B.选择去除细胞壁的酶C.亲本间存在的生殖隔离D.培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例12345678910√1112131415161718解析植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离,实现不同生物间远缘杂交育种,故通常不需要考虑亲本间存在的生殖隔离,C符合题意。10.如图表示利用植物体细胞杂交技术获得杂种植物“白菜—甘蓝”的过程,以下说法错误的是A.①过程表示利用酶解法去除
细胞壁获得原生质体的过程B.②过程可用聚乙二醇诱导原
生质体融合C.③过程中高尔基体活动旺盛D.最终获得的杂种植株体细胞内含19条染色体123456789101112131415161718√1234567891011121314151617解析最终获得的杂种植株体细胞内含有两个亲本的全部遗传物质,即含有20+18=38(条)染色体,故D项错误。18选择题11~12题为单选题,13~16题为多选题。11.在天竺葵的组织培养操作完成了3~4d后,观察同一温室中的外植体,发现有的外植体正常生长,有的外植体死亡,你认为外植体死亡的原因不可能是A.外植体来自衰老的植物组织,其中细胞活性低或结构不完整B.接种时培养基灭菌不彻底,接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体C.培养过程中保持温度、pH的适宜,但没有及时调整各种营养物质、激
素的比例D.愈伤组织形成初期没有给予充足的光照12345678910√11121314151617综合强化18解析愈伤组织形成过程中,细胞还没有开始再分化,也不可能进行光合作用,所以愈伤组织形成初期不需要充足的光照。12345678910111213141516171812.(2019·江苏,20)为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如图。下列叙述正确的是123456789101112131415161718A.过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中B.过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化C.过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性√解析过程①是制备原生质体,获得的原生质体若悬浮在30%的蔗糖溶液中会导致原生质体失水皱缩甚至死亡,A项错误;过程②为再分化过程,需提高细胞分裂素的比例以促进芽的分化,B项错误;过程③不需要用秋水仙素处理,愈伤组织细胞已经具备细胞壁,C项错误;原生质体虽无细胞壁,但含有细胞核等结构,即含有个体发育所需的全套遗传信息,故原生质体仍保持细胞的全能性,D项正确。12345678910111213141516171813.(2021·江苏淮安高二月考)下列有关天竺葵组织培养的叙述,错误的是A.外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高B.为充分利用培养条件,每个锥形瓶可接种多个外植体C.培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株D.外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、高温灭菌处理等措施12345678910√11121314151617√18解析嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低,全能性容易表达,所以外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高,A正确;为充分利用培养条件,每个锥形瓶可接种6~8个外植体,B正确;培养形成的愈伤组织需要转移到分化培养基中才能再分化形成植株,C错误;外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、氯化汞处理等消毒措施,最后为了避免氯化汞的危害,需要用无菌水漂洗4~6次,但是不能高温灭菌,D错误。12345678910111213141516171814.(2021·常熟市中学高二月考)下列关于植物组织培养技术的叙述,错误的是A.以一株植物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型相同B.培养过程中应给予适当光照以促进愈伤组织的光合作用C.适当提高培养基中细胞分裂素的比例有利于愈伤组织分化成芽D.常用茎尖进行组织培养是因为茎尖能进行减数分裂1234567891011121314151617√√√18解析植物的叶肉细胞是体细胞,花药中的花粉是生殖细胞,染色体数是体细胞中的一半,所以以一株植物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型是不同的,A错误;愈伤组织的细胞不能进行光合作用,不需要光照,B错误;当细胞分裂素的效应高于生长素时,可诱导植物组织再分化和芽原基的形成,C正确;常用茎尖、根尖、幼嫩的叶片等进行组织培养是因为其分裂能力强、分化程度低。12345678910111213141516171815.(2021·江苏泰州市姜堰中学高二月考)紫花苜蓿产量高,营养丰富,但耐酸性差,作为饲料易造成家畜臌胀病;百脉根耐酸性强,叶子因富含缩合单宁可防止反刍动物臌胀病的发生。研究人员通过植物体细胞杂交技术最终获得抗臌胀病的新型苜蓿。下列叙述正确的是A.植物体细胞杂交过程中需要先用酶解法去除细胞壁获得原生质体B.诱导原生质体融合的方法有物理融合法、化学融合法和生物融合法三种C.抗臌胀病型苜蓿新品种与紫花苜蓿、百脉根均不属于同一物种D.植物体细胞杂交育种的过程体现了细胞质膜的流动性和细胞的全能性12345678910√11121314151617√18√解析植物体细胞杂交过程中需要先用酶解法去除细胞壁获得原生质体,A正确;诱导原生质体融合的方法有物理融合法和化学融合法两种,B错误;抗臌胀病型苜蓿新品种是紫花苜蓿和百脉根通过植物体细胞杂交获得的新品种,其与紫花苜蓿、百脉根均不属于同一物种,C正确。12345678910111213141516171816.(2021·江苏南通市海安高级中学高二月考)下图是植物体细胞杂交过程示意图,下列叙述错误的是A.过程①需用纤维素酶和果胶
酶溶液处理,且溶液的渗透
压略大于细胞液渗透压B.过程②可用聚乙二醇诱导原生质体融合,主要依据细胞质膜具有选择透过性
原理C.过程③表示细胞壁的再生,④⑤需要根据生长发育进程更换不同的液体
培养基D.最终得到的植株相对于甲、乙,发生了染色体数目变异,因此不具有可育性1234567891011121314151617√√18√解析①为去壁过程,根据酶的专一性原理,需用纤维素酶和果胶酶溶液处理,且溶液的渗透压与细胞液渗透压相当或略大于细胞液渗透压,A正确;过程②要用聚乙二醇等方法诱导原生质体融合,主要依据细胞质膜具有一定的流动性,B错误;123456789101112131415161718过程③表示细胞壁的再生,④为脱分化过程,⑤为再分化过程,两个过程中需要根据生长发育进程更换不同的固体培养基,C错误;正常情况下甲、乙植株可育,说明染色体组是偶数,最终得到的杂种植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异,属于异源多倍体,能进行减数分裂形成可育配子,因此育性正常,D错误。12345678910111213141516171817.下图表示菊花茎段细胞通过无菌操作接种到试管培养基上后,在一定的条件下,形成试管苗的培育过程。请据图回答下列问题:123456789101112131415161718(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。营养物质包括_______和小分子有机物,激素包括细胞分裂素和________两类植物激素。无机物生长素(2)此过程依据的原理是__________________。A和B阶段主要进行的分裂方式是_________,B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞_____等。植物细胞的全能性有丝分裂分化(3)此过程要无菌操作,主要是指对________进行灭
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