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第三章测评

(时间:90分钟满分:100分)

一、选择题(本大题共25小题,每小题2分,共50分。每小题列出的四个备选项中只有一项是

符合题目要求的,不选、多选、错选均不得分)

L动物细胞工程的基础是()

A.动物细胞融合

B.单克隆抗体

C.胚胎移植

D.动物细胞培养

H]D

2.为了将动物组织块分散开,制成一定浓度的细胞悬浮液,应选用下列哪种物质处理选取的动

物组织块?()

A.胃蛋白酶B.盐酸

C.胰蛋白酶D.胰脂肪酶

H]c

画在动物组织细胞的间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,而弹性纤维易被胰蛋白酶在

中性略偏碱性环境下催化分解,而胃蛋白酶在pH为1.5左右时催化效率最高,此环境下动物细

胞被破坏。

3.下列有关动物细胞培养的叙述,正确的是()

A.取到的动物组织消化后的培养为传代培养,有接触抑制现象

B.动物细胞培养过程中,可用解旋酶处理使细胞分散开

C.癌细胞的培养在培养瓶内表面上可形成多层细胞

D.动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵

H]c

解析|取到的动物组织消化后的培养为原代培养,有接触抑制现象,A项错误;动物细胞培养过

程中,可用胰蛋白酶处理使细胞分散开,B项错误;癌细胞的培养在培养瓶内表面上可形成多

层细胞,C项正确;动物细胞培养选用的培养材料大多是动物早期胚胎组织或幼龄动物的组织

器官,D项错误。

4.下列关于动物细胞培养技术的说法,不正确的是()

A.动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础

B.定期更换培养液能够保证充足的营养物质供应

C.在培养液中添加抗生素的目的是预防污染

D.只要条件适宜,细胞就能一直分裂

ggD

H丽动物细胞培养是动物细胞工程的基础,A项正确;定期更换培养液既可以清除代谢废物,

也可以保证充足的营养物质供应,B项正确;在动物细胞培养液中添加一定量的抗生素可预防

污染,C项正确;即使培养条件适宜,正常细胞在体外也不会无限增殖,只有癌细胞能无限增

殖,D项错误。

5.对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是()

A.在利用肝组织块制备细胞悬液时,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

B.细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞呼吸

C.为了防止细胞培养过程中细菌、真菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素

D.在合成培养基中,通常需加入血清等天然成分

H]B

解稠在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬浮液时,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,A项正确;细

胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO?的作用是调节培养基pH的相对稳定,B项

错误;为了防止细胞培养过程中细菌、真菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素,C项正确;

在合成培养基中,通常需加入动物血清等天然成分,D项正确。

6.动物细胞培养包含原代培养和传代培养,其中原代培养过程如下图所示。下列对相关处理及

原因的叙述,错误的是()

A.容器甲中幼龄动物组织需要剪碎处理,因为细胞靠在一起限制细胞的生长和增殖

B.锥形瓶乙中用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞,因为细胞间含有一定量的蛋

白质

C.培养瓶丙应置于100%02中培养,因为是细胞代谢所必需的

D.培养瓶丙的内表面需消毒处理,因为细胞贴附在瓶壁才能生长增殖

H]c

解析|进行动物细胞培养时,首先将取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎,用胰蛋白酶

或胶原蛋白酶等处理使之分散成单个细胞,因为细胞靠在一起限制细胞的生长和增殖,A项正

确;用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞,是因为细胞间含有一定量的蛋白质,而酶

具有专一性,B项正确;细胞培养所需气体主要有和CO2,C)2是细胞代谢所必需的,CO2的作

用是调节培养液pH的稳定,所以要将培养瓶置于含95%的空气和5%的CO2的混合气体的恒

温培养箱中进行培养,C项错误;动物细胞培养时,细胞具有贴附生长和接触抑制的特点,要求

培养瓶的内表面光滑、无毒、易于贴附,D项正确。

7.草莓皱缩病毒(SCV)感染草莓时,会使其叶片扭曲皱缩植株矮化,导致减产。为了能快速有

效检测出该病毒,研究人员利用SCV的病毒粒子免疫健康小鼠,制备相应的单克隆抗体。下列

有关叙述错误的是()

A.从免疫小鼠体内分离获得的B淋巴细胞可无限增殖

B.在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中,需要进行两次筛选

C.用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原-抗体杂交的原理

D.在制备单克隆抗体的过程中,用到了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术

居A

解明从免疫小鼠体内中分离获得的B淋巴细胞不能无限增殖,A项错误;在获得能分泌相应抗

体的杂交瘤细胞的过程中,需要进行两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产

生特异性抗体的杂交瘤细胞,B项正确;用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原-

抗体杂交的原理,C项正确;在制备单克隆抗体的过程中,用到了动物细胞融合技术和动物细

胞培养技术,D项正确。

8.下列有关动物细胞培养时所提供的物质及其作用的描述,不正确的是()

选提供物

作用

项质

主要防止培养过程中被病毒

A抗生素

感染

补充合成培养基中缺乏的物

B血清

满足细胞代谢的需要

二氧化

调节培养液pH的相对稳定

fgA

画动物细胞培养过程中,在培养液中加入一定量的抗生素,主要是为了防止细菌和真菌的

污染,A项错误。

9.单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。科学家米尔斯坦和科勒设计了

一个用己免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验,下图为其实验流程图。下列相关叙述不

正确的是

|已免疫的B淋巴细胞|

|获取大量的单克隆抗体|

A.a是骨髓瘤细胞,②表示在选择培养基上进行培养

B.制备单克隆抗体时,选择B淋巴细胞的原因是它能分泌多种特异性抗体

C.③过程如在体外培养,则需要无菌、无毒,营养充足,温度、pH适宜等环境条件

D.诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇

答案B

解析|对于B淋巴细胞来说,每一个B淋巴细胞经特定抗原刺激后只能分泌一种特异性抗体。

10.下列有关动物细胞培养所需条件的叙述,错误的是()

A.为保证培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境,培养液和培养用具等需要进行消毒处理

B.动物细胞培养应在含95%的空气和5%的CO2的恒温培养箱中培养,CO2的作用是调节培养

液pH的相对稳定

C.培养液中有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等

D.使用合成培养基时,应加入动物的血清等一些天然成分

fgA

画为保证培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境,培养液和培养用具等需要进行灭菌处理。

11.下图表示用仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程,下列相关叙述正确的是()

仙台r\r\rvA厂

。0103o

细胞A细胞B

A.细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合

B.细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质

C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性

些利细胞的融合过程与动物细胞完全相同

ggB

|解析|不同种的细胞也能融合,如人、鼠细胞融合,A项错误;如题图所示,细胞A和细胞B融合

成一个细胞,细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质,B项正确;该融合过程体现了细胞膜

具有流动性,C项错误;植物细胞的融合通常要先去掉细胞壁,其过程与动物细胞不完全相同,D

项错误。

12.细胞毒素可有效杀伤肿瘤细胞,但没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造

成伤害。下图所示为特异性杀死肿瘤细胞的过程,图中抗体是利用单克隆抗体技术制备的。

下列叙述不正确的是()

抗体-ADC被细胞吞噬,

细胞毒素•

细胞凋亡

A.抗体制备需用细胞融合技术

B.细胞毒素具有与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的能力

C.溶酶体破裂加速肿瘤细胞凋亡

D.抗体可使细胞毒素进行特异性的杀伤

答案B

画单克隆抗体制备主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,A项

正确;细胞毒素没有特异性,B项错误;溶酶体破裂,溶酶体内含的蛋白酶及其他水解酶释放至

细胞质基质中,加速了肿瘤细胞凋亡,C项正确;抗体与细胞毒素结合,结合物中的抗体能特异

性地识别肿瘤细胞,使细胞毒素对其产生特异性的杀伤,D项正确。

13.世界首批疾病克隆猴——5只生物节律紊乱体细胞克隆猴在中国诞生,开启了克隆猴模型

应用于生命科学研究的“春天”。科学家采集了一只一岁半的、睡眠紊乱最明显的(生

物节律基因)敲除猴A6的体细胞,通过体细胞核移植技术,获得了5只克隆猴——这是国际上

首次成功构建一批遗传背景一致的生物节律紊乱狒猴模型。下列相关叙述错误的是()

A.体细胞核移植技术的原理是动物细胞核的全能性

B.5只克隆狒猴细胞核基因型与核供体细胞完全一致

C.体细胞核移植时,供核体应为雌性

D.该研究可弥补实验舜猴繁殖周期长、单胎数量少的不足

答案C

画体细胞核移植时,供核体不一定为雌性;体细胞核移植时,供核体可不受年龄影响,且体细

胞数量多,所以该研究可弥补实验猿猴繁殖周期长、单胎数量少的不足。

14.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤错误的是()

A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞

B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞

C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体

函制备单克隆抗体首先需要获得已免疫的B淋巴细胞,因此需将抗原注入小鼠体内,获得能

产生抗体的B淋巴细胞,A项正确;纤维素酶只能催化水解纤维素,用于植物体细胞杂交过程中

的去壁过程,B项错误;动物细胞融合过程中,可以利用聚乙二醇作诱导剂,C项正确;筛选杂交

瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体,D项正确。

15.细胞工程中,选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择不合理的是()

A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞

B.选择胚胎细胞作为细胞核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率

C.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗

D.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体

阿丽高度分化的动物体细胞已经没有分裂能力,因此对其培养得不到大量细胞。

16.若在实验室里实现了“将狗的卵细胞发育成囊胚”,则下列有关叙述错误的是()

A.若该囊胚能继续发育成成年狗,则该狗不能生育

B.若使该囊胚细胞的染色体数目加倍,将得到一只二倍体雌性狗

C.经过染色体加倍,发育成的狗患遗传病的概率与自然繁殖的狗相同

D.在由狗的卵细胞发育成囊胚的过程中,不会出现联会现象

H]c

解丽卵细胞发育成囊胚,该囊胚继续发育成的个体中无同源染色体,无法进行正常的减数分

裂,因此不能生育,A项正确;若使该囊胚细胞的染色体数目加倍,其性染色体组成为XX,表现

为二倍体雌性狗,B项正确;因其遗传物质只来源于一个亲代,在染色体加倍后,隐性致病基因

纯合的概率增大,C项错误;卵细胞发育成囊胚的过程中进行的是有丝分裂,不会出现联会现

象,D项正确。

17.让羊产牛奶,科学家对此做了相关的构想,过程如下图所示。请据图判断,下列说法正确的是

()

告建富d羊M受精卵.产牛奶的羊N羊。

白基因c|D]

细胞核去核卵母细胞

小羊a0羊

小羊b―羊2―早期胚胎《匚重组细胞

小羊c-<—羊3+

A.图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等

B.小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同,小羊a与羊N的性状表现相同

C.若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富,故而它的产奶率高,则小羊a会有这一

优良性状

D.依据目前的生物技术和理论,还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”

H]D

画图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等。

题图中由早期胚胎到小羊a、小羊b、小羊c的过程利用了胚胎分割、胚胎移植技术,由于这

些个体都是由一个细胞(重组细胞)发育而来的,故三■者表现出的性状应该基本相同。由重组细

胞细胞培养、胚胎分割、胚胎移植后获得的小羊a,其细胞核遗传物质来自羊N,细胞质遗传

物质来自羊O,小羊a的性状与羊N不完全相同,羊N细胞的线粒体中的遗传物质不会遗传给

小羊a。

18.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞,制备流程如下图所示。下列叙述正确的

是()

囊胚胚胎干细胞

A.为获得更多的囊胚,采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子

B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同,所以全能性高低不同

C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞

D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在C02培养箱中进行培养

ggD

解板限制获得更多早期胚胎的最大的问题是没有足够的卵母细胞,所以应该通过注射促性腺

激素促进雌鼠超数排卵,A项错误;细胞a和细胞b是由同一个受精卵分裂、分化形成的,所以

细胞a和细胞b的核基因是相同的,B项错误;用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织一段时间,消

化了细胞间的蛋白质,从而获得分散的胚胎干细胞,C项错误;动物细胞培养所需气体主要有

02和CO2,一般将动物细胞置于含95%的空气和5%的CO2的混合气体的培养箱中进行培

养,D项正确。

19.下列有关动物胚胎移植的叙述,错误的是()

A.受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植

B.受体母畜必须处于与供体母畜同期发情的状态

C.超数排卵技术要使用促性腺激素

D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行

H]A

画胚胎移植操作的对象是胚胎而不是受精卵,A项错误;胚胎移植的生理基础是供、受体排

卵后产生相同的生理变化,为移植入的胚胎提供相同的生理环境,B项正确;超数排卵要对供

体用促性腺激素进行处理,C项正确;试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行,后要

移入受体子宫中发育,D项正确。

20.下列关于利用胚胎工程培育高产荷斯坦奶牛的相关叙述,正确的是()

A.供体母牛和受体母牛需要用相同的激素处理

B.胚胎移植可以充分发挥优良雌性个体的繁殖潜能

C.胚胎分割一般选择囊胚或原肠胚期的胚胎

D.注射性激素有助于供体母牛排出较多的次级卵母细胞

H]B

画对受体母牛与供体母牛用同种激素进行同期发情处理,此外还要对供体母牛注射促性腺

激素,促使其超数排卵,A、D两项错误;胚胎移植可以充分发挥优良雌性个体的繁殖潜能,B项

正确;胚胎分割应选用发育良好的囊胚或囊胚期以前的胚胎,C项错误。

21.下图表示通过体外受精培育试管牛的过程,下列叙述错误的是()

驾。旦出母体

A.获取的精子经获能后才能进行体外受精

B.②过程只与细胞膜的流动性有关

C.③过程的细胞增殖方式是有丝分裂

D.④过程属于胚胎移植过程

H]B

22.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够杀死人类某些癌细胞,其过程如

下图所示。下列有关叙述错误的是()

抗癌药物

免疫后脾脏

中的细胞蠹区癌细胞

骨髓瘤细胞

A.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体

B.①过程的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同

C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞

D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性

ggA

函经①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体,需要经过专一抗体检测和克隆化培养,

从而筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,即②过程,A项错误,C项正确;①过程和植物原

生质体融合的基本原理相同,都利用了细胞膜的流动性,B项正确;抗体的靶向作用使③过程

具有高度特异性,D项正确。

23.下列关于细胞工程的叙述,错误的是()

A.电融合法可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体

D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同

H]D

解析|电融合法可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合,A项正确;去除植物细胞壁和将动物

组织分散成单个细胞均需酶处理,前者需用纤维素酶和果胶酶处理,后者需用胰蛋白酶或胶原

蛋白酶处理,B项正确;小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可获得杂交瘤细

胞,用于制备单克隆抗体,C项正确;假设甲品种染色体数目为2M乙品种染色体数目为2N,甲、

乙两品种的体细胞杂种染色体数目为2M+2N,甲、乙两品种杂交后代的染色体数目为M+N,D

项错误。

24.下列有关细胞工程的叙述,正确的是()

A.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合

B.植物原生质体融合的方法有电融合法、PEG融合法、灭活的病毒诱导法

C.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体

D.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体

H]D

解析〔PEG是促细胞融合剂,但植物细胞不能直接融合,需先去壁形成原生质体才能融合;灭活

的病毒诱导法只适用于动物细胞融合;骨髓瘤细胞不能产生抗体;核移植克隆的动物,线粒体

DNA来自供卵母体。

25.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,错误的是()

A.获得B淋巴细胞之前需给动物注射特定的抗原

B.分离出的B淋巴细胞应与骨髓瘤细胞融合

C.需要从融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞

D.得到的所有杂交瘤细胞产生的抗体均相同

H]D

解画单克隆抗体制备之前,需给动物注射特定抗原,以便获得所需的B淋巴细胞,A项正确;分

离出来的B淋巴细胞应与骨髓瘤细胞融合,B项正确;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,形成的融

合细胞有B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞,需要从中筛选

出杂交瘤细胞,C项正确;从动物体内获得的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞

有多种,产生的抗体有多种,需要用相应抗原进行专一检测,才能得到相应的杂交瘤细胞,D项

错误。

二、非选择题(本大题共5小题,共50分)

26.(10分)利用小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”,检测早

孕的准确率在90%以上。请回答下列与该“单抗”制备的有关问题。

(1)在该“单抗”的生产过程中,将作为抗原对小鼠进行注

射。

(2)从小鼠体内脾脏中得到了细胞,设法将鼠的骨髓瘤细胞与该细胞融合,再用

特定的培养基进行筛选,选出融合的杂种细胞,对该细胞还需进行

培养和检测,经多次筛选,就可获得足够数量的符合需要的杂交瘤细胞。

(3)若在体外大规模培养该杂交瘤细胞,需要采取一定的措施保证被培养的细胞处于

的环境中,例如向培养液中加一定量的抗生素等。

(4)单克隆抗体最广泛的用途是用作0

■(1)人绒毛膜促性腺激素(2)B淋巴选择克隆化抗体(3)无菌、无毒(4)体外诊

断试剂

朝⑴生产抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体,应将人绒毛膜促性腺激素作为抗原对小鼠进

行注射。(2)单克隆抗体的制备过程是首先利用已免疫的B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融

合,再通过特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞,然后再通过克隆化培养和专一抗体阳性检

测,筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。(3)若在体外大规模培养该杂交瘤细胞,需要采取

动物细胞培养技术,保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中。

27.(9分)科学家们发现,在核移植过程中,卵子通过表达一些特异因子“修补”了体细胞核中缺

失的端粒酶基因,最终成功地从端粒酶杂合缺失的小鼠体细胞中得到多能干细胞,该多能干细

胞的端粒长度被有效延长,功能得以恢复。通过核移植后形成的多能干细胞,能分化发育成身

体内多种细胞,可用于自身组织修复,并具有安全性。这一成果从实验层面和理论层面都表明

人类“返老还童”不再是梦想。请回答下列问题。

(1)动物体细胞核移植所用的受体细胞通常是,选择该细

胞的主要原因

是O

(2)目前动物核移植技术中普遍使用的去核方法是0哺乳动物的核移

植可以分为和体细胞核移植,其中移植成功率较高的

是O

(3)端粒学说认为,细胞衰老的原因是染色体上的端粒结构缩短,而端粒酶能够修复缩短的端

粒,从而延缓细胞衰老。由此分析,题干中核移植小鼠的端粒酶活性应较正常小鼠

的=

(4)早期胚胎最终要通过技术才能发育成一个完整的个体。

■(1)去核的卵母细胞卵细胞的细胞质具有调控细胞核发育的作用(2)显微操作法胚

胎细胞核移植胚胎细胞核移植(3)高(4)胚胎移植

解析|(1)动物体细胞核移植所用的受体细胞通常是去核的卵母细胞,选择该细胞的主要原因是

卵细胞的细胞质具有调控细胞核发育的作用。(2)普遍使用的去除受体细胞核方法为显微操

作法。哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,其中胚胎细胞核移植的

成功率较高。(3)科学家通过核移植得到了端粒长度被有效延长的多能干细胞,因此,通过核移

植得到的小鼠端粒酶活性比正常小鼠的高。(4)早期胚胎在体外进行培育,但最终发育成为完

整个体仍然需要代孕母体的孕育,在这个过程中需要使用胚胎移植技术。

28.(12分)2018年诺贝尔生理学或医学奖授予詹姆斯・艾利森和本庶佑两位科学家,以表彰他

们在癌症免疫治疗方面作出的贡献。基于他们的相关成果,研制的PD-1单克隆抗体药物,已

被证实在对抗肿瘤方面具有突出效果。回答下列问题。

(1)制备PD-1单克隆抗体药物的过程,要用到动物细胞培养和两

项技术。常用的诱导因素有聚乙二醇处理、、电流刺激等。

(2)制备单克隆抗体时,要选用细胞与细胞融合形成杂交瘤细胞,

原因

(3)需用特定的培养基对融合细胞进行筛选,多次筛选后的杂交瘤细胞可注射到小鼠

的腹腔内,从腹水中提取PD-1单克隆抗体。检测PD-1单克隆抗体的原理

是O

(4)本庶佑研究发现T细胞表面的PD-1蛋白对T细胞有“刹车作用”,可以抑制人体的免疫反

应;同时人体内还存在充当T细胞加速器的特殊蛋白质,可触发全面免疫反应。“刹车片”和“加

速器”同时存在的意义是o

奉(1)动物细胞融合病毒诱导(2)B淋巴骨髓瘤B淋巴细胞具有产生单一抗体的能

力,但不能在体外无限增殖;骨髓瘤细胞能在体外培养条件下无限增殖,但不能产生抗体。杂交

瘤细胞会兼有两个亲本细胞的特性一在体外培养条件下能不断增殖,同时能产生特异性抗

体(3)选择增殖抗原-抗体特异性结合(4)避免了人体免疫功能过强或过弱引起机体

功能的紊乱,确保免疫系统的正常功能

H折|(i)单克隆抗体制备需要用到动物细胞培养技术和动物细胞融合技术,一般诱导动物细胞

融合的因素有聚乙二醇处理、病毒诱导、电流刺激等。(2)制备单克隆抗体时,要选用B淋巴

细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合形成杂交瘤细胞,原因是B淋巴细胞具有产生单一抗体的能

力,但不能在体外无限增殖;骨髓瘤细胞能在体外培养条件下无限增殖,但不能产生抗体。杂交

瘤细胞会兼有两个亲本细胞的特性——在体外培养条件下能不断增殖,同时能产生特异性抗

体。(3)由分析可知,需用特定的选择培养基对融合细胞进行筛选;多次筛选后的杂交瘤细胞可

注射到小鼠的腹腔内增殖,小鼠腹腔相当于天然培养基,从腹水中提取PD-1单克隆抗体。检

测PD-1单克隆抗体的原理是抗原-抗体特异性结合。(4)本庶佑研究发现T细胞表面的PD-1

蛋白对T细胞有“刹车作用”,可以抑制人体的免疫反应;同时人体内还存在充当T细胞加速器

的特殊蛋白质,可触发全面免疫反应。“刹车片”和“加速器”同时存在的意义是避免了人体免疫

功能过强或过弱引起机体功能的紊乱,确保免疫系统的正常功能。

29.(10分)新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受

体结合,从而侵入人体,引起肺炎。图1为病毒侵入后,人体内发生的部分免疫反应示意图。单

克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新型冠状病毒肺炎的研究

热点。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题。

图1

图2

(1)图1中人体内吞噬细胞吞噬病毒,并将病毒的抗原暴露在细胞表面,被

细胞表面的受体识别后激活该细胞。

(2)B淋巴细胞识别入侵的病毒后,在细胞因子的作用下,经过细胞的,

形成细胞。

(3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原学检查,检测病

毒的;采集血液样本主要用于血清学检查,检

测o

⑷据图2所示,研制抗S蛋白单克隆抗体,需先注射以激活小鼠的免疫细胞,

再提取激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用HAT培养基筛选获得细胞。因

为同一种抗原可能激活细胞,还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体

的细胞株。

答案(1)辅助性T(2)增殖分化浆细胞和记忆B(3)核酸抗新型冠状病毒抗体(4)刺突

蛋白(或S蛋白)杂交瘤多种B淋巴

解析(1)图1中,吞噬细胞吞噬病毒,并将病毒抗原呈递给辅助性T细胞,后者识别抗原后被激

活,分泌细胞因子。(2)B淋巴细胞识别入侵的病毒后,在细胞因子的作用下,经过细胞的增殖分

化,形成浆细胞和记忆B细胞。(3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者,采集鼻咽拭子

用于病原学检查时,检测的是病毒的核酸;采集血液样本用于血清学检查时,检测的是抗新型

冠状病毒抗体。(4)为了诱导小鼠产生能够分泌抗S蛋白抗体的B淋巴细胞,实验时需先给小

鼠注射S蛋白,再提取激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用HAT培养基筛选可获得杂交

瘤细胞。因为同一种抗原可能激活多种B淋巴细胞,还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体

的细胞株。

30.(9分)下图是转基因狒猴培育过程示意图,请据图回答下列问题。

色荧

绿|雌性一猴|画一猴|

基③二1④

I卵库细胞I

⑤南画

基因表上喧画”患阿孽里转基因

达载体胎I宫猫:猴

(1)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的02以维持细胞呼吸外,还需要提供CO2气体

以。

(2)图中过程⑦称为,为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同,

此前需要对代孕雌猴作处理。受体对移入子宫的外来胚胎基本上不会发

生________________________,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

⑶若要同时获得多只与此转基因肺猴相同的小猴,可对早期胚胎进行胚胎分割,选择

的胚胎进行操作。若选用囊胚期的胚胎,在操作过程需要特别注意的

是O

答案(1)调节培养液pH的相对稳定(2)胚胎移植同期发情免疫排斥反应(3)囊胚或囊

胚期以前将内细胞团均等分割

|解析|(1)CO2可以调节培养液pH的相对稳定。(2)图2中过程⑦为胚胎移植,胚胎移植时要用

激素处理,让代孕雌猴与供体雌猴同期发情,使其生殖器官的生理变化相同。(3)选择发育良好

的早期胚胎(囊胚或囊胚期以前的胚胎)进行胚胎分割。对囊胚进行分割时,要注意将内细胞团

均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

第二节通过细胞核移植克隆动物

A1必备知识基础练

L下列关于动物细胞核移植技术和克隆动物的叙述,正确的是()

A.目前在实验中,科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体

B.核移植得到的克隆动物一般不存在健康问题

C.利用动物细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的动物个体

D.提供细胞核和去核卵母细胞的动物都应为雌性

H]c

画高度分化的动物细胞的全能性受到限制,所以不能用类似植物组织培养的方法获得完整

的动物个体,A项错误;克隆技术并没有完全成熟,大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺

陷类的健康问题,B项错误;提供细胞核的动物不一定为雌性,D项错误。

2.2018年1月25日,生物学顶尖学术期刊《细胞》以封面文章的形式在线发表一项舜猴繁殖

的新技术,该繁殖技术的过程如下图所示,请问该技术属于生物技术中的哪种技术手

段?()

A.胚胎细胞核移植技术

B.体细胞核移植技术

C.单倍体育种技术

D.杂交育种技术

H]B

3.科学家将黑鼠卵丘细胞(卵巢内卵细胞周围的体细胞)的核物质注入去核的棕鼠卵母细胞内,

激活以后,移入白鼠的子宫,白鼠最终产下一只克隆鼠,这只克隆鼠的体色和性别是()

A.黑色雌鼠

B.白色雌鼠

C.棕色雄鼠

D.灰色雌鼠

SS]A

I解析I生物的性别由细胞核中的性染色体决定,根据题干将黑鼠卵丘细胞的细胞核注入去核的

卵母细胞中,发育得到的克隆鼠是黑色雌鼠。

4.科学家培育克隆羊时,使用了三种细胞核的供体细胞,分别将这些细胞核移入去核卵母细胞

的细胞质中,形成重组细胞,发育成重组胚胎,这些重组胚胎的发育情况如下表所示。据此分析

错误的是()

细胞核供体细胞的类妊娠数/受体母羊

型数

乳腺上皮细胞1/13

胚胎成纤维细胞4/10

早期胚胎细胞14/27

A.早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞,妊娠成功率最高

B.克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同

C.体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植

D.重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质有关

H]B

解析|分析表格数据可知,早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高,A项正确;克

隆羊细胞核的遗传信息来自细胞核的供体,细胞质的遗传信息来自去核卵母细胞,B项错误;

对比表格中的数据可知,体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植,C项正确;在胚胎和个体发

育中,细胞质具有调控细胞核发育的作用,可见重组细胞发育与去核卵母细胞的细胞质有关,D

项正确。

5.据英国《卫报》披露,纽卡斯尔大学研究人员不久前成功实现一项生殖医学技术,将患有线

粒体疾病妇女的受精卵中的细胞核移植到健康妇女捐献的去核卵子中,最终产下了健康的婴

儿。下列叙述错误的是()

A.此项技术的基础是动物细胞培养

B.此项技术的原理与克隆羊“多莉”完全相同

C.健康妇女捐献的卵细胞的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用

D.婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵细胞的妇女三方的遗传特征

H]B

画动物克隆技术的基础是动物细胞培养,A项正确;此项技术用的是受精卵的细胞核,而克

隆羊“多莉”用的是高度分化的乳腺细胞的细胞核,分化程度不同,B项错误;卵细胞的细胞质具

有调控移入细胞核发育的作用,C项正确;婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵细胞的妇

女三方的遗传特征,D项正确。

6.下列有关动物细胞核移植技术的说法,错误的是()

A.细胞核移植技术在多种动物中获得了成功,成功率非常高

B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进

C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题

D.克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议

H]A

解析尽管核移植技术不断发展和完善,但仍不尽成熟,通过核移植技术克隆动物还存在着成

功率低、某些克隆动物早衰等问题。

7.下列关于核移植技术应用的叙述,不正确的是()

A.克隆动物组织、器官可作为异种移植的供体

B.研究克隆动物和动物细胞有利于了解胚胎发育过程

C.有望用核移植技术增加濒危物种的存活数量

D.用克隆动物做疾病模型可用于治疗人类的各种疾病

H]D

画克隆动物组织、器官可作为异种移植的供体,解决人体器官移植供体来源短缺的问题,A

项正确;研究克隆动物和动物细胞有利于了解胚胎发育过程,B项正确;核移植技术有望增加

濒危物种的存活数量,C项正确;用克隆动物做疾病模型能为研究疾病的致病机制和开发相应

的药物提供帮助,但不能用于治疗人类的各种疾病,D项错误。

8.下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。

回答下列问题。

(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2小则其性染色体的组成可为-过

程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用

的方法。

(2)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因

是_______________________________________________________________________________

____O

(3)与克隆羊“多莉”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明

了。

■(1)XX或XY显微操作(2)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产

生影响(3)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性

B级

9.下图为克隆羊“多莉”的培育过程示意图:

下列相关表述错误的是()

A.克隆羊“多莉”的主要性状与甲羊一致,因为其细胞核基因来自甲羊

B.克隆羊“多莉”的培育过程中采用的生物技术有细胞核移植和动物细胞培养等

C.乙羊的去核卵母细胞为重组细胞的基因表达提供了细胞内的环境条件

D.此过程说明高度分化的动物细胞具有全能性

H]D

画生物的性状主要由细胞核中的遗传物质控制,克隆羊的主要性状与提供细胞核的个体基

本一致,A项正确;克隆羊“多莉”的培育过程中用到了细胞核移植技术和动物细胞培养等技

术,B项正确;选择去核卵母细胞是因为其细胞质中含有使体细胞核表达全能性的物质,C项正

确;此实验只能说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性,D项错误。

10.中国自主完成的首批成年体细胞克隆牛有3个母亲,A牛提供细胞核即供体细胞,B牛提供

去除细胞核的卵母细胞即受体细胞,两种细胞在电刺激下融合之后,通过细胞分裂形成早期胚

胎,再将这个胚胎植入C牛子宫内。据此判断,下列说法错误的是()

A.培育出的克隆牛几乎是A牛的复制品

B.克隆牛不仅具有A牛的遗传特征,也具有B牛的遗传特征

C.“克隆牛”是有性生殖的产物

D.通过体细胞克隆技术培育出的小牛,其性别取决于供体细胞,人们可以根据需要,有目的地

控制小牛的性别

打C

1L治疗性克隆有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应等问题。下图表示治疗

性克隆的过程,下列有关叙述不正确的是()

病人驯*健康体细胞上&细胞核里4去核卵母细胞

I

应用治疗重组细胞

脏器组织细胞、一②脏器组织干细胞、一①皿

神经细胞等一神经组织干细胞等一胫附…十1细恻

A.上述过程利用了动物细胞核移植和动物细胞培养等技术

B.上述过程充分说明细胞核移植技术已完全成熟

C.①过程的完成离不开胚胎干细胞的增殖和分化

D.①②过程都发生了DNA分子的复制和蛋白质的合成

前B

解丽图示过程利用了动物细胞核移植和动物细胞培养等技术;细胞核移植技术还不尽成熟;

①②过程都有细胞的增殖、分化,因此都会发生DNA分子的复制和蛋白质的合成。

12.据2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克

隆,获得两只克隆猴一“中中”和“华华”。回答下列问题。

(1)“中中,,和“华华,,的获得涉及核移植过程,动物细胞核移植是

指o通过核

移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目(填“减半”“加

倍”或"不变’)。

(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动

物的难度(填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因

是O

(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常所

得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目(填“相同”或“不同”),性染色体组合―

(填“相同"或‘不同")。

量(1)将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使其发育成动物个体的过程不变(2)

小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易(3)相同不同

隧画(1)动物细胞核移植是指将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使其发育为动物个体

的过程。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物,与核供体相比,其细胞的染色体数目不变。

(2)由于动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,而动物体细胞分化程度高,恢复其

全能性十分困难,所以,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度明显低于体细胞核移植。(3)哺乳

动物雌性和雄性个体的体细胞中常染色体数目相同,所以分别以雌性和雄性个体的体细胞为

供体,克隆动物体细胞的常染色体数目相同,但其性染色体组合不同。

第三节通过细胞融合可产生具有新特性的细胞

A1必备知识基础练

L动物细胞融合属于动物细胞工程的技术手段之一,下列有关动物细胞融合的叙述,正确的是

()

A.动物细胞融合产生的细胞称为重组细胞

B.融合后形成的细胞为单核或多核细胞

C.常用的诱导融合的生物诱导剂是聚乙二醇、灭活的病毒等

D.可由两个或多个动物细胞结合成一个细胞

ggD

|解析|动物细胞融合产生的细胞称为杂交细胞,核移植产生的细胞称为重组细胞,A项错误;融

合后形成具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,B项错误;诱导动物细胞融合的生物诱导

剂是灭活的病毒,聚乙二醇属于化学诱导剂,C项错误;动物细胞融合就是在一些融合因子的

作用下,将两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的技术,D项正确。

2.与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是()

A.细胞膜的流动性、离心法

B.细胞膜的流动性、灭活病毒诱导法

C.细胞的增殖、电融合法

D.细胞的增殖、灭活病毒诱导法

H]B

解析|植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性,动物细胞融合的原理是

细胞膜的流动性;动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇融合法、电融合法和灭活病毒诱导法

等,其中灭活病毒诱导法是其特有的方法,而聚乙二醇融合法和电融合法均可用于诱导植物体

细胞杂交。

3.下列关于动物细胞融合与单克隆抗体制备的叙述,错误的是()

A.动物细胞经聚乙二醇诱导融合后再通过培养能得到优良动物个体

B.单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂

C.杂交瘤细胞是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞相融合的结果

D.单克隆抗体和传统方法生产的抗体化学本质相同

H]A

解析|由于动物细胞的全能性受到限制,动物细胞融合形成的杂交细胞一般不能培育成动物个

体,A项错误;单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以

大量制备,最广泛的用途是用作体外诊断试剂,B项正确;杂交瘤细胞是骨髓瘤细胞和B淋巴细

胞融合而成的,C项正确;单克隆抗体和传统方法生产的抗体化学本质相同,都是蛋白质,D项

正确。

4.在单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后要用特定培养基筛选出杂

交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是()

①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身

融合细胞⑤杂交瘤细胞

A.①②③④B.①③⑤

C②④D.①③

H]A

解画特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大量增殖,又能产生抗体的杂交瘤细胞,因此

其他的细胞都不能在此培养基上生存。在这种培养基上不能存活和增殖的细胞有①B淋巴细

胞、②小鼠骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合细胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞。

5.下列关于单克隆抗体制备的说法,正确的是()

A.将特定抗原注射到小鼠体内,可以从小鼠血清中获得单克隆抗体

B.经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外培养时可分泌单克隆抗体

C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤细胞

D.筛选出杂交瘤细胞后,需利用特定抗原再次筛选分泌所需抗体的细胞

ggD

国皿向小鼠体内注射特定的抗原,小鼠会产生浆细胞,可以从小鼠血清中获得抗体,但此时的

抗体不是单克隆抗体,A项错误;经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外无增殖能力,无法通过

培养获得单克隆抗体,B项错误;诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,产生的融合细胞可能是

融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、融合的B淋巴细胞和B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞和

骨髓瘤细胞,C项错误;单克隆抗体制备过程需要两次筛选悌一次筛选出杂交瘤细胞,第二次

筛选出能够产生所需抗体的杂交瘤细胞,因此,经过B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤

细胞还需进行抗体阳性检测才可进行体内或体外培养,D项正确。

6.下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是()

A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的细胞毒性T细胞

B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成

C.③同时具有脾脏细胞和小鼠骨髓瘤细胞的特性

D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞

H]D

画①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞,A项错误;胰蛋白酶可使组织细胞分散为

单个细胞,B项错误;③为杂交细胞,若是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞,才同

时具有B淋巴细胞(可产生抗体)和骨髓瘤细胞(可无限增殖)的特性,C项错误。

7.下图为制备单克隆抗体的过程示意图,下列相关叙述错误的是()

小,②细胞融合③杂交④细胞培养一『黑直立培养

①小曝骨髓廿痛细胞曾益:[

瘤细胞FT*

足够数量的细胞表I*⑦从培养液中提取大量抗体

A.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞

B.②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质

C.上图中有一处明显错误

D.⑤可以无限增殖

H]A

8.下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程。下列叙述错误的是()

甲隹驾小鼠・选择

细胞融合.丁培养一壬筛迤.分泌一抗胃癌单

乙一"丙一"丁一"克隆抗体

骨髓瘤细胞•

A.甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原

B.乙需通过人工诱导细胞融合才能获得

C.融合得到的细胞乙均能无限增殖

D.需对丙进行抗体检测,多次筛选后才可获得丁

ggc

癖树根据题意可知,甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原,A项正确;聚乙二醇处理、电

流刺激或病毒诱导等可诱导细胞融合获得乙,B项正确;乙包括融合的B淋巴细胞和B淋巴细

胞,其不能无限增殖,C

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