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文档简介

关于荧光PCR检测原理一、荧光信号的检测第2页,共17页，星期六，2024年，5月

荧光标记信号的产生

荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，产生一个更长波长的发射光第3页,共17页，星期六，2024年，5月FRET？

某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRET。第4页,共17页，星期六，2024年，5月荧光信号荧光染料SYBRgreen——特异性结合双链，释放荧光信号特异性荧光探针Taqman双荧光标记探针molecularBeacon荧光标记探针荧光标记杂交双探针第5页,共17页，星期六，2024年，5月Taqman特异性荧光双标记探针Taqman5’→3’外切酶活性第6页,共17页，星期六，2024年，5月Molecular

beacon第7页,共17页，星期六，2024年，5月荧光标记杂交双探针第8页,共17页，星期六，2024年，5月二、典型的荧光PCR扩增曲线阳性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线第9页,共17页，星期六，2024年，5月Bio-radiCycler扩增曲线第10页,共17页，星期六，2024年，5月PE-5700扩增曲线第11页,共17页，星期六，2024年，5月PE-7700扩增曲线第12页,共17页，星期六，2024年，5月RocheLightCycler扩增曲线第13页,共17页，星期六，2024年，5月三、Ct值样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数Ct值第14页,共17页，星期六，2024年，5月四、荧光PCR定量的原理第15页,共17页，星期六，2024年，5月Unknown未知样本拷贝数的确定第16页,共17页，星期六

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